刘锋
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：广州中医药大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省中医药管理局基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 负载ERRα基因片段慢病毒构建及表达
- 2012年
- 目的构建编码人雌激素相关受体α(hERRα)的慢病毒载体,并测定其滴度,观察hERRα基因在体外的表达情况及其对人肺癌细胞A549增殖的影响。方法采用PCR扩增hERRα基因片段,插入转移载体pW-PXLD,用磷酸钙法将pWPXLD-hERRα、psPAX2和pMD2.G共转染293T细胞包装慢病毒,浓缩后测定病毒滴度,再将病毒感染A549细胞,用蛋白印迹方法测定感染病毒的A549细胞中hERRα的表达。选择合适滴度的病毒感染A549细胞,采用cell-titer的方法检测感染病毒的A549细胞的活力。结果测序结果显示成功构建了重组质粒pWPXLD-hERRα,测定浓缩后的病毒滴度为1.8×108TU/mL,蛋白印迹方法检测到慢病毒感染的A549细胞中hERRα呈阳性表达;cell-titer glo检测结果表明过表达hERRα能促进细胞增殖。结论成功构建了负载hERR基因片段的慢病毒,hERRα能在感染的A549细胞中高效表达,并促进感染病毒的A549细胞增殖。
- 王海彬周驰刘锋曾展鹏
- 关键词：慢病毒载体细胞增殖
- 成骨细胞株MG-63细胞分化过程中线粒体生成的变化被引量：1
- 2010年
- 【目的】研究成骨细胞分化过程中线粒体生成的变化。【方法】采用Mitotracker Green染色、流式细胞仪检测成骨细胞MG-63分化过程中线粒体生成的变化;以细胞核基因组为内参,实时定量PCR检测细胞线粒体基因组数量和进一步检测细胞线粒体生成相关基因雌激素相关受体(ERRs)及其共激活因子过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子(PGC-1s)表达的变化。【结果】成骨细胞分化过程中线粒体生成显著减少,线粒体基因组数量显著下降,细胞线粒体生成相关基因ERRs及其共激活因子PGC-1s表达显著降低。【结论】成骨细胞MG-63分化过程中线粒体生成显著降低。
- 王海彬曾展鹏谭彤燕梁笃杨冰刘锋
- 关键词：成骨细胞分化雌激素相关受体
