邓鑫松
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 供职机构：三峡大学医学院分子生物学研究所更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 梅毒包膜脂蛋白基因的克隆、表达及临床抗体的检测被引量：1
- 2013年
- 目的:克隆tp15、tp17、tp47、tp0453基因,构建原核表达质粒,进行蛋白的表达、纯化并用于检测梅毒病人血清抗体。方法:PCR扩增4个基因,构建原核表达质粒pET28a(+)/tp15、pET28a(+)/tp17、pGEX-6P-1/tp47和pGEX-6P-1/tp0453,经双酶切及测序鉴定,将获得的阳性克隆转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE电泳及Western blot分析鉴定,利用亲和层析方法对4个蛋白进行纯化。将四个纯化的蛋白固定到NC膜上,利用immuno-slot blot方法对梅毒病人血清进行检测。结果:经鉴定表明成功构建四个原核表达质粒。SDS-PAGE电泳及Western blot分析结果显示四个重组蛋白大小正确。immuno-slot blot实验显示四个蛋白能与梅毒病人血清特异性结合。结论:成功克隆、表达和纯化了tp15、tp17、tp47、tp0453蛋白,四个蛋白可以与梅毒病人血清特异性结合,为进一步建立梅毒病人血清检测试剂盒奠定基础。
- 田慧群冯晶邓鑫松覃玉娥刘朝奇
- 关键词：梅毒螺旋体TP0453BLOT
