王浙峰
- 作品数:2 被引量:13H指数:2
- 供职机构:福州大学生物科学与工程学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金:福建省科技计划重点项目国家自然科学基金科技型中小企业技术创新基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 源于驴血清白蛋白的肽HP-6对造血系统的体内外作用研究被引量:7
- 2011年
- 目的:探讨通过生物信息学手段获得的源于阿胶中的重要蛋白组分驴血清白蛋白的生物活性肽HP-6对造血系统的作用效果。方法:分离培养人骨髓有核细胞(human bone marrow nucleated cells,hBMNCs)及小鼠骨髓基质细胞(murinebone marrow stromal cells,mBMSCs),通过与不同浓度肽HP-6(0.000 15,0.001 5,0.015,0.15,1.5μmol.L-1)共培养一定时间考察肽HP-6对骨髓造血相关细胞的促增殖能力,并通过电镜观察作用后的细胞形态;建立失血性贫血与环磷酰胺致贫血2种贫血动物模型,随机分组并灌胃不同剂量(1,0.1,0.01 mg.kg-1)肽HP-6,同时设立相应的对照组灌胃等体积PBS,7 d后检测贫血动物外周血象,对环磷酰胺致贫血小鼠加测骨髓细胞(bone marrow cells,BMCs)数。结果:肽HP-6可刺激人骨髓有核细胞和小鼠骨髓基质细胞增殖且具有浓度相关性,0.15μmol.L-1肽HP-6使2种细胞均达到最大增殖率,分别为152.11%,63.52%,之后呈降低趋势;电镜结果显示与肽HP-6作用后的细胞微观形态结构正常;灌胃1 mg.kg-1肽HP-6对提高外周血血小板数量及保护环磷酰胺损伤的小鼠骨髓具有一定的功效;灌胃0.1 mg.kg-1肽HP-6对提高外周血白细胞及红细胞数量有较好的效果,还可对化疗药物作用后小鼠的外周血起到一定的保护作用;灌胃0.01 mg.kg-1肽HP-6对提高外周血血小板数量具有极佳的效果,相对增殖率可达77.65%。结论:肽HP-6可刺激造血系统相关细胞增殖,对小鼠造血功能与抵抗化疗药物损伤有一定的增强作用。
- 李昊严晟旻王浙峰沈晓妙饶平凡
- 关键词:阿胶生物活性肽贫血
- 三聚氰胺多克隆抗体的制备、分离纯化及ELISA方法的测试研究被引量:6
- 2011年
- 目的:制备具有高特异性的三聚氰胺多克隆抗体,建立三聚氰胺快速检测方法。方法:通过抗原偶联嫁接技术,将不具备免疫原性的三聚氰胺与特定蛋白连接,制备免疫抗原(MB1st、MB2st、KM和ML2)。对家兔进行皮下多点注射,初次免疫后取抗体血清,用SDS-PAGE检测血清中IgG的产生情况。采用酶联免疫吸附法测定各抗体血清的效价,最终以亲和层析法纯化血清,获得高特异性的抗体。将纯化后的抗体包被于酶标板上,建立三聚氰胺ELISA方法,并验证其有效性。结果:通过SDS-PAGE证明免疫前、后血清中IgG显著增长。进一步使用间接ELISA法测得各兔血清效价。MB1st免疫的效果最佳,其抗体血清对三聚氰胺的竞争率由纯化前的36.97%上升至纯化后的75.57%。MB2st免疫的抗体血清对三聚氰胺的竞争率由纯化前的30.80%上升至纯化后92.43%。KM免疫的抗体血清效价较低,其对三聚氰胺的竞争率由纯化前的11.95%上升至纯化后的96.09%。ML2免疫效价低,且其抗体血清在纯化前、后均对三聚氰胺没有显著的竞争性。由此建立ELISA方法,并初步验证了该方法的有效性。结论:本试验中制备的三聚氰胺抗体血清,经分离、纯化后得到对三聚氰胺具有较高竞争性的多克隆抗体,为建立酶联免疫方法,以检测食品中三聚氰胺含量提供了理论基础。
- 李昊翁惠玲黄启龙沈晓妙高小尧严晟旻张志善王浙峰饶平凡
- 关键词:三聚氰胺多克隆抗体酶联免疫吸附特异性