刘碧莲
- 作品数：3 被引量：20H指数：2
- 供职机构：中国水产科学研究院珠江水产研究所农业部热带亚热带鱼类选育与养殖重点开放实验室更多>>
- 发文基金：国家科技基础条件平台建设计划国家科技支撑计划广东省重大科技兴渔项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 大口黑鲈hepcidin真核表达载体构建及表达的初步研究被引量：1
- 2009年
- 将大口黑鲈(Micropterus salmoides)抗菌肽hepcidin cDNA定向插入真核表达载体pPICZαA,通过SacI酶切线性化重组表达质粒pPICZαA-hepcidin,电转化毕赤酵母P.pastoris GS115,PCR扩增筛选,甲醇诱导表达等进行了hepcidin真核表达工程菌株的构建及诱导表达。结果显示:hepcidin cDNA成功插入表达载体pPICZαA,并整合到酵母基因组中;经甲醇诱导,RT-PCR检测显示hepcidin cDNA在酵母细胞中成功转录。
- 李胜杰白俊杰刘碧莲叶星于凌云全迎春
- 关键词：HEPCIDIN毕赤酵母真核表达
- 大口黑鲈抗菌肽hepcidin cDNA序列和结构分析被引量：12
- 2008年
- 以大口黑鲈为材料,提取肝脏总RNA,经RT-PCR扩增出hepcidin cDNA的开放阅读框（ORF）及3′端非编码区序列,应用5′RACE方法得到大口黑鲈hepcidin cDNA5′末端。将所获得的两个片段分别克隆到T载体后进行测序,并拼接成大口黑鲈hepcidin全长cDNA。序列分析表明：大口黑鲈hepcidin全长cDNA为564bp,含有一个258bp的ORF,编码86个氨基酸残基,由信号肽（24个残基）、前肽（42个残基）和成熟肽（20个残基）3部分组成hepcidin前体。在前肽部分具有前肽转化酶典型的RX（K/R）R基元,成熟肽部分含有8个保守的半胱氨酸残基,可形成四个链内二硫桥,使β-折叠结构保持稳定。大口黑鲈Hepcidin与其他鱼类的同源性在29.7%-90.5%间,尤其是信号肽区域,与鳜、尼罗罗非鱼、真鲷、花鲈、黑鯛、金眼狼鲈仅有2-3个氨基酸的差别。
- 白俊杰刘碧莲劳海华叶星简清
- 关键词：大口黑鲈抗菌肽HEPCIDINCDNA克隆
- 鳜hepcidin cDNA的分子克隆及序列分析被引量：7
- 2006年
- Hepcidin是近年来发现的一类具有独特性质的抗菌肽，根据C-enBank中收录的鱼类抗菌肽hepcidin的cDNA序列设计一对简并引物，用RT-PCR方法从鳜（Sinipercachuatsi）肝脏组织中克隆到hepcidin的cDNA，并构建pMD18-T-hep-cidin载体进行序列测定和分析。结果表明，该cDNA长为381bp，其中第20-277位是该基因的开放阅读框（ORF），编码86个氨基酸，形成由信号肽（24个残基）、前肽（42个残基）和成熟肽（20个残基）3部分序列组成的前体肽，与已报道的其他鲈形目鱼类hepcidin相比较，核苷酸序列的同源性为72．2％-92．0％，所推导的成熟肽与包括人类在内的其他生物hepcidin成熟肽的同源性在50％-86．4％，都含有8个保守的cys残基，可形成4个链内二硫键。鳜hepcidin cDNA片段的获得为以后的重组表达奠定了实验基础，也为抗菌肽hepcidin家族找到了新的成员。
- 刘碧莲白俊杰劳海华叶星简清
- 关键词：抗菌肽HEPCIDINCDNA克隆
