褚帅
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
- 供职机构：南方医科大学南方医院更多>>
- 发文基金：广东省教育部产学研结合项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 一种基于流式细胞术的诱导痰嗜酸性粒细胞定量方法
- 本发明公开了一种基于流式细胞术的诱导痰嗜酸性粒细胞定量方法。主要包括痰液化步骤、痰细胞悬浮液染色步骤和设门分析步骤。其中痰液化步骤包括对痰液样品进行称重，加入DTE震荡孵育，进行过滤、离心、洗涤获得细胞悬液；痰细胞悬浮液...
- 郑磊褚帅王玮李创坤
- 人自身抗原52-kDRo/SSA,rRNP,Jo-1,SmD1,Scl-70,SSB-La的原核表达及纯化鉴定被引量：1
- 2016年
- 目的制备重组人自身抗原52-kDRo/SSA,rRNP,Jo-1,SmD1,Scl-70以及SSB-La,为建立自制抗核抗体荧光免疫层析快速检测试剂盒奠定基础。方法在NCBI上查询人52-kDRo/SSA,rRNP,Jo-1,SmD1,Scl-70,SSB-La的碱基序列和氨基酸序列,运用软件预测抗原表位,选择抗原表位并对密码子进行偏嗜性改造,采用人工合成方法合成抗原表位序列并插入至原核表达载体pET30a中。将重组质粒导入大肠杆菌BL21经IPTG诱导表达,表达的重组蛋白用镍离子亲和层析柱纯化,用荧光免疫法测定重组蛋白活性。结果重组人自身抗原SSB-La是可溶性表达,52-kDRo/SSA,rRNP,Jo-1,SmD1以及Scl-70是包涵体形式表达;纯化产物经荧光免疫法测定活性,结果显示:SSB-La,Scl-70以及Jo-1具有较高的抗原活性,52-kDRo/SSA,rRNP以及SmD1抗原活性较弱。结论成功制备了重组人自身抗原52-KDRoSSA,rRNP,Jo-1,SmD1,Scl-70以及SSB-La,为下一步研究开发自制抗核抗体荧光免疫层析快速检测试剂盒奠定了基础。
- 李欣吴淡娟李海侠褚帅康霞裘宇容
- 关键词：荧光免疫法
- GSK-3β对小鼠骨髓树突状细胞成熟和功能的调控作用被引量：1
- 2015年
- 目的探讨GSK-3β对小鼠骨髓树突状细胞(BMDC)成熟和功能的调控作用。方法脂多糖催熟BMDC,Western blotting检测刺激前后糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)的磷酸化水平的改变;利用GSK-3β的选择性抑制剂SB216763处理BMDC,检测表型、细胞因子表达和混合淋巴反应(MLR)的变化情况;构建过表达小鼠GSK-3β的慢病毒载体并转染DC2.4细胞,Western blotting检测过表达GSK-3β对调控树突状细胞(DC)成熟的关键调控因子鸟的网状内皮组织增生病毒癌基因相关B(Rel B)蛋白水平的影响。结果经脂多糖处理后,GSK-3βY216磷酸化水平下调,Ser9磷酸化水平显著上调,表明GSK-3β的活性显著下降。抑制GSK-3β的活性能上调DC表面共刺激分子CD40和CD86的表达,削弱脂多糖诱导的促炎细胞因子IL-6和IL-12表达上调,而对抗炎细胞因子IL-10的表达有促进作用,同时降低脂多糖诱导成熟的DC刺激同种异基因T细胞增殖的能力。在未成熟的DC2.4细胞中,过表达GSK-3β能够下调Rel B的水平。结论 GSK-3β参与调控DC的成熟和功能,高活性的GSK-3β抑制未成熟树突状细胞(i DC)的自发性成熟,GSK-3β失活后促进DC表型的成熟,而在脂多糖诱导DC分化的过程中GSK-3β发挥促炎作用。GSK-3β能够下调Rel B的蛋白水平,有望成为构建新型耐受性DC的新靶点。
- 褚帅李海侠李欣康霞黄清水王红霞裘宇容
- 关键词：糖原合成酶激酶-3Β
- 一种基于流式细胞术的诱导痰嗜酸性粒细胞定量方法
- 本发明公开了一种基于流式细胞术的诱导痰嗜酸性粒细胞定量方法。主要包括痰液化步骤、痰细胞悬浮液染色步骤和设门分析步骤。其中痰液化步骤包括对痰液样品进行称重，加入DTE震荡孵育，进行过滤、离心、洗涤获得细胞悬液；痰细胞悬浮液...
- 郑磊褚帅王玮李创坤
