李霆
- 作品数：17 被引量：37H指数：4
- 供职机构：中国检验检疫科学研究院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家科技支撑计划北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 甲型H7N9流感病毒NS1蛋白真核表达载体的构建与表达被引量：1
- 2014年
- 本试验旨在构建甲型H7N9流感病毒非结构蛋白(NS1)真核表达载体,并在293T细胞中表达其编码的NS1蛋白。首先提取安徽分离株甲型H7N9流感病毒(A/Anhui/3/2013(H7N9))的总RNA,通过RT-PCR技术获得了甲型H7N9流感病毒H7N9 NS1全长基因,然后将其克隆至载体pcDNA4-Flag-HA中构建pcDNA4-Flag-HA-NS1真核重组表达载体,经酶切及测序鉴定正确后将质粒pcDNA4-Flag-HA-NS1转染到293T细胞中,通过Western blotting鉴定NS1蛋白的表达。结果表明成功克隆了NS1全长基因,构建了甲型H7N9流感病毒NS1蛋白真核表达载pcDNA4-Flag-HA-NS1,并在293T细胞中转染表达,Western blotting确定了NS1蛋白的成功表达。该表达载体的成功构建及在293T细胞中成功表达NS1蛋白,为后期开展流感病毒NS1蛋白功能及与真核细胞中的蛋白相互作用奠定了基础。
- 武立伟李霆杨世梅王慧煜梅琳韩雪清
- 关键词：NS1真核表达BLOTTING
- 基于E184L基因的非洲猪瘟病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：8
- 2020年
- 非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)感染引起的一种高度接触性传染病。由于ASFV的感染机制极为复杂,基因型多,至今尚无有效疫苗用于防控,防止该病暴发主要依赖于早期快速诊断和控制。为建立一种高效快速、特异的ASFV检测方法,根据ASFV的E184L基因序列,设计了TaqMan荧光定量PCR引物及探针,建立了检测ASFV的TaqMan荧光定量PCR方法。结果表明,该方法设计的引物具有高度特异性,以构建的重组质粒为标准品建立的TaqMan荧光定量PCR方法的标准曲线具有良好的线性关系,线性相关系数为0.992,对ASFV核酸最低检测限为1.51拷贝,且与伪狂犬病病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒2型等不存在交叉反应。建立的基于ASFV E184L基因实时荧光定量PCR检测方法能够快速、准确、特异地对ASFV核酸进行定量分析,丰富了ASFV的检测方法。
- 崔贝贝李霆仇松寅梅琳韩雪清吴绍强林祥梅
- 关键词：实时荧光定量PCR非洲猪瘟病毒
- 基于K196R基因的非洲猪瘟病毒检测试剂盒和检测方法
- 本发明公开一种基于K196R基因的非洲猪瘟病毒检测试剂盒和检测方法，涉及病毒检测技术领域。本发明提供一组新的用于检测非洲猪瘟病毒的QPCR组合物，包括以下引物和与引物配合使用的探针：K196R上游引物为SEQ ID No...
- 李霆崔贝贝王娜仇松寅冯春燕韩雪清吴绍强林祥梅
- 文献传递
- 一种利用焦磷酸测序技术检测斑点叉尾鮰病毒的引物、试剂盒和检测方法
- 本发明公开了一种利用焦磷酸测序技术检测斑点叉尾鮰病毒的引物、试剂盒和检测方法。具体地，本发明涉及一组利用焦磷酸测序技术检测斑点叉尾鮰病毒的引物，包括如序列表中SEQ ID No.2和SEQ ID No.3所示的扩增引物对...
- 王娜吴绍强李霆张旻景宏丽王彩霞张利峰江育林
- 文献传递
- 进口俄罗斯牛肉传入牛结节性皮肤病风险评估被引量：6
- 2020年
- 依照世界动物卫生组织《陆生动物卫生法典》中的动物及动物产品进境风险分析框架,采用定性评估方法,对俄罗斯输华牛肉开展牛结节性皮肤病传入风险评估。评估认为,在不采取检疫监管措施的情况下,牛结节性皮肤病随俄罗斯进口牛肉传入的风险为“中”,暴露风险为“低”,后果风险为“高”,综合风险为“中”。由此,建议采取产地牛源控制、疫源监测检测以及加强宰前宰后检验和牛肉进口检疫监管等措施,防范牛结节性皮肤病随俄罗斯牛肉进口传入我国。
- 仇松寅刘晓飞李霆王勤吴绍强
- 关键词：风险评估
- 一种可诱导稳定表达小反刍兽疫病毒P蛋白的细胞株及其用途
- 本公开提供了一种可诱导稳定表达小反刍兽疫病毒P蛋白的细胞株，该细胞株的保藏编号为CGMCC NO.14317。可选地，所述小反刍兽疫病毒P蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO.1。另一方面，本公开还提供了如上所述的细胞株...
- 李霆李茜王娜崔贝贝张永宁韩雪清吴绍强林祥梅
- 一种利用焦磷酸测序技术检测流行性造血器官坏死病毒的引物、试剂盒和检测方法
- 本发明公开了一种利用焦磷酸测序技术检测流行性造血器官坏死病毒的引物、试剂盒和检测方法。具体地，本发明涉及一组利用焦磷酸测序技术检测流行性造血器官坏死病毒的引物，包括如序列表中SEQ ID No.2和SEQ ID No.3...
- 王娜张旻李霆王彩霞景宏丽吴绍强张利峰江育林
- 文献传递
- 基于E184L基因的非洲猪瘟病毒检测试剂盒和检测方法
- 本发明公开一种基于E184L基因的非洲猪瘟病毒检测试剂盒和检测方法，涉及病毒检测技术领域。本发明提供一组新的用于检测非洲猪瘟病毒的QPCR组合物，包括以下引物和与引物配合使用的探针：E184L上游引物为SEQ ID No...
- 李霆崔贝贝仇松寅王娜冯春燕韩雪清吴绍强林祥梅
- 文献传递
- 流感病毒非结构蛋白1的新型互作蛋白NF90的功能研究
- NF90是一种新型的宿主抗病毒因子,具有调节流感病毒感染细胞的PKR激酶活性的能力,但确切的调控机制尚未阐明。本研究拟通过研究NF90与流感病毒非结构蛋白(NS1)的互作关系以及NF90对NS1的功能调节方面探讨NF90...
- 李霆李茜王慧煜梅琳吴绍强林祥梅韩雪清
- 关键词：流感病毒PKR
- 文献传递
- 可诱导表达小反刍兽疫病毒P蛋白细胞系的建立被引量：2
- 2018年
- 为研究小反刍兽疫病毒(PPRV)磷蛋白(P)的生化功能,本研究通过PCR将PPRV p全长基因扩增后克隆至真核表达载体pcDNA4/TO中,构建了重组质粒pcDNA4/TO-PPRVP。将该质粒转染至已稳定转入pcDNA6/TR质粒的T-REx293细胞中,并用博来霉素和稻瘟菌素筛选存活克隆。将强力霉素添加至存活细胞克隆中诱导P蛋白表达,Western blot及间接免疫荧光试验鉴定出可诱导表达P蛋白的细胞克隆,扩增阳性克隆获得能够稳定表达P蛋白的细胞系。Western blot显示该细胞系表达的P蛋白能够与山羊PPRV阳性血清反应,并能够有效抑制聚肌胞苷酸诱导的STAT1磷酸化,表明该细胞系表达的重组PPRV P蛋白具有与野生型P蛋白类似的生物活性。本研究利用Tet on系统建立了表达PPRV P蛋白的真核细胞系,为深入研究PPRV的致病机制奠定了基础。
- 李霆李茜王娜崔贝贝仇松寅张永宁吴晓东吴绍强韩雪清林祥梅
- 关键词：小反刍兽疫病毒TET细胞系
