王艳艳
- 作品数：5 被引量：0H指数：0
- 供职机构：广东省人民医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 分子伴侣辅因子CHIP与帕金森病PINK1基因的相互作用
- 目的泛素-蛋白酶体通路(ubiquitinproteasomepathway,UPP)是胞质和胞核内ATP依赖性的蛋白质非溶酶体降解机制,其功能障碍与许多神经退行性疾病有关,特别是家族性和散发性帕金森病。分子伴侣辅因子C...
- 刘越存张玉虎王丽娟王丽敏王艳艳
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- 分子伴侣辅因子CHIP真核表达载体pDsRed2-N1/CHIP的构建及其在COS-7细胞中的表达
- 目的分子伴侣辅因子CHIP即热休克蛋白70羧基末端相互作用蛋白(carboxyl terminus of the Hsc70- interacting protein,CHIP)是一个具有双重功能的分子:既是一个Hsp7...
- 刘越存张玉虎王丽娟王丽敏王艳艳
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- 质子磁共振波谱分析在帕金森病和帕金森伴发抑郁诊断中的应用
- 目的探讨MRS在帕金森病诊断中的应用;且同时探讨帕金森病伴抑郁症状者脑内代谢物质的变化,神经生化的变化,从而进一部阐述其发病机制,评价MRS在PD伴抑郁症状诊断中的应用价值。方法以62例临床确诊的原发性帕金森病患者和30...
- 王艳艳王丽娟王丽敏
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- MIF和MMP-3在PD外周血中的表达
- 目的检测MIF和MMP-3在PD外周血中的表达,探讨MIF和MMP-3是否参与PD的发病过程,进一补阐述炎症机制在PD中的作用;是否以MIF、MMP-3为方向的抗炎治疗将可能为PD的治疗的新思路。方法以62例临床确诊的原...
- 王艳艳王丽娟王丽敏
- 文献传递
- 分子伴侣辅因子热休克蛋白70羧基末端相互作用蛋白真核表达载体pDsRed2-N1(+)/CHIP构建及在COS-7细胞中的表达
- 2009年
- 背景:热休克蛋白70羧基末端相互作用蛋白与许多神经退行性疾病的相关蛋白质存在相互作用,并促进这些蛋白质的降解,因此对热休克蛋白70羧基末端相互作用蛋白功能的研究具有非常重要的意义。目的:构建分子伴侣辅因子热休克蛋白70羧基末端相互作用蛋白真核表达载体pDsRed2-N1(+)/CHIP,检测其转染COS-7细胞后的表达。设计、时间及地点:单一样本观察,于2007-05/2008-02在广东省人民医院医学研究中心完成。材料:大肠杆菌Ecoli DH5α,质粒pDsRed2-N1(+)为广东省人民医院医学研究中心肖定璋主任馈赠;人cDNA文库为中南大学湘雅医院神经内科馈赠。方法:用聚合酶链反应方法从人cDNA文库DNA中扩增热休克蛋白70羧基末端相互作用蛋白全长cDNA,该基因片段两端设计了HindⅢ和BamHⅠ限制性酶切位点。将所得片段连接到T载体上测序证实。利用重组DNA技术将热休克蛋白70羧基末端相互作用蛋白的cDNA构建到真核表达载体pDsRed2-N1(+)上,酶切鉴定。通过脂质体介导的转染技术将所构建的载体导入COS-7细胞中,体外培养,于转染48h后利用反转录-聚合酶链反应和Western Blotting方法检测目的基因的表达情况。主要观察指标:①热休克蛋白70羧基末端相互作用蛋白cDNA扩增产物检测。②pDsRed2-N1(+)/CHIP重组体酶切鉴定。③反转录-聚合酶链反应。④免疫荧光及Western-blotting。结果:经琼脂糖凝胶电泳及测序证实,聚合酶链反应获得的片段与GenBank中登记的热休克蛋白70羧基末端相互作用蛋白序列完全相同;pDsRed2-N1/CHIP酶切片段的长度与理论大小相符;转染48h后的COS-7细胞在mRNA和蛋白质水平均可检测到热休克蛋白70羧基末端相互作用蛋白的表达。结论:热休克蛋白70羧基末端相互作用蛋白真核表达载体构建成功,在COS-7细胞中可获得表达。
- 刘越存张玉虎王丽娟王丽敏王艳艳
- 关键词：热休克蛋白重组DNA
