陈翔
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
- 供职机构：扬州大学园艺与植物保护学院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 柑橘原生质体总RNA提取方法研究被引量：3
- 2016年
- 以悬浮培养的椪柑愈伤组织为材料,通过酶解分离原生质体;采用Trizol法、改良Trizol法、改良CTAB法和TaKaRa RNA提取试剂盒等4种方法提取原生质体的总RNA,通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度计和RT-PCR检测其质量和产量。结果表明:4种方法皆能提取出总RNA,其中Trizol法提取的总RNA有降解现象,其他方法所提取的总RNA完整性较好,且D260nm/D280nm和D260nm/D230nm值都在正常范围内;在产量方面,改良Trizol法提取的总RNA产量最高,106个原生质体达43.06μg,分别是改良CTAB法和TaKaRa RNA提取试剂盒的7.74和4.31倍;RT-PCR验证表明,以改良Trizol法提取的RNA为模板所扩增出的目的条带最清晰明亮,且与目的片段大小一致。因此,改良Trizol法是柑橘原生质体总RNA提取的最佳方法。
- 徐小勇许晓玲张一卉刘玉玲陈翔
- 关键词：柑橘原生质体总RNA
