陈倩
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
- 供职机构：福州大学生物科学与工程学院更多>>
- 发文基金：福建省科技重大专项国家海洋公益性行业科研专项福建省海洋与渔业局重点项目更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程更多>>
- 枯草芽孢杆菌β-糖苷酶的克隆表达、体外定向进化及结构模拟被引量：1
- 2015年
- 【目的】从枯草芽孢杆菌基因组DNA中扩增出bgl C基因并在大肠杆菌中表达,分析表达产物的酶学性质并进行结构模拟,为进一步研究其生理功能及结构解析奠定基础。【方法】将bgl C基因克隆到大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中表达,通过定向进化获取水解效率提高的突变株,经Ni-NTA镍离子层析柱纯化后,测定野生枯草芽孢杆菌β-糖苷酶与突变酶的性质。利用CD光谱,非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及三维结构建模,分析野生酶与突变酶的高级结构。【结果】野生酶的比活力为9.7 U/mg,最适催化温度为60℃,最适p H值是7.0。经过突变和筛选,我们得到一个突变体BS-GLY_M1(A242T/T385A/S425L),其比活力达到17.1 U/mg,最适温度为55℃,最适p H值是7.0,在55℃下的半衰期为3.5 h,比野生酶增加2 h。突变酶对4-硝基苯基-β-半乳糖苷、乳糖和熊果苷的催化效率(Km/Kcat)有所提高。酶在天然条件下以二聚体、四聚体状态存在,推测它以二聚体为基本功能单位。结构模拟结果表明突变后酶的三维结构有轻微地变化,这可能是酶热稳定性和催化效率提高的原因。【结论】枯草芽孢杆菌β-糖苷酶可以在大肠杆菌中高效表达并可以通过定向进化提高其水解效率。
- 刘震陈倩陈荫楠王祖鑫朱秋享石贤爱
- 关键词：易错PCR底物特异性CD光谱寡聚体
- 基于单链抗体的呋喃唑酮酶联免疫检测方法的建立被引量：5
- 2017年
- 目的:为快速检测呋喃唑酮(furazolidone,FZD)在动物性食品中的残留量。方法:基于单链抗体的间接竞争酶联免疫吸附实验法建立了FZD检测方法。结果:最佳抗原工作质量浓度为2μg/m L,最佳抗体稀释倍数为1∶500,一抗最佳反应时间为60 min,二抗最佳反应时间为45 min,四甲基联苯胺最佳显色时间为20 min。FZD检测试剂盒在10~100 ng/m L范围具有较好的线性关系,IC50值为13.01 ng/m L,检出限为1.28 ng/m L,回收率为73.38%~84.52%。结论:与抗FZD单克隆抗体相比,所建立的检测试剂盒检测范围更广,且具有很高的灵敏度以及很好的特异性和稳定性。
- 陈倩陈荫楠陈东海林海虹石贤爱
- 关键词：呋喃唑酮单链抗体酶联免疫检测
- 尼古丁降解微生物的研究进展及潜在价值被引量：3
- 2017年
- 综述了尼古丁降解菌的研究进展,认为目前最为深入的尼古丁降解菌株主要有假单胞菌属、节杆菌属、苍白杆菌属这几类.研究方向集中在尼古丁的代谢机理及其应用,已发现的微生物降解尼古丁的代谢途径主要有三个:吡啶途径、吡咯途径、脱甲基途径.而且代谢过程中产生的中间产物具有很高的再利用价值,可作为工业合成的前体物质.
- 王晓萍石贤爱王毓虹魏增陈倩陈东海
- 关键词：尼古丁微生物降解代谢途径
