宫宁
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- 发文基金：北京市自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 重组人抗凝血酶发酵条件的优化被引量：2
- 2011年
- 目的:通过实验室发酵条件优化工作,实现在巴斯德毕赤酵母中高效表达重组人抗凝血酶。方法:在摇瓶培养条件下,应用正交实验方法考查人抗凝血酶重组毕赤酵母菌pPIC9K-AT-02的培养温度、培养基pH值、接种比例、甲醇补加间隔时间及甲醇补加浓度等5种因素对重组人抗凝血酶活性的影响,确定最优发酵条件。结果与结论:筛选出的最终发酵条件为培养温度30℃、培养基pH6.0、接种比例20%、甲醇补加间隔时间24 h、甲醇补加浓度2%,重组人抗凝血酶在巴斯德毕赤酵母中表达活性为4098 U/L,比原始活性提高了150%。
- 冯秋月李伟静贺敏石晓月乔志新杨晓琮程宏张公庆王婧宫宁王璇琳于群
- 关键词：抗凝血酶毕赤酵母发酵条件
- 慢病毒介导的稳定表达人GM-CSF、IL-4的EA.hy926细胞株的建立
- 2011年
- 目的:获得能够稳定表达人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素4(IL-4)的内皮细胞株。方法:构建重组慢病毒表达载体,在293FT细胞中进行病毒的包装,用获得的高滴度慢病毒感染EA.hy926细胞株,建立能够稳定、高效表达hGM-CSF、hIL-4的EA.hy926细胞株。结果:EA.hy926感染效率达90%以上,长期传代后阳性率仍维持在90%以上;实时定量PCR和ELISA方法证实感染后细胞hGM-CSF、hIL-4在mRNA水平的表达分别是未感染细胞的25倍和9946倍,在蛋白水平的表达分别是未感染细胞的145倍和23倍。结论:构建的细胞系可以稳定表达细胞因子GM-CSF、IL-4。
- 石晓月贺敏任鹏宋丽雅乔志新杨晓琮程宏冯秋月张公庆王璇琳宫宁王字玲李伟静于群
- 关键词：树突状细胞转染白细胞介素4粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子
