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双向转录/表达载体的构建及其在马流感病毒反向遗传系统中的应用: 2016年; 为构建用于拯救流感病毒的双向转录／表达载体，本研究以pEF4／myc—HisB为骨架首次构建了含有人源的EF1-α和polⅠ双启动子的载体pEZ，并通过报告基因证明其具有双向转录／表达的功能。此外，基于pEZ载体分别构建含有马流感病毒（EIV）A／equine／Jilin／1／1989（H3N8）（JL89）株各个节段cDNA的8个重组质粒，且其中HA节段通过点突变技术引入分子遗传标记（HindⅢ和NdeⅠ酶切位点）。将8个重组质粒共转染293T细胞，拯救出病毒（rJL89）。病毒滴度测定显示，拯救的第一代病毒具有较高的病毒滴度（2．38×10^5TCID50/mL）；序列分析表明，rJL89与JL89的各个节段的序列几乎一致性（99．9％～100％）；酶切鉴定表明，rJL89稳定携带分子遗传标记（HindⅢ和NdeⅠ酶切位点）；血凝效价测定表明，rJL89与JL89有相同的血凝效价（2^R）；生长动力学研究显示，rJL89具有与JL89相同的生物学特性。以上结果证明，基于pEZ载体建立了EIVJL89株的8质粒反向遗传系统，该系统可以拯救出较高滴度的病毒。本研究将为进一步开展EIV分子生物学研究提供有效平台。; 张翔郭巍王晓钧; 关键词：反向遗传学病毒拯救马流感病毒

一种双向转录/表达质粒及其在流感病毒反向遗传学中的应用: 本发明公开了一种双向转录/表达质粒及其在流感病毒反向遗传学中的应用。本发明的一种双向转录/表达质粒是以真核表达载体pEF4/myc‑His B为骨架进行改造得到的。为了建立马流感病毒(Equine influenza v...; 王晓钧张翔郭巍张振宇胡哲; 文献传递

一种高效的双向转录/表达质粒及其在流感病毒反向遗传学中的应用: 本发明公开了一种高效的双向转录/表达质粒及其在流感病毒反向遗传学中的应用。本发明的一种双向转录/表达质粒是以真核表达载体pEF4/myc‑His B为骨架进行改造得到的。为了建立马流感病毒(Equine influenz...; 王晓钧张翔郭巍张振宇胡哲; 文献传递

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张翔