李大培
- 作品数：3 被引量：7H指数：1
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
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- 非受体酪氨酸激酶c-Abl/Arg对细胞微管结构的影响
- 2010年
- 王广菲李大培李平曹诚张部昌刘萱
- 关键词：RNA干扰微管蛋白
- 胎球蛋白A的纯化及其对3T3-L1脂肪细胞胰岛素通路的抑制作用被引量：6
- 2010年
- 目的对胎球蛋白A(AHSG)蛋白进行纯化,并探讨其对脂肪细胞胰岛素通路的调节作用。方法通过硫酸铵沉淀、PEG沉淀、DEAE离子交换和Protamine亲和层析方法纯化血浆中的AHSG蛋白。培养3T3-L1前脂肪细胞并分化为成熟脂肪细胞,置于低糖DMEM培养基培养,然后加入终浓度为100μg/ml和600μg/ml的AHSG及终浓度为600μg/ml的人白蛋白(HAS)分别进行培养,最后用不同浓度(0、10、20nmol/L)的胰岛素刺激细胞。采用Western blotting检测AHSG和HSA对3T3-L1脂肪细胞胰岛素下游分子IRS-1和Akt的磷酸化水平的影响。结果从血浆中纯化的AHSG蛋白纯度达90%以上。纯化的AHSG在100μg/ml浓度下可以减弱胰岛素对IRS-1蛋白磷酸化的影响,在600μg/ml浓度下可以完全抑制IRS-1蛋白磷酸化;纯化的AHSG在100μg/ml浓度下可以减弱胰岛素对Akt蛋白磷酸化的影响,在600μg/ml的浓度下可以明显抑制Akt蛋白的磷酸化,而600μg/ml的HAS则不能抑制IRS-1和Akt蛋白的磷酸化。结论从血清中纯化出的AHSG在生理浓度下可以抑制胰岛素对3T3-L1细胞中IRS-1和Akt蛋白的磷酸化作用,在脂肪细胞胰岛素通路中扮演着重要角色。
- 陈婷靳彦文瞿秀华崔艳李大培何章荣朱晓辉曹诚
- 关键词：胎球蛋白A胰岛素蛋白激酶类
- c-Abl／Arg靶向RNA干扰对细胞周期的影响被引量：1
- 2009年
- 目的:探讨非受体酪氨酸激酶c-Abl/Arg对细胞周期的影响。方法:用si-STRIKE-c-Abl/Arg siRNA表达载体转染乳腺癌细胞MCF-7,筛选具有潮霉素(hygromycin)抗性的c-Abl/Arg双敲低的稳定细胞系(c-Abl/Arg-DKD),用流式细胞仪检测其细胞周期。结果:筛选获得的c-Abl/Arg-DKD稳定细胞系中c-Abl/Arg的表达被有效抑制,且在S/G2期产生显著的细胞周期阻滞效应。结论:c-Abl非受体酪氨酸激酶在S/G2周期转换过程中发挥调节作用。
- 李大培李平曹诚张部昌刘萱
- 关键词：RNA干扰稳定细胞系细胞周期
