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汤章彬
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
供职机构:
福建医科大学公共卫生学院环境与健康研究所
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
林炜
福建医科大学公共卫生学院环境与...
吴思英
福建医科大学公共卫生学院流行病...
王章敬
福建医科大学公共卫生学院环境与...
李煌元
福建医科大学公共卫生学院环境与...
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福建医科大学
作者
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李煌元
1篇
王章敬
1篇
吴思英
1篇
林炜
1篇
汤章彬
传媒
1篇
中国公共卫生
年份
1篇
2011
共
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靶向Nrf2基因microRNA表达载体构建及初筛
被引量:1
2011年
目的利用真核表达载体pcDNATM6.2-GW/EmGFP miR载体构建针对人Nrf2基因的微小RNA(microR-NA)真核表达载体,为研究Nrf2基因在化学物毒作用提供参考依据。方法设计特异性针对Nrf2基因的寡核苷酸序列,构建重组载体并命名为pcDNA-Nrf2-A、pcDNA-Nrf2-B、pcDNA-Nrf2-C、pcDNA-Nrf2-D,转染人乳腺癌MCF-7细胞;通过荧光显微镜观察绿色荧光监测转染效率,转染48 h后用荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫细胞化学检测瞬时转染细胞Nrf2基因mRNA和蛋白的表达变化观察沉默作用来初筛有效的重组载体。结果成功构建miRNA真核表达载体pcDNA-Nrf2;转染效率约为20%~40%;瞬时转染重组质粒48 h后,与空白对照和阴性对照质粒比较,pcDNA-Nrf2-A Nrf2 mRNA表达差异无统计学意义(P〉0.05);pcDNA-Nrf2-B、pcDNA-Nrf2-C、pcD-NA-Nrf2-D mRNA表达降低,差异有统计学意义(P〈0.001),pcDNA-Nrf2-C抑制Nrf2基因mRNA表达强于pcDNA-Nrf2-D(P〈0.05)。结论成功构建了Nrf2的microRNA表达载体pcDNA-Nrf2-C,可作为进一步研究Nrf2基因功能的工具。
李煌元
汤章彬
吴思英
林炜
王章敬
关键词:
NRF2
微小RNA
真核表达载体
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