周明明
- 作品数：3 被引量：0H指数：0
- 供职机构：山东大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：现代农业产业技术体山东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金系建设专项资金国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 猪核糖核酸酶L基因真核表达载体的构建与表达
- 2016年
- 为了研究猪核糖核酸酶L(sRNase L)的抗病毒能力,利用pXJ41载体构建猪RNase L基因真核表达载体pXJ41-sRNase L,采用poly(I∶C)转染PK-15细胞刺激诱导sRNase L基因转录mRNA;根据Gen Bank上sRNase L基因编码区序列设计引物并加入真核表达增强序列Kozak序列,通过RT-PCR扩增sRNase L编码基因序列,并将其克隆至真核表达载体pXJ41,通过双酶切和测序鉴定重组质粒;将重组表达载体pXJ41-sRNase L转染Marc-145细胞,Western blot检测sRNase L在Marc-145细胞中表达。结果显示:成功扩增得到sRNase L基因全长;成功克隆至真核表达载体pXJ41并能够在Marc-145细胞中成功表达。结果表明:成功构建了真核表达载体pXJ41-sRNase L并在Marc-145细胞中实现了sRNase L的表达,为进一步研究sRNase L在猪体内先天性免疫中抗病毒能力及其机制提供了条件。
- 周明明王加才姜宁朋丛晓燕陈蕾吴家强李俊杜以军王金宝
- 关键词：抗病毒先天性免疫
- 猪伪狂犬病病毒新流行株的分离鉴定及抗原变异性分析
- 引言猪伪狂犬病病毒(PRV)属于疱疹病毒科中的疱疹病毒甲亚科,又名猪疱疹病毒Ⅰ型[1].除人类和无尾猿以外,PRV可感染多种家畜和野生动物,主要以发热、奇痒(猪除外)及脑脊髓炎为特征[24].近年来山东地区的规模化猪场出...
- 周明明杜以军胡悦吴香菊孙文博陈蕾丛晓燕陈智于江吴家强李俊王金宝
- 猪IL-10 SYBR Green I Real-time PCR检测方法的建立
- 2014年
- 白介素-10(IL-10)是一种具有免疫抑制作用的多能细胞因子。能够引发猪免疫抑制效应的多种病毒在感染宿主时均伴随有明显的IL-10上调,其中就包括猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),然而并不是所有的PRRSV毒株都能上调IL-10。为了详细探讨PRRSV免疫抑制与IL-10上调之间的关系以及PRRSV感染上调IL-10的具体分子机制,本研究针对猪IL-10以及看家基因β-actin的基因序列分别设计一对特异性引物,构建了各自含有IL-10、β-actin引物扩增序列的重组质粒为阳性标准品,建立了以2-△△Ct为基础的SYBR GreenⅠrealtime PCR检测方法。该方法线性关系良好;敏感性高,两种基因的检测下限均为1×101copies/μL;特异性强,扩增产物形成单一的特异性熔解峰;重复性良好,批内变异系数小于2%,批间变异系数小于3%;目的基因及内参基因的扩增效率较高,分别为92.7%、97.8%。综上所述,该方法可以用于猪IL-10mRNA水平的表达分析。
- 朱希旺杜以军李俊陈智于江张玉玉夏焱春周明明王金宝吴家强
- 关键词：白介素-10免疫抑制IL-10
