武佳
- 作品数:9 被引量:7H指数:1
- 供职机构:温州医科大学更多>>
- 发文基金:浙江省自然科学基金浙江省大学生科技创新活动计划(新苗人才计划)项目温州市科技局资助项目更多>>
- 相关领域:医药卫生理学生物学农业科学更多>>
- 神经氨酸酶茎部区域对流感病毒生物学特性的影响
- 2014年
- 为研究A/Anhui/1/05(H5N1)及A/Ohio/07/2009(H1N1)两株病毒神经氨酸酶(NA)茎部(stalk)区域和半胱氨酸(Cysteine,C)对流感病毒生物学特性的影响。A/Anhui/1/05(H5N1)NA(命名为AH N1)的stalk区域相对A/Ohio/07/2009(H1N1)NA存在20个氨基酸的缺失(其中包括一个半胱氨酸),将A/Ohio/07/2009(H1N1)NA(命名为09N1)的stalk区域的20个氨基酸(命名为s20)缺失构建09N1-s20,相应部分插入至H5N1的NA中构建AH N1+s20。同时为了研究stalk区域半胱氨酸对NA功能的影响,构建了AH N1+C和09N1-C(stalk区域加/减一个半胱氨酸)。运用假病毒颗粒系统研究stalk区域和半胱氨酸对病毒学特性的影响。09N1-C与09H1配对(09H1::09N1-C),其感染力比野生型09H1::09N1增强了8倍;AH N1+C与AH H5配对(AH H5::AH N1+C),其感染力比野生型AH H5::AH N1大幅度降低。09N1-s20与09H1配对(09H1::09N1-s20),其感染力为野生型09H1::09N1的4倍;AH N1+s20与AH H5配对(AH H5::AH N1+s20),感染力为野生型AH H5::AH N1的1/7。09N1-C与AH H5搭配,其感染力是AH H5::09N1的6倍;AH N1+C与09H1搭配其感染力相当低。蛋白聚合研究显示2009H1N1野生病毒的NA蛋白聚合体特征为:二聚体>>四聚体>单体;09N1-C蛋白聚合体特征为:单体为主;09N1-s20蛋白聚合体特征为:单体>>二聚体。09N1中删除半胱氨酸或敲除s20片段没有改变其蛋白的正常表达。AH N1聚合体特征以单体为主;AH N1+s20蛋白聚合特点为:二聚体>>>单体>四聚体;而AH N1+C聚合体特征为二聚体多于四聚体。研究显示:2009H1N1NA茎部区域氨基酸缺失半胱氨酸后,感染力增强;安徽H5N1的NA茎部区域添加半胱氨酸后感染力大幅降低,半胱氨酸的缺失对流感假病毒感染力增强起了重要作用。
- 武佳王婷张柳叶致含吕建新
- 关键词:茎部
- 乳杆菌bsh基因的高效表达及高活性酶蛋白获得
- 2020年
- 目的探讨乳杆菌bsh基因的高效表达及胆盐水解酶(BSH)的高活性酶蛋白获得。方法从本实验室保存的12株乳杆菌菌株中,通过Ca2+沉淀法初筛获得具BSH活性的菌株,根据GenBank上公布的16S rRNA同源性最高的乳杆菌的BSH全基因序列,设计特异性引物,PCR扩增获得bsh基因并克隆至表达载体pET-28α,构建BL21-pET-28α-bsh原核表达体系。经IPTG诱导后,对表达产物进行SDS-PAGE分析及Western blot验证。结果研究表明在分子质量大小约35、37 kD处有预期条带出现,初步表明BSH蛋白表达成功。进而对表达各条件进行优化,最佳酶活条件为IPTG浓度0.1 mmol/L、诱导pH 6.5、诱导温度37℃、诱导时间1 h。经镍柱亲和层析纯化制备BSH制剂,邻苯三酚红钼法蛋白浓度测定为1446 mg/dL,茚三酮法测酶活性最高可达21248.27 U/(g·prot),为纯化前的635.4倍。结论乳杆菌bsh基因可溶性表达成功且高酶活BSH纯化获取为进一步的研究和药物转化奠定基础。
- 范逸雯宣雷杰龚昊辰陈星宇施涛黄泽宇武佳曾爱兵
- 关键词:胆盐水解酶克隆
- 一种多功能的骨科手术专用骨科锯
- 本发明公开了一种多功能的骨科手术专用骨科锯,包括用于握持操控的机架装置和用于旋转调节宽度的丝杠装置,所述丝杠装置安装在所述机架装置内,还包括用于伸长保持割锯宽度的活动装置,所述活动装置内安装有用于收放线性割锯的切割装置;...
- 罗鹏郭伟军武佳项光恒
- 一种大面积电偶腐蚀结构的钢丝棉强韧化锌基粉末冶金可降解生物医用材料的制备方法
- 本发明属于生物医用金属技术领域,特别涉及一种大面积电偶腐蚀结构的钢丝棉强韧化锌基粉末冶金可降解生物医用材料的制备方法,包括钢丝棉及锌基金属粉末;钢丝棉为纯铁或Fe‑Mn金属丝材中的一种;锌基金属粉末为纯锌、Zn‑Mg、Z...
- 罗鹏武佳童先林继兴
- 多功能离子液体分散液液微萃取结合高效液相色谱法检测人尿中5种邻苯二甲酸酯代谢物被引量:7
- 2020年
- 将多功能离子液体与分散液液微萃取(DLLME)技术相结合,建立了测定尿液中5种邻苯二甲酸酯类(PAEs)物质代谢产物的高灵敏度新方法。对影响DLLME效率的各单因素进行了优化,包括萃取剂的种类及体积、分散剂的种类及体积、萃取温度、超声时间、冷却时间、离心时间和盐效应等条件,经过严格的优化,最佳的萃取条件分别为:萃取剂[C8MIM][PF6]35μL,分散剂[BSO3HMIm][OTf]30μL和[C4MIM][BF6]120μL,萃取温度为35℃,超声时间5 min,冷却时间5 min,离心时间5 min,盐析剂NH4PF60.1 g。在最佳的萃取条件下,5种PAEs代谢物在0.5~1000μg/L范围内具有良好的线性关系,决定系数(R2)均大于0.9955,方法检出限为0.16~0.19μg/L,尿液中添加低中高水平(5、20、100μg/L)的PAEs代谢物,其回收率为92.9%~105.0%,日内精密度及日间精密度的相对标准偏差(RSD)均小于5.96%,方法学验证各指标及稳定性均符合分析要求。对所采集的10份糖尿病患者的尿液进行检测,并对该人群PAEs代谢物的暴露水平进行评价。结果表明,各PAEs代谢物均有检出,其中邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯(MEHP)的检出率为100%。总之,该方法萃取过程中未添加有毒的有机试剂,均使用多功能离子液体作为萃取剂、分散剂和盐析剂,萃取过程绿色环保,简单高效;方法的灵敏度较高,稳定性较好,适用于人体尿液中痕量PAEs代谢物的检测。
- 孙倩戴浩强陈佩佩佘慧武佳
- 关键词:分散液液微萃取高效液相色谱尿液
- 一种检验载玻片
- 本实用新型公开了一种检验载玻片,其技术方案要点包括保护罩,保护罩设有检验片,保护罩上侧设有遮挡板,保护罩、遮挡板和检验片均为玻璃制品,所述遮挡板的右端与保护罩转动连接,所述保护罩左端上侧固定有L形卡位板,遮挡板的下侧左端...
- 孙家驹应槟霞和灼琪张锦余崇杭苏子昕唐嘉仪武佳
- 一种铜离子诱导重组蛋白表达体系及其诱导方法和应用
- 本发明公开了一种铜离子诱导重组蛋白表达体系及其诱导方法和应用,属于基因和蛋白工程领域。本发明通过基因工程将大肠杆菌铜耐受基因copA的启动子序列PcopA和重组蛋白的编码基因进行融合,并利用pUC57‑Kan载体转化到c...
- 王伍武佳耿悟灵周晓峰周易
- 2009甲型H1N1及高致病性禽流感H5N1神经氨酸酶茎部区域与其功能的研究
- 目的:
甲型流感病毒能导致季节性流行和爆发流行。2009年甲型H1N1流感病毒从2009年四月在世界范围内的流行。同时,高致病性禽流感H5N1在欧亚大陆60多个国家及地区流行超过十多年;尽管目前没有确切的证据证明该...
- 武佳
- 关键词:神经氨酸酶甲型流感病毒高致病性禽流感
- 文献传递
- 一种骨科用骨科夹板安装紧固装置
- 本发明提供一种骨科用骨科夹板安装紧固装置,涉及医疗器械领域。该骨科用骨科夹板安装紧固装置,包括支撑机构,所述支撑机构包括底座,所述底座的上端一侧固定设置有第一固定板,所述底座的上端远离第一固定板的一侧内部开设有滑动卡槽,...
- 郭伟军罗鹏汪吉琪武佳赵友明