李福新
- 作品数:2 被引量:2H指数:1
- 供职机构:吉林农业科技学院更多>>
- 发文基金:吉林省教育厅“十二五”社会科学研究项目更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 重组人胸腺肽基因的串联表达及表达条件的优化
- 2016年
- 以胸腺肽串联基因设计合成表达片段,构建胸腺肽表达质粒p ET22b-116P,转化到感受态细胞,研究不同诱导剂IPTG浓度、诱导温度和诱导表达时间对胸腺肽基因表达的影响,结果表明当诱导剂浓度为1.0mmol/L,诱导温度为25℃,诱导时间为8h下能获得高质量重组人胸腺肽蛋白。
- 李福新周岩田斌魏铭玉刘香秀徐亚维
- 关键词:胸腺肽
- 重组人胸腺肽α原在单一蛋白生产系统中的高效表达被引量:2
- 2017年
- 利用冷休克表达载体构建含有人胸腺肽α原(proTα)编码基因的质粒并在大肠杆菌单一蛋白生产(SPP)系统中表达单一的可溶性蛋白。以proTαmRNA基因序列为模板敲出ACA序列,设计并合成proTα-lessACA目的基因片段后,直接克隆到原核冷休克表达载体pColdⅡ(sp-4)上,将pColdⅡ(sp-4)-proTα-lessACA质粒转化到Escherichia coli BL21感受态细胞中,筛选阳性克隆后采用NdeⅠ和HindⅢ限制性内切酶双酶切鉴定。共转pMaz F质粒后,采用冷休克方法表达proTα并采用SDS-PAGE检测鉴定。结果成功构建重组表达质粒pColdⅡ(sp-4)-proTα-lessACA,经冷休克表达后在E.coli BL21(DE3)菌中获得大量单一的proTα。原核表达质粒pColdⅡ(sp-4)-proTα-lessACA构建和单一proTα在SPP系统中表达的成功,为进一步研究proTα结构和生理功能提供帮助。
- 徐亚维李福新薛建王霞