马珂
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Apelin促进人诱导性多能干细胞心肌定向分化的研究被引量：2
- 2014年
- 目的探讨Apelin对人诱导性多能干细胞(hiPSC)的心肌定向分化作用。方法 hiPSC经悬浮法诱导形成拟胚体,分为Apelin处理组(Apelin组)和对照组。Apelin组在高糖DMEM培养液中加入10μmol/ml Apelin,分别于第3、7、11、15、21天采用RT-PCR、Western blot法检测及免疫荧光染色,观察干细胞全能性标记物Oct4、心肌祖细胞标记物Nkx 2.5、心肌特异性肌钙蛋白I(cTnI)的表达变化。结果 Apelin组iPSC在诱导分化后第3天Oct4和Nanog基因表达水平明显降低,分别为同期对照组的(63.2±10.1)%和(51.7±1.6)%(P<0.01);诱导分化后第7天Nkx 2.5和cTnI基因表达水平明显升高,分别为同期对照组的(162.4±22.5)%和(250.6±22.3)%(P<0.05,P<0.01);诱导分化后第15天时,cTnI表达为同期对照组的(156.2±6.4)%(P<0.05);免疫荧光染色显示,cTnI阳性细胞明显多于对照组。结论 Apelin可明显促进hiPSC的心肌定向分化。
- 马珂刘通黄炜卜庆婷李秀娟赵传旭李霜王亚斌曹丰
- 关键词：多能干细胞肌钙蛋白
- Apelin促进脂肪间充质干细胞增殖、分化修复小鼠下肢缺血损伤的实验研究
- 2012年
- 目的:探讨apelin对于脂肪间充质干细胞(AD-MSCs)修复小鼠后肢缺血损伤的作用及机制。方法:从β-actin-luc转基因小鼠中分离出表达荧光素酶的AD-MSCs,将20只近交系无报告基因的小鼠随机分为两组,即实验组:后肢注射AD-MSCs+apelin(n=10)和对照组:后肢注射AD-MSCs(n=10)。所有小鼠均结扎股动脉建立后肢缺血模型,股四头肌内注射AD-MSCs(1×106)或AD-MSCs+apelin,激光多普勒成像观察下肢血液灌注,生物发光成像检测细胞的活性。用体外培养的β-actin-luc转基因小鼠AD-MSCs,建立缺氧(6 h)模型。实验分为4组,即对照组、缺氧组、缺氧+apelin干预组及缺氧+apelin+LY294002组。用免疫印迹法检测细胞内激酶磷酸化Akt的表达。结果:在移植后1周内生物发光成像显示,AD-MSCs移植后存在急性死亡,加用apelin组中细胞的存活时间明显延长。离体实验显示,在缺氧环境中apelin干预AD-MSCs后,细胞pAkt的表达明显高于对照组(P<0.05),加入Akt阻断剂LY294002后,细胞磷酸化的水平降低(P<0.05)。结论:apelin对AD-MSCs的后肢缺血治疗具有保护作用,可能在缺血性疾病的治疗中成为重要的干预靶点。
- 梁栋段红莉秦星程康马珂刘通曹丰
- 关键词：APELIN分子影像间充质干细胞缺血
- 心肌营养素-1诱导小鼠诱导性多能干细胞心肌细胞定向分化的实验研究被引量：1
- 2013年
- 目的:观察心肌营养素-1(CT-1)对小鼠诱导性多能干细胞(miPSCs)心肌细胞定向分化的诱导作用。方法:实验分为对照组与CT-1处理组。miPSCs经悬滴法诱导形成拟胚体,第3天培养基中加入1μmol/ml CT-1(CT-1组),对照组采用普通培养基。于第4、7、10和14天,收取细胞样本,采用实时PCR检测心脏特异标志物基因的表达。用免疫荧光染色及流式细胞术检测干细胞标志物Oct4和心肌特异性分化标志物肌钙蛋白I(cTnI)的表达。用透射电镜观察心肌样细胞的超微结构。结果:CT-1组第10天,样本中心肌特异性肌钙蛋白T(cTnT)基因表达的水平为同期对照组的1.75倍,有显著性差异(P<0.05)。免疫荧光染色法检测显示,两组均有cTnI表达。流式细胞术鉴定的结果显示,对照组与CT-1组cTnI的阳性率分别为28.5%和56.4%,有显著性差异(P<0.05)。电镜观察显示,CT-1组肌原纤维及胞内线粒体明显增多,肌纤维排列规则,可见细胞间桥粒连接和缝隙连接。结论:CT-1可显著提高miPSC向心肌细胞定向分化的效率。
- 刘通卜庆婷马珂金岩孙冬冬李秀娟曹丰
- 关键词：心肌营养素-1
