张倩倩
- 作品数:5 被引量:13H指数:2
- 供职机构:广州医科大学更多>>
- 发文基金:广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 热休克蛋白90α在HBV相关性肝细胞癌中表达的意义被引量:8
- 2014年
- 目的:探讨热休克蛋白90α(HSP90α)在不同转移潜能人肝癌细胞株及HBV相关性肝细胞癌(HCC)患者血清中表达的临床意义。方法:采用Western blotting、ELISA技术检测不同转移潜能肝癌细胞株及HBV相关性肝癌患者、良性肝病患者和健康对照者血清中HSP90α表达水平;回顾性分析HSP90α表达与临床病理资料间的关系。结果:HSP90α在高转移潜能MHCC97H细胞中的表达水平显著高于无转移潜能HepG2细胞(P=0.0002)。肝癌患者及良性肝病患者血清中HSP90α表达水平均明显高于健康对照者(P=0.0001),但肝癌与良性肝病患者间差异无统计学意义(P=0.990)。肝癌患者血清HSP90α表达水平女性高于男性(P<0.05),患者年龄、HBeAg是否阳性、AFP水平、HBV DNA水平及TNM分期均无统计学差异(P>0.05)。结论:HSP90α与HBV相关性HCC转移潜能相关,可望成为HCC侵袭转移、预后评估及区分HBV相关性肝病与健康者的标志物之一。
- 李慧李卫华张志翔张倩倩
- 关键词:热休克蛋白90ΑHBV相关性肝细胞癌
- HBx缺失突变体介导RhoGDIα表达下调对肝癌细胞迁移和侵袭的影响被引量:1
- 2017年
- 目的 探讨乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)缺失突变体(HBxΔ31)抑制Rho蛋白二磷酸鸟苷解离抑制因子α(RhoGDIα)表达的作用机制及其对肝细胞癌(HCC)转移的影响.方法 选取稳定表达野生型HBx及其缺失突变体HBxΔ31蛋白的HCC细胞株HepG2为研究对象,采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)及蛋白印迹法检测HBxΔ31对RhoGDIα表达的影响.构建RhoGDIα启动子区系列缺失报告基因载体,与真核表达载体HA-HBx及HA-HBxΔ31共转染HepG2细胞,荧光素酶活性检测确定HBxΔ31关键作用区域.免疫共沉淀(Co-IP)鉴定HBxΔ31与转录因子myc相关锌指蛋白(MAZ)间的相互作用,凝胶电泳迁移率实验(EMSA)分析HBxΔ31对MAZ与RhoGDIα启动子结合的影响.体外迁移和侵袭实验观察RhoGDIα对HBxΔ31介导HepG2细胞迁移和侵袭能力的影响.结果 HBxΔ31在转录水平抑制了RhoGDIα基因的表达,其作用核心区位于其启动子的-460--242bp区域,对该区域3个转录因子MAZ结合位点突变分析,证实MAZ参与HBxΔ31对RhoGDIα的表达调控.Co-IP提示HBxΔ31能与MAZ相互作用,EMSA分析显示MAZ通过与RhoGDIα启动子结合发挥作用,而HBxΔ31增强了这种效应.体外侵袭和迁移实验表明,对照组与RhoGDIα干扰组的HepG2细胞迁移数分别为(58±5)个和(98±7)个,侵袭细胞数分别为(55±6)个和(113±6)个,差异均有统计学意义(t=18.91和t=20.12,均P〈0.01);而转染HBxΔ31的HepG2细胞迁移数[(115±6)个]和侵袭细胞数[(102±5)个]均多于共转染RhoGDIα与HBxΔ31的HepG2细胞迁移数[(40±4)个]和侵袭细胞数[(42±4)个](t=18.14和t=16.31,均P〈0.001).结论 HBxΔ31通过与MAZ相互作用增强其与RhoGDIα启动子的结合,导致RhoGDIα表达下调,从而促进肝癌细胞的侵袭和迁移.
- 李卫华李辉顾霞张志翔张倩倩李慧
- 关键词:乙型
- 野生型及突变截短型HBx转染人肝癌细胞株的蛋白组学分析被引量:1
- 2015年
- 目的:研究乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)羧基端31个氨基酸自然缺失突变体(HBxΔ31)对肝癌细胞蛋白质表达的影响。方法:脂质体法介导全长HBx基因和HBxΔ31突变体表达载体转染人肝癌细胞系Hep G2,Western blotting分析证实HBx蛋白的表达,双向电泳分离细胞质蛋白质,图像分析Hep G2-HBx及Hep G2-HBxΔ31的差异蛋白表达,MALDI-TOF-MS及数据库搜索鉴定差异蛋白质。结果:在Hep G2-HBxΔ31及Hep G2-HBxΔ31细胞株中筛选鉴定出6个差异表达蛋白质,分别为HSPB1、Ran BP1、Rho-GDI alpha、Serpin B5、Cap Z beta、MRP-L12,在HBxΔ31-Hep G2细胞株中MRPL12、Ran BP1、HSPB1高表达,RhoGDI alpha、Serpin B5、Cap Z beta低表达。结论:HBx蛋白羧基端31个氨基酸突变缺失会改变肝癌细胞的蛋白质表达,这些蛋白与肿瘤的形成及转移密切相关,或可成为肝癌诊断及预后的标志物。
- 张志翔李卫华李慧张倩倩廖东江卢心铭
- 关键词:转染蛋白质组
- HBx缺失突变体对肝癌组织中加帽蛋白B表达的影响研究
- 原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)是世界上具有高发病率和高死亡率的恶性肿瘤之一,严重危害人类的健康。肝癌与乙肝病毒有密切相关性,而HBx作为HBV的功能基因,在肿瘤的转移中发挥着...
- 张倩倩
- 关键词:原发性肝细胞癌基因表达
- 羧基端截短乙肝病毒x蛋白和加帽蛋白B在肝癌组织中的表达及临床意义被引量:3
- 2017年
- 目的:探讨羧基端截短的乙肝病毒x蛋白(Ct-HBx)和加帽蛋白B(CAPZB)在肝癌组织中的表达及临床意义。方法:应用PCR及测序技术检测41例HBsAg(+)的肝癌及癌周组织中HBx基因整合状态;采用免疫组化技术分别检测表达全长HBx和Ct-HBx的肝癌及癌周组织中CAPZB表达水平,分析CtHBx与CAPZB表达的关系,以及与临床病理特征之间的相关性。结果:(1)全长HBx基因在肝癌组织及癌周组织中表达率分别为20.6%(7/34)和40%(12/30),两者比较,差异无统计学意义(P=0.090);而3’末端缺失HBx基因在肝癌组织及癌周组织中表达率分别为79.4%(27/34)和53.3%(16/30),两者比较,差异有统计学意义(P=0.027)。(2)羧基端截短≥14个氨基酸(即碱基缺失≥42 bp)的标本有13例。对比全长HBx阳性的肝癌组织,CAPZB在Ct-HBx阳性肝癌组织中的表达明显减低;CAPZB在Ct-HBx阳性的肝癌及癌周组织中阳性表达率分别为23.1%(3/13)和84.6%(11/13),两者比较,差异有统计学意义(P=0.005)。CAPZB在肝癌组织中的表达水平与肝癌转移呈负相关关系(P=0.017)。结论:CAPZB在肝癌组织中的表达下调与HBx蛋白羧基端缺失突变有关,且与肝内转移发生相关,提示CAPZB可能参与了Ct-HBx介导的肝癌进展机制。
- 张倩倩李卫华李慧张志翔卫建筠