龙璐璐
- 作品数：8 被引量：17H指数：3
- 供职机构：江苏大学附属人民医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- YB-1腺病毒载体的构建及其对乳腺癌MCF-7细胞耐药性的影响被引量：2
- 2011年
- 目的:构建携带人YB1基因的重组腺病毒载体,并观察其对乳腺癌细胞株MCF-7药物敏感性的影响,并分析其可能的机制。方法:设计含有BglⅡ和HindⅢ酶切位点的引物,PCR克隆人YB1基因,插入穿梭载体pAdTrack-CMV,与腺病毒骨架载体pAdEasy-1在大肠埃希菌BJ5183内同源重组,获得重组子pAdEasy-1-hYB1,转染293A细胞,包装获得含hYB1的重组腺病毒(AdYB1),体外转染MCF-7细胞。采用MTT法分析在As2O3作用下YB1对MCF-7细胞半数抑制浓度(IC50)的影响;采用Annexin V/PI双染法,经流式细胞仪分析在As2O3作用下YB1对MCF-7细胞凋亡的影响。结果:成功构建了含有hYB1基因的腺病毒载体AdYB1,该重组腺病毒能显著提高MCF-7细胞的YB1mRNA及蛋白的表达水平,转染YB1组能够增加MCF-7细胞对AS2O3的IC50值;通过Annexin V/PI检测证实YB1能够抑制早期细胞凋亡。结论:成功构建含有hYB1基因的腺病毒载体AdYB1,能高效感染MCF-7,并通过抑制早期细胞凋亡提高MCF-7细胞对As2O3的耐药性。
- 冷加燕许文林沈慧玲龙璐璐吴晓君陈巧云姚俊
- 关键词：MCF-7细胞腺病毒载体耐药
- 雷公藤甲素通过调节microRNA21的表达干预K562/A02细胞的化疗敏感性被引量：4
- 2012年
- 目的:研究雷公藤甲素对K562/A02细胞多药耐药性的逆转作用,并探讨其机制。方法:四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法检测雷公藤甲素细胞毒性;采用非毒性浓度雷公藤甲素作用于K562/A02细胞,AnnexinV/PI双标法检测细胞凋亡;荧光定量PCR检测microRNA21表达水平;蛋白印迹法检测Bcl-2蛋白表达水平。microRNA21反义寡核苷酸转染K562/A02细胞,观察细胞增长率,凋亡率和Bcl-2表达的变化。结果:非毒性浓度(5 nmol/L)雷公藤甲素明显增强K562/A02细胞对多柔比星的敏感性,并能增强多柔比星诱导细胞凋亡的作用,使K562/A02细胞平均凋亡率由4.3%明显上升到18.5%(P<0.05);雷公藤甲素作用后,microRNA21和Bcl-2蛋白水平降低;microRNA21反义寡核苷酸转染K562/A02细胞后,降低了Bcl-2表达,提高多柔比星敏感性和多柔比星诱导的细胞凋亡。结论:雷公藤甲素增强K562/A02细胞对多柔比星的敏感性,并诱导其凋亡,可能与下调microRNA21水平有关。
- 惠璐璐许文林沈慧玲陈巧云朱小兰龙璐璐徐颖
- 关键词：雷公藤甲素多柔比星
- YB-1对乳腺癌MCF-7细胞CD44表达和细胞侵袭及成球能力的影响被引量：2
- 2011年
- 目的:观察Y-盒结合蛋白1(Y-box binding protein-1,YB-1)对乳腺癌MCF-7细胞CD44表达及细胞迁移、成球能力的影响。方法:应用基因重组技术将YB-1基因及其siRNA构建于腺病毒载体pADeasy-1,重组腺病毒及腺病毒空载体转染乳腺癌细胞株MCF-7;通过蛋白质印迹法,RT-PCR和免疫荧光的方法检测YB-1和CD44的表达;MTT法检测转染后细胞生长速度,并绘制生长曲线;并通过Transwell小室法检测细胞侵袭和迁移能力;细胞使用无血清培养基培养,并加入表皮生长因子(EGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)后,观察YB-1对细胞成球能力的影响。结果:蛋白质印迹法和RT-PCR结果显示,转染YB-1重组腺病毒载体的MCF-7细胞中,YB-1和CD44的表达明显高于转染腺病毒空载体组和未转染组;相反,转染YB-1 siRNA重组腺病毒载体的MCF-7细胞中,YB-1和CD44表达明显低于对照腺病毒空载体组和未转染组;免疫荧光也证实CD44蛋白水平与YB-1表达正相关。细胞生长曲线表明,转染YB-1重组腺病毒载体组的细胞生长速度最快,而且其侵袭、迁移和成球能力最强。结论:YB-1可能通过调控CD44的表达影响人乳腺癌细胞MCF-7的侵袭及成球能力。
- 吴晓君许文林冷加燕龙璐璐朱小兰李皓姚俊徐红美陈巧云惠璐璐
- 关键词：YB-1CD44乳腺癌MCF-7细胞株
- 白蛋白结合型紫杉醇联合卡铂治疗晚期卵巢癌的疗效及血清HE4、CA125、淋巴细胞亚群检测的临床意义
- 2024年
- 目的探讨白蛋白结合型紫杉醇联合卡铂治疗晚期卵巢癌的临床疗效及安全性,分析人附睾蛋白4(HE4)、糖类抗原(CA)125、淋巴细胞亚群检测的临床意义。方法回顾性分析2018年12月至2022年12月该院收治的晚期卵巢癌患者临床资料,对照组(29例)采用紫杉醇脂质体联合卡铂治疗,观察组(29例)采用白蛋白结合型紫杉醇联合卡铂治疗,两组均治疗6个疗程。比较两组客观缓解率(ORR)、疾病控制率(DCR)、不良反应及治疗前后血清HE4、CA125、T淋巴细胞亚群的变化。结果观察组ORR为79.31%,高于对照组的51.72%(χ^(2)=4.884,P=0.027)。观察组DCR为93.10%,高于对照组的79.31%(χ^(2)=4.062,P=0.044)。对照组各项不良反应发生率均高于观察组(P<0.05)。重复测量方差分析结果显示,两组HE4及CA125水平存在组间效应、时间效应和交互效应(P<0.001)。单因素重复测量方差分析结果显示,与治疗前比较,两组患者治疗2、4、6个周期后HE4、CA125水平均下降(P<0.008),多变量方差分析结果显示,观察组治疗2、4、6个周期后HE4、CA125水平均低于对照组(P<0.001)。两组治疗前CD3+、CD4^(+)、CD8^(+)T淋巴细胞比例及CD4^(+)T淋巴细胞/CD8^(+)T淋巴细胞比值比较,差异无统计学意义(P>0.05),治疗后两组CD3+、CD4^(+)淋巴细胞比例及CD4^(+)淋巴细胞/CD8^(+)淋巴细胞比值升高(P<0.05),观察组高于对照组(P<0.05),治疗后两组CD8^(+)T淋巴细胞比例下降,观察组低于对照组(P<0.05)。结论白蛋白结合型紫杉醇联合卡铂治疗晚期卵巢癌患者临床疗效更佳,安全性更好,且可明显降低血清HE4、CA125水平,促进淋巴细胞发挥免疫调节作用,改善机体免疫状态。
- 徐利本徐惠龙璐璐林方方王承伟
- 关键词：白蛋白结合型紫杉醇卵巢癌
- 雷公藤甲素对K562/A02细胞阿霉素敏感性的影响被引量：4
- 2012年
- 本研究旨在探讨雷公藤甲素(TPL)对K562/A02细胞阿霉素敏感性的影响。采用MTT法检测TPL细胞毒性和阿霉素药物敏感性;流式细胞术检测P-糖蛋白表达和细胞内阿霉素浓度;双荧光素酶报告基因系统检测MDR1启动子活性。结果表明:TPL增强K562/A02细胞阿霉素敏感性。TPL作用后,K562/A02细胞P-糖蛋白表达相关平均荧光强度(MFI)由123±13下降到39±13(P<0.05);K562/A02细胞内阿霉素相关MFI由18±5上升到34±6(P<0.05),TPL能够有效抑制K562/A02细胞的药物外排。TPL降低MDR1启动子转录活性约75%。结论:TPL通过下调P-糖蛋白表达增强K562/A02细胞对阿霉素的敏感性,其有可能成为一种耐药逆转剂。
- 惠璐璐许文林陈巧云朱小兰龙璐璐徐颖秦蓉
- 关键词：雷公藤甲素K562/A02细胞株阿霉素多药耐药
- 雷公藤甲素通过抑制microRNA-21的表达提高SGC7901/CDDP细胞顺铂敏感性被引量：2
- 2012年
- 目的:观察雷公藤甲素对胃癌SGC7901/CDDP细胞顺铂敏感性的影响,并探讨其机制。方法:采用非毒性浓度雷公藤甲素作用于SGC7901/CDDP细胞,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测细胞增长率;荧光定量PCR检测microRNA-21表达;蛋白质印迹法检测Bcl-2蛋白表达;AnnexinV/PI双标法检测细胞凋亡。将microRNA-21反义寡核苷酸转染SGC7901/CDDP细胞,观察其对细胞增长率、凋亡和Bcl-2表达的影响。采用小干扰RNA转染实验证明Bcl-2与胃癌耐药的关系。结果:非毒性浓度雷公藤甲素可提高SGC7901/CDDP细胞对顺铂敏感性,并且降低mi-croRNA-21的表达。microRNA-21反义寡核苷酸转染SGC7901/CDDP细胞后,降低Bcl-2表达,提高顺铂敏感性和顺铂诱导的细胞凋亡。小干扰RNA实验证明Bcl-2水平与SGC7901/CDDP细胞顺铂耐药有关。结论:雷公藤甲素通过降低microRNA-21的表达,抑制Bcl-2蛋白表达,促进顺铂诱导的细胞凋亡,从而提高胃癌SGC7901/CDDP细胞顺铂敏感性。
- 龙璐璐许文林沈慧玲方悦
- 关键词：雷公藤甲素MICRORNA-21BCL-2顺铂胃癌细胞
- YB-1抑制三氧化二砷诱导的胃癌细胞自噬机制被引量：3
- 2012年
- 目的研究YB-1抑制三氧化二砷(As2O3)诱导人胃癌BGC-823细胞自噬的机制。方法采用脂质体转染siRNA干扰YB-1和腺病毒转染pAd1Easy/YB-1过表达YB-1;实时荧光定量PCR检测Bcl-2和Beclin1基因转录;Western blot检测YB-1、Bcl-2、Beclin1、P62和LC3Ⅱ蛋白的表达;MDC染色、荧光显微镜观察自噬泡。结果与空病毒(AdGFP)组相比,pAd1Easy/YB-1(AdYB-1)组Bcl-2基因表达增高,而干扰质粒(siYB-1)组Bcl-2基因表达水平较空质粒(HK)组降低(P均<0.05),各组Beclin1基因表达比较无统计学差异。与AdGFP和HK组相比,AdYB-1组Beclin1和LC3Ⅱ蛋白减少,Bcl-2和P62蛋白增加(P均<0.01),siYB-1组Beclin1和LC3Ⅱ蛋白增加,Bcl-2和P62蛋白减少(P均<0.01)。与AdGFP组相比,AdYB-1组自噬泡聚集减少,加入Bcl-2抑制剂HA14-1后自噬泡重新聚集,Beclin1蛋白恢复表达,P62降解增加,LC3Ⅱ升高。结论 YB-1可能通过上调Bcl-2、抑制Bec-lin1,实现对As2O3诱导的BGC-823细胞自噬的抑制。
- 龙璐璐许文林沈慧玲冷加燕
- 关键词：三氧化二砷自噬YB-1BCL-2BECLINL
