苑克勇 作品数:11 被引量:13 H指数:2 供职机构: 上海交通大学医学院附属第九人民医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 上海市科学技术委员会科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 建筑科学 化学工程 更多>>
人根尖乳头干细胞来源外泌体的提取及鉴定 2019年 目的·从人根尖乳头干细胞(human stem cells from the apical papilla,hSCAPs)中提取外泌体并进行鉴定。方法·使用改良组织块法培养hSCAPs并检测干细胞表面标志物CD105、CD45、CD44、CD31、CD34、CD29的表达情况。体外诱导hSCAPs向成骨细胞和脂肪细胞分化以检测其多向分化能力。使用梯度离心方法从hSCAPs培养上清中分离出外泌体。通过粒径分析确定外泌体粒径大小,透射电镜观察外泌体形态特征,Western blotting进行外泌体特异性抗原分子CD81、CD9、CD63和TSG101的鉴定。结果·在hSCAPs中检测到间充质干细胞表面抗原标志物CD105、CD44和CD29表达呈强阳性,而造血干细胞标志物CD45、CD31和CD34呈阴性。hSCAPs能够向成骨细胞和脂肪细胞分化。从hSCAPs的上清中分离出来的囊泡样物质,其外形为圆形囊泡并且具有完整的膜结构,粒径为30~100 nm,而且表达外泌体特性蛋白CD81、CD9、CD63和TSG101。结论·成功地从hSCAPs中分离出囊泡样物质,并鉴定其为外泌体。 晋巧巧 林文珍 苑克勇 牛晨光 黄正蔚关键词:外泌体 梯度离心 Er:YAG激光和Nd:YAG激光辅助的牙漂白对树脂充填体粘接强度和边缘微渗漏的影响 2023年 目的评价Er:YAG激光和Nd:YAG激光辅助的牙漂白对釉质表面树脂充填体粘接强度和边缘微渗漏的影响。方法将离体牙制备成釉质测试试件(n=64)后随机分为4组(n=16),包括对照组、传统漂白组、Er:YAG激光辅助的漂白组和Nd:YAG激光辅助的漂白组。4组试件分别处理后,检测其釉质表面树脂充填体的剪切粘接强度(n=8)和微渗漏深度(n=8),利用体视显微镜观察各组试件的断裂模式。采用SPSS 26.0软件包对数据进行统计学分析。结果与对照组相比,传统漂白后釉质表面树脂充填体的粘接强度显著下降,边缘微渗漏显著增加(P<0.05);Er:YAG激光辅助的漂白后釉质表面充填体的剪切粘接强度和微渗漏深度与对照组相比无显著差异(P>0.05),Nd:YAG激光辅助的漂白后树脂充填体的剪切粘接强度显著下降(P<0.05),但其边缘微渗漏深度与对照组相比无显著差异(P>0.05)。4组试件的粘接断裂模式主要为粘接界面断裂。结论相比传统漂白方法,激光辅助的牙漂白对树脂充填体粘接强度和微渗漏的影响较小,具有一定的临床优势。 侯秀秀 苑克勇 黄正蔚 马瑞关键词:ER:YAG ND:YAG 粘接强度 微渗漏 3,3'-二吲哚基甲烷对脂多糖诱导下牙周膜细胞分泌炎症因子的影响 被引量:4 2018年 目的·探讨3,3’-二吲哚基甲烷(3,3’-diindolylmethane,DIM)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPDLCs)分泌炎症因子的影响,并初步探讨其相关作用机制。方法·分离培养hPDLCs,CCK-8法测定DIM对hPDLCs增殖的影响,检测DIM毒性浓度范围。将hPDLCs分为4组:空白组加入不含LPS和DIM的无血清DMEM;LPS组仅加入含LPS(终浓度为10μg/mL)的无血清DMEM;低浓度组含10μg/mL LPS+6.25μmol/L DIM;高浓度组含10μg/mL LPS+12.50μmol/L DIM。培养12 h,酶联免疫吸附试验检测各组上清液中TNF-α、IL-1β和IL-6浓度,Western blotting检测hPDLCs内丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)和核因子κB(nuclear factorκB,NF-κB)信号通路中蛋白的变化。结果·DIM在50μmol/L范围内时细胞活力不受影响(P>0.05)。低浓度和高浓度DIM均抑制LPS刺激下hPDLCs分泌炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6(P<0.05),抑制效果随DIM的浓度升高而增强。DIM可显著抑制LPS激活NF-κB信号通路。结论·DIM可能通过抑制NF-κB信号通路的激活,抑制LPS诱导的hPDLCs分泌促炎因子TNF-α、IL-1β和IL-6。 周菊妹 苑克勇 林文珍 胡戌琛 晋巧巧 牛晨光关键词:人牙周膜细胞 炎症因子 核因子ΚB 微创开髓对牙齿应力的影响 目的:通过三维有限元方法,比较微创牙体牙髓治疗和传统直线通道治疗对所治牙齿应力大小和分布的影响.方法:重建6个下颌第一磨牙的有限元模型(模型Ⅰ~Ⅵ),模型Ⅰ~Ⅲ用微创方法开髓,并分别模拟35号04锥度、10锥度、12锥度... 苑克勇 牛晨光 高丽 马瑞关键词:微创 应力 人牙髓干细胞成骨分化前后相关基因的表达分析 被引量:1 2018年 目的:分析人牙髓干细胞(hDPSCs)成骨诱导后相关基因的表达变化。方法:使用改良组织块法体外培养hDPSCs并检测其多向分化能力。hDPSCs成骨诱导后对其进行基因表达谱芯片技术和实时荧光定量PCR分析相关基因的表达情况。结果:hDPSCs能够进行成骨细胞和脂肪细胞分化。基因表达谱芯片技术分析得出hDPSCs在成骨诱导前后有1284个基因上调或下调2倍以上。其中,骨调节蛋白(osteomodulin,OMD)基因转录上调约50倍。实时荧光定量PCR显示OMD基因在成骨诱导过程中转录呈逐渐增加趋势。结论:hDPSCs成骨分化涉及多个基因调控。OMD基因也参与其中,其表达变化具有时间规律性,与成骨过程呈正相关。 林文珍 高丽 牛晨光 牛晨光 苑克勇 马瑞 苑克勇关键词:人牙髓干细胞 成骨分化 苷松新酮对破骨分化的影响及其机制研究初探 目的:探讨小分子苷松新酮对破骨前体细胞向破骨分化的抑制作用及其相关机制,期望通过本研究为根尖周病及牙周炎等疾病的辅助治疗提供新的药物选择和治疗策略。方法:首先体外培养小鼠骨髓单核巨噬细胞(BMMs),并建立RANKL诱导... 牛晨光 肖飞 苑克勇 胡戌琛 林文珍 马瑞 张晓玲 黄正蔚2种刷毛的电动牙刷对菌斑清除功效及釉质磨损的影响 被引量:1 2020年 目的:研究硬软毛刷头电动牙刷对牙面菌斑清除功效及对牙面磨损的影响。方法:培养变异链球菌(S.mutans)与内氏放线菌(A.naeslundii)于牛牙釉质磨片形成双菌种生物膜后,样本分为4组(n=3),分别采用电动牙刷+尼龙丝刷头组,电动牙刷+纳米软胶刷头组,手动牙刷组接触式清除,结晶紫吸附实验计算各组菌斑生物膜去除量。磨损实验中实验组釉质磨片分别经两组电动牙刷接触式处理1h后,与对照组置于扫描电镜下观察表面形貌。采用单因素方差分析进行统计分析。结果:电动尼龙丝刷头组生物膜去除量(0.45±0.02)与纳米软胶刷头(0.44±0.03)均大于手动牙刷组(0.25±0.02)(t=6.31,P<0.01;t=5.13,P<0.01)。而两电动牙刷组菌斑生物膜去除量差距无统计学意义(t=0.35,P=0.75)。磨损实验显示:牙刷刷毛硬度越大,造成釉质表面的凹陷越大越深越多,表面形态越粗糙。结论:在体外模型中,不同硬度刷毛的电动牙刷在菌斑清除功效上没有明显差异;使用硬度较小的软毛电动牙刷刷牙对釉质的磨损较轻。 张彭飞 苑克勇 黄正蔚关键词:体外模型 刷牙 唾液菌群微生物与宿主血脂水平的关联分析 被引量:2 2021年 目的·分析唾液菌群微生物与宿主血脂水平的相关性。方法·采集114名45~60岁志愿者的唾液菌群样本,提取总DNA,随后应用多聚酶链式反应进行16S rDNA V3-V4区扩增。扩增所得产物经Illumina MiSeq PE300平台测序后,将所得序列进行操作分类单元(operational taxonomic units,OTUs)聚类、物种注释并将唾液菌群中丰度前50的属与宿主血脂水平作Spearman相关分析,P<0.05记为差异有统计学意义。结果·114名志愿者的唾液菌群样本测序所得平均序列数为(41084±4740)条,聚类所得OTUs数为1153,共注释到23个门、43个纲、89个目、147个科和317个属。门水平和属水平的物种聚类热图示114个唾液菌群样本具有相似的物种组成丰度模式。Spearman相关分析结果显示,在唾液菌群微生物丰度前50的属中,Neisseria spp.的丰度与宿主血清总胆固醇(total cholesterol,TCH)、三酰甘油(triacylglycerol,TAG)和低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-Ch)的水平成负相关;Gemella spp.的丰度与宿主血清TCH、LDL-Ch水平呈正相关;与宿主血清高密度脂蛋白胆固醇水平成负相关的属有Comamonas spp.、Filifactor spp.和Parvimonas spp.。结论·人群中唾液菌群微生物的组成结构具有相对稳定性且与宿主血脂水平相关,可进一步挖掘唾液菌群微生物作为个体脂代谢异常的预警指标。 赵芬 晋巧巧 苑克勇 侯秀秀 黄正蔚 马瑞关键词:血脂水平 冷光美白对釉质表面细菌生物膜形成的影响 被引量:5 2015年 目的:研究Beyond冷光美白对牙釉质表面主要致龋菌生物膜形成的影响。方法:制备4 mm×4 mm×1 mm的釉质片20片,随机分为冷光美白组、美白剂组、冷光照射组和对照组4组,每组5片。冷光美白组用Beyond美白凝胶(主要成分为H2O2)+冷光照射美白3次,每次12 min;美白剂组只在釉质片表面涂布美白凝胶美白3次,每次12 min;冷光照射组仅用冷光灯照射釉质片3次,每次12 min;对照组不做任何处理。在人工口腔模型内,将上述4组釉质片置于变形链球菌、黏性放线菌、具核梭杆菌混合菌液中培养36 h,用激光共聚焦显微镜(confocal laser scanning microscopy,CLSM)观察所形成的混合细菌生物膜,采用SAS8.2软件包对所得数据进行Kruskal-Wallis秩和检验。结果:CLSM扫描可见冷光美白组、美白剂组、冷光照射组的生物膜较对照组生物膜稀疏,生物膜厚度均显著小于对照组(P<0.05);冷光美白组、美白剂组、冷光照射组之间生物膜厚度差异无显著性(P>0.05);与对照组相比,冷光美白组、美白剂组、冷光照射组釉质表面生物膜中活菌百分比显著降低(P<0.001)。结论:冷光美白可抑制釉质表面混合细菌生物膜的形成,破坏生物膜的结构,降低混合细菌生物膜中活菌的数量。 苑克勇 马瑞 朱彩莲 李鸣宇 何智妍 周薇关键词:冷光美白 牙釉质 变形链球菌 具核梭杆菌 黏性放线菌 龈上菌斑微生物与宿主血脂水平的相关性分析 2022年 目的:分析龈上菌斑微生物与宿主血脂水平的相关性。方法:采集68名45~60岁志愿者的龈上菌斑样本,提取总DNA并对其16S rDNA V3-V4区进行PCR扩增。扩增所得产物经Illumina MiSeq PE300平台测序后,进行OTU聚类、物种注释,并将注释到的物种(属水平)与宿主血脂水平作Spearman相关分析。采用SPSS 16.0软件包对数据进行统计学分析。结果:68名志愿者的龈上菌斑样本测序所得平均序列数为41929条,聚类所得OTU数为1037,共注释到25个门,45个纲,92个目,155个科和330个属。物种聚类热图显示68个样本具有相似的物种组成丰度模式。Spearman相关分析显示:在龈上菌斑微生物中,拟普雷沃菌属、小类杆菌属、消化链球菌属和普雷沃菌属7与宿主血清总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平呈负相关;宿主血清高密度脂蛋白胆固醇水平与奈瑟菌属的丰度呈正相关,但与普雷沃菌属2的丰度呈负相关。结论:人群中龈上菌斑微生物的组成结构具有稳定性,与宿主血脂水平相关,可进一步探究龈上菌斑微生物作为宿主脂代谢状态的生物标志物。 赵芬 董婷 苑克勇 晋巧巧 黄正蔚 马瑞关键词:微生物 血脂水平