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禽流感病毒H7亚型RT-exoRPA检测方法的建立被引量：3: 2018年; 为了建立一种简便、快速的禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)H7亚型的检测方法,根据GenBank中禽流感病毒H7亚型的HA保守序列,并按照RPA引物探针的要求,设计多对引物及探针,通过条件的优化,建立禽流感病毒H7亚型RT-exoRPA检测方法,并与实时荧光定量PCR方法进行比较。特异性试验结果显示,该方法特异性强,只有禽流感病毒H7亚型出现特异性曲线;灵敏性试验结果显示,该方法能检测到禽流感病毒H7亚型最低浓度为0.24×10-3μg/mL,与实时荧光定量PCR方法相比,灵敏性稍差,但该方法的检测快速,仅需要20min。表明所建立的禽流感病毒H7亚型RT-exoRPA检测方法简单、快速,适合用于禽流感病毒H7亚型的现场检测。; 王潇王潇曹琛福黄超华林彦星花群义

一种蓝舌病病毒核心样颗粒的制备方法: 本申请公开了一种同时表达蓝舌病病毒vp3和vp7蛋白的大肠杆菌以及蓝舌病病毒核心样颗粒的制备方法。本申请将蓝舌病病毒vp3基因和vp7基因插入到双表达载体pETDuet‑1，构建原核双表达质粒pETDuet‑VP3‑VP...; 黄超华曹琛福花群义史卫军杨俊兴林彦星阮周曦曾少灵王潇; 文献传递

猪圆环病毒2型RPA恒温扩增检测方法的建立及初步应用被引量：2: 2018年; 利用重组酶聚合酶扩增技术(RPA),以猪圆环病毒2型Cap基因的保守序列为靶序列设计并筛选出一组特异性的引物和探针,建立了快速检测猪圆环病毒2型核酸的RPA方法。试验结果表明,该方法特异性强,猪圆环病毒1型(PCV1)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)核酸检测结果均为阴性,灵敏性高,最低可检出核酸浓度为0. 87×10-4ng/μL,简单快速,且重复性好。利用所建立的RPA方法对183份临床样品进行检测,结果与实时荧光PCR方法符合率为98. 9%。本研究为猪圆环病毒2型核酸的快速检测提供了一种新方法,尤其适合基层实验室或养猪场的快速检测。; 黄超华张全红曹琛福王潇林彦星史卫军花群义; 关键词：猪圆环病毒2型

A型动物流感病毒RT-RPA检测方法的建立及初步应用被引量：9: 2018年; 根据A型流感病毒M基因核苷酸序列设计引物及探针,建立了一种灵敏度高、特异性强、检测迅速、操作简便的重组酶聚合酶扩增技术（RT-RPA）。选用常见动物疫病病原验证引物探针的特异性,设计多对引物及探针,筛选出最适反应体系及反应条件,并与实时荧光RT-PCR方法比较。结果显示,本研究建立的RT-RPA方法特异性强,只有A型动物流感病毒呈阳性,其他相关常见病原均为阴性;反应时间短,检测反应时间仅需20 min;灵敏度高,最低可检测到A型动物流感病毒核酸浓度为0.96×10-2g/mL。与实时荧光RT-PCR方法相比,其灵敏度稍低。本研究建立的检测A型动物流感病毒的RT-RPA方法特异性强,灵敏性高,操作简单,检测快速,适合现场检测以及在基层实验室推广应用。; 王潇曹琛福曹琛福林彦星黄超华贾伟新

蓝舌病16型病毒核心样颗粒的获取与鉴定被引量：2: 2019年; 为了制备一种新型基因工程疫苗BTV-16 VLP疫苗,将蓝舌病病毒16型VP3与VP7基因片段插入杆状病毒双表达载体pFastBac Dual质粒中,通过转染Sf9细胞,同时表达VP3与VP7蛋白。经负染后电镜观察到有与蓝舌病病毒形态相似的核心样颗粒,表明蓝舌病VP3与VP7蛋白能自主组装形成核心样颗粒,并通过Western Blot试验验证该核心样颗粒与蓝舌病病毒具有相同的抗原性。因此本研究成功构建出16型蓝舌病病毒核心样颗粒,为病毒样颗粒装配打下了基础,为制备16血清型BTV VLP疫苗做好前期准备。; 王潇黄超华黄超华史卫军曹琛福史卫军; 关键词：蓝舌病重组杆状病毒

一种用于水泡性口炎病毒检测的试剂、检测方法及应用: 本申请公开了一种用于水泡性口炎病毒检测的试剂、检测方法及应用。本申请的水泡性口炎病毒检测的试剂，包括用于水泡性口炎病毒重组酶聚合酶扩增检测的第一套引物探针组合和第二套引物探针组合；第一套引物探针组合的正向引物、反向引物和...; 林彦星曹琛福花群义曾少灵王潇张彩虹孙洁廖立珊吕建强杨俊兴; 文献传递

禽流感病毒H5亚型RT-exoRPA检测方法的建立被引量：4: 2018年; 为建立一种特异、灵敏、简便、快速的禽流感病毒H5亚型的检测方法,根据近几年流行的禽流感病毒H5亚型毒株HA基因序列,采用DNAStar生物分析软件进行基因序列比对后,选择相对保守区域,设计多对引物及探针,建立了禽流感病毒H5亚型RT-exoRPA检测方法,对该方法的反应条件进行优化并检测特异性和灵敏性。结果显示,建立的检测禽流感病毒H5亚型RT-exoRPA方法特异性强,只有禽流感病毒H5亚型呈阳性,其他均为阴性;灵敏性较高,最低可检测到质量浓度为0.89×10^-3 mg/L的禽流感病毒H5亚型核酸,比实时荧光RT-PCR方法灵敏性低10倍;检测快速,检测反应所需时间仅20min,比实时荧光RT-PCR方法缩短近1h。结果表明,所建立的禽流感病毒H5亚型RT-exoRPA检测方法适应于禽流感病毒H5亚型的现场检测,以及基层实验室的推广应用。; 王潇王潇曹琛福黄超华林彦星花群义; 关键词：禽流感H5亚型

用于A型动物流感病毒检测的试剂、检测方法及应用: 本申请公开了一种用于A型动物流感病毒检测的试剂、检测方法及应用。本申请的试剂，包括用于A型动物流感病毒重组酶聚合酶扩增检测的引物对和探针，引物对正向引物为Seq ID No.1所示序列，引物对反向引物为Seq ID No...; 曹琛福花群义贾伟新林彦星王潇曾少灵叶奕优刘建利吕建强杨俊兴; 文献传递

一种同时检测猪圆环病毒2型和猪伪狂犬病毒的试剂盒及应用: 本发明公开了一种可同时快速检测猪圆环病毒2型和猪伪狂犬病毒的实时荧光RPA引物和探针、包括所述引物和探针的试剂盒及其用途。本发明公开了一种可同时快速检测猪圆环病毒2型和猪伪狂犬病毒的方法所述方法使用所述实时荧光RPA引物...; 黄超华花群义曹琛福杨俊兴阮周曦林彦星曾少灵王潇; 文献传递

一种用于猪圆环病毒2型检测的试剂、检测方法及应用: 本申请公开了一种用于猪圆环病毒2型检测的试剂、检测方法及应用。本申请的用于猪圆环病毒2型检测的试剂，包括用于猪圆环病毒2型重组酶聚合酶扩增检测的引物对和探针，引物对正向引物为Seq ID No.1所示序列，反向引物为Se...; 曾少灵曹琛福叶奕优刘建利王潇林彦星张彩虹吕建强杨俊兴花群义; 文献传递

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王潇