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基于短小芽孢杆菌转录组的强启动子鉴定: 2021年; 短小芽孢杆菌(Brevibacillus choshinensis)是一种潜在的高效表达系统,但由于高效强启动子的缺乏严重限制了该表达系统的应用。该研究的主要目的是为B.choshinensis表达系统提供更多新高效强启动子。在该研究中,首先通过转录组测序技术获得B.choshinensis的转录组数据。然后基于基因的转录水平及功能,筛选高表达目的基因。基于筛选到的目的基因的启动子序列,以α-淀粉酶为报告蛋白构建了强启动子筛选文库。将含有不同启动子的重组菌摇瓶发酵后,以胞外α-淀粉酶活性为筛选指标,获得了内源性强启动子PE和PF,对应的重组菌BCWES和BCWFS胞外α-淀粉酶活性分别是常用的强启动子P2介导的对照菌BCWPS胞外α-淀粉酶活性的2.3和1.3倍。最后以蔗糖异构酶和角质酶为新的报告蛋白证明了PE启动子具有通用性,且经3 L罐发酵进一步验证了重组菌BCWES高分泌生产α-淀粉酶的能力。该研究丰富了可用于B.choshinensis表达系统的强启动子数量,促进了B.choshinensis作为一种新高效表达系统的开发与应用。; 姚动邦张康张康吴敬; 关键词：短小芽孢杆菌 Α-淀粉酶启动子

低温下煤岩体力学特性实验研究被引量：6: 2016年; 基于岩石低温损伤问题，为进一步研究煤岩在低温下力学特性，选取黄陵煤岩样，冻结到不同温度（-60—20℃）后进行单轴压缩实验，研究力学性质及破坏特点。实验结果表明：低温下煤岩体积明显收缩，温度越低其体积收缩程度越大，平均收缩率约为0．02mm／cc；根据曲线图采用面积积分法量化出各温度下煤岩破坏做功总值以及各阶段吸收的能量；煤岩体的单轴抗压强度随着温度降低有增加趋势，但当温度低于-40℃后趋于稳定；煤岩随温度降低逐渐呈现脆性增强，塑性减弱趋势，其破坏以类似岩片崩落为主。; 张辛亥张康丁峰万旭郭戎; 关键词：岩石力学煤岩低温环境单轴压缩力学特性

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张康