王鹏飞
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小干扰RNA沉默鸟苷酰环化酶C基因促进胃癌细胞的凋亡
- 2010年
- 目的:利用RNA干扰技术,研究靶向鸟苷酰环化酶C(Guanylyl cyclaseC,GC-C)的小干扰RNA(siRNA)在体外对人胃癌SGC-7901细胞凋亡的影响。方法:利用pSilencerTM4.1-CMV neo通过siRNA表达载体法制备GC-CsiRNA,将GC-CsiRNA转染胃癌SGC-7901细胞,流式细胞检测技术及原位末端标记(TUNEL)法检测转染前后细胞的凋亡。结果:流式细胞仪结果分析示转染组平均凋亡率为5.48%±0.10%(48h)和5.63%±0.11%(72h),较对照组0.50%±0.09%明显增加(P<0.05)。TUNEL检测见特有的凋亡征象,对照组则无明显变化。结论:沉默鸟苷酰环化酶C基因可促进胃癌细胞凋亡,可能为临床探索胃癌生物治疗提供新的靶点。
- 王鹏飞张洁毛振彪
- 关键词：胃癌细胞小干扰RNA
- shRNA抑制GC-C基因表达对人胃癌SGC-7901细胞生物学功能的影响
- 2009年
- 目的研究靶向鸟苷酸环化酶C(GC-C)的短发夹RNA(shRNA)对人胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡和细胞周期等生物学功能的影响。方法构建针对人GC-C基因的shRNA真核表达载体,将其转染入人胃癌SGC-7901细胞,采用半定量RT-PCR和Western blotting法检测细胞中GC-C在mRNA和蛋白水平的变化。以CCK-8法、流式细胞术和原位末端标记法检测转染GC-CshRNA真核表达载体的SGC-7901细胞增殖、凋亡及细胞周期等生物学指标的变化。结果经DNA测序鉴定,所得到的表达载体插入片段序列与GenBank中的序列一致。shRNA-GC-C真核表达载体转染能有效抑制GC-C基因的表达,以shRNA-GC-CⅢ序列的抑制效果最佳。转染GC-CshRNA真核表达载体后SGC-7901细胞的增殖能力受到抑制(P<0.05);细胞形态发生改变,细胞体积缩小,核固缩,染色质浓缩聚集于核膜;流式细胞术检测显示G1峰前出现亚二倍体峰,转染48、72h后凋亡率分别为5.47%和5.63%(P<0.05)。结论靶向GC-C基因的shRNA可有效抑制人胃癌SGC-7901细胞生长,并促进细胞凋亡,该作用与下调靶基因GC-C的表达有关;GC-C可能是胃癌治疗的一个潜在靶点。
- 王树树陈玉萍王鹏飞张健锋朱惠君毛振彪
- 关键词：鸟苷酸环化酶胃肿瘤SHRNA
- 鸟苷酰环化酶C小干扰RNA对胃癌细胞生长的影响被引量：1
- 2010年
- 目的:研究靶向鸟苷酰环化酶C(Guanylyl cyclaseC,GC-C)的小干扰RNA(siRNA)对人胃癌SGC-7901细胞体外生长能力的影响。方法:利用pSilencer TM4.1-CMVneo通过siRNA表达载体法制备GC-CsiRNA。将GC-CsiRNA转染胃癌SGC-7901细胞,采用RT-PCR和间接免疫荧光观察转染前后胃癌细胞GC-C基因的表达变化,黏附实验观察转染前后胃癌细胞黏附能力。结果:构建的GC-CsiRNA测序鉴定与设计完全相符。GC-CsiRNA转染胃癌SGC-7901细胞后,明显抑制GC-C基因的表达。转染后,GC-CmRNA和蛋白表达分别抑制了66.7%和75.8%,细胞黏附能力较对照组减弱(P<0.05)。结论:靶向GC-C的siRNA可明显下调靶基因GC-C的表达,在体外抑制胃癌SGC-7901细胞的黏附,提示GC-C基因与胃癌的发生、发展有密切的关系。
- 王鹏飞张洁毛振彪
- 关键词：胃癌细胞小干扰RNA
