郭美华
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：大连医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- GL1-EGFP融合蛋白的原核表达及对神经胶质瘤细胞的靶向作用分析
- 2012年
- [目的]构建、纯化神经胶质瘤靶向肽GL1和EGFP融合蛋白表达载体(GL1-EGFP),并且分析其靶向作用。[方法]通过PCR扩增目的基因GL1-EGFP,并连接到pET-22b(+)载体上构建原核表达质粒,重组体转到感受态大肠杆菌BL21(DE3)中进行蛋白诱导表达,重组蛋白利用Ni2+-树脂柱亲和层析纯化,利用SDS-PAGE和Western blotting鉴定表达纯化蛋白,激光共聚焦显微镜检测GL1-EGFP对神经胶质瘤细胞的靶向作用。[结果]构建了GL1-EGFP原核表达载体,在IPTG诱导下获得了高效表达。Western blotting分析证明纯化蛋白为目的蛋白GL1-EGFP。体外细胞实验表明GL1-EGFP融合蛋白对神经胶质瘤细胞U87△EGFR具有靶向作用。[结论]GL1-EGFP靶向融合蛋白对恶性神经胶质瘤细胞有明显的靶向定位作用。
- 于家文郭美华赵春晖冯斌
- 关键词：融合蛋白神经胶质瘤靶向作用
- GHK-Cu脂质体的制备与表征及对小鼠生发的影响被引量：1
- 2013年
- 目的制备甘氨酰组氨酰赖氨酸-铜(GHK-Cu)脂质体,观察其对脱发模型小鼠毛发生长的影响。方法利用反向蒸发法制备包含GHK-Cu脂质体。将脱发模型小鼠随机分组,各组分别以0.6 mol.L-1GHK-Cu溶液、0.6 mol.L-1GHK-Cu脂质体溶液和纯化水(对照组)涂擦脱毛区,记录小鼠新生毛发生长时间,观察脱毛区病理及组织形态学变化,Western blotting法分析各组小鼠血管内皮生长因子(VEGF)表达差异。结果 GHK-Cu脂质体和GHK-Cu均能促进小鼠毛发生长;与对照组比较,GHK-Cu脂质体和GHK-Cu组小鼠毛囊数目差异有统计学意义。在小鼠毛发完全长出之前,GHK-Cu脂质体和GHK-Cu组小鼠VEGF表达量高于对照组。结论脂质体既能够有效包裹GHK-Cu,又能保持GHK-Cu对小鼠的促生发功效。GHK-Cu脂质体和GHK-Cu均能增加生发初期小鼠皮肤组织VEGF表达。
- 彭坤坚代奎星王雅平张翠丽于家文郭美华赵春晖冯斌
- 关键词：脂质体脱发生发
- 不同地域东亚钳蝎蝎毒的双向电泳鉴定被引量：2
- 2012年
- 目的利用蛋白质组学中双向电泳技术,定性鉴定、分析不同地域东亚钳蝎蝎毒活性的差别,探索不同产地蝎毒的蛋白质组成及功能差异。方法将不同产地的冷冻干燥蝎毒粉经溶解、除盐、浓缩后测定蝎毒蛋白质含量,进行定量的蝎毒鉴定。采用pH梯度等电聚焦和SDS-PAGE凝胶电泳技术分离蝎毒蛋白质。银染后通过凝胶成像系统获得双向电泳凝胶图谱,用PD Quest图像分析软件比较分析,确定差异的特征蛋白点,从而定性鉴定不同产地蝎毒。结果获得3个样品的蛋白质指纹图谱。分别检测出80,69和77个点,特征差异蛋白点依次为56,46和55个。结论不同产地的东亚钳蝎蝎毒通过双向电泳分离蛋白后,表现出明显不同的蛋白点分布。
- 倪伊婷郭美华王君德刘赟辛毅吴大畅
- 关键词：蝎毒东亚钳蝎双向电泳
