段强德
- 作品数：28 被引量：87H指数：4
- 供职机构：扬州大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏高校优势学科建设工程资助项目江苏省属高校自然科学基础研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 大肠杆菌鞭毛蛋白不同结构域与F4菌毛主要结构亚单位FaeG嵌合基因的构建及其表达蛋白的功能研究被引量：2
- 2020年
- 为探究大肠杆菌鞭毛蛋白不同结构域与其免疫佐剂活性的相关性,本研究通过重叠延伸PCR技术(SOE-PCR)分别构建了出血性大肠杆菌EDL933(O157H7)鞭毛蛋白FliCH7基因的全长(aa1~aa585)、N端保守区(aa1~aa174)、N端加中间的高变区(aa1~aa496)与产肠毒素大肠杆菌F4ac+国内标准株C83902(O8K88H19)主要亚单位FaeG串联表达的嵌合基因,即FliC-FaeG、FliCN-FaeG和FliCNV-FaeG,分别将其克隆至pET-28a(+)表达载体中经IPTG诱导表达;经SDS-PAGE和western blot分别对表达的融合蛋白进行鉴定。PCR结果显示3个嵌合基因分别约为2600 bp、1300 bp和2300 bp;SDS-PAGE结果显示融合蛋白的大小分别约为:90 ku、48 ku和80 ku,均与预期大小一致。Western blot结果表明3种融合蛋白均能被抗FaeG的单克隆抗体识别;表明融合蛋白中FaeG仍维持其独立的结构和生物学活性。抗FliCH7的抗体可识别FliC-FaeG和FliCNV-FaeG融合蛋白,而FliCN-FaeG融合蛋白不含鞭毛蛋白高变区,所以不能被识别;TLR5受体活性检测结果表明,仅FliC-FaeG融合蛋白能激活TLR5受体,引起IL-8、TNF-α炎性因子的分泌,以上结果表明TLR5受体活性的激活需要完整的鞭毛蛋白结构,本研究以FaeG为模型抗原,构建了大肠杆菌鞭毛蛋白不同结构域与其相结合的融合蛋白,为进一步研究大肠杆菌鞭毛蛋白不同结构域免疫佐剂活性的差异性和深入研究鞭毛蛋白发挥其免疫佐剂活性的机理提供了参考依据。
- 吴文文庞胜美丁雪燕刘思国王晓钧段强德朱国强
- 关键词：鞭毛蛋白结构域免疫佐剂嵌合基因
- 一种高效的昆虫捕捉器
- 本实用新型公开了一种高效的昆虫捕捉器，包括把手，所述把手下部设有蓄电池，所述蓄电池外部设有充电口，所述蓄电池一侧设有控制箱，所述控制箱内部设有控制面板，所述控制面板上设有按钮，所述蓄电池下部设有灯座，所述灯座上安装有黑光...
- 曹少杰宋金东段强德王百祥刘波张嘉宁许敏
- 文献传递
- 鲜食葡萄采后微生物病害及防治被引量：2
- 2017年
- 中国是世界上鲜食葡萄生产量最大的国家,鲜食葡萄作为国民日常主要水果之一,有着无法替代的地位。2014年,世界鲜食葡萄年总产量为2 055万t,而中国的鲜食葡萄年产量就已达到900万t,占世界总产量的43%;同时,中国也是鲜食葡萄的消费大国,葡萄生产基本供应国内市场,还有20万t左右的进口[1]。鲜食葡萄是我国葡萄产业的主体,但由于葡萄果肉柔软多汁,含糖量和含水分量高,在采摘、贮藏、运输中极易受到机械损伤和病原菌的侵染,每年因此而造成鲜食葡萄的损耗约占销售总量的20%以上[2],浪费相当巨大。文章对葡萄采后的几种主要微生物病害和常用的防治方法进行概述。
- 薛萍付宏岐王录军侯清娥段强德
- 关键词：鲜食葡萄微生物病害
- 1株猪源阴沟肠杆菌的分离鉴定及药物敏感性研究
- 2023年
- 为研究猪源阴沟肠杆菌的生物学特征及药物敏感性,从临床病死猪病料中分离到1株优势细菌,经革兰染色、镜检、MALDI-TOF鉴定、16S rRNA序列分析,确定分离菌株为阴沟肠杆菌。对分离菌株进行小鼠感染试验,结果显示,分离的猪源阴沟肠杆菌对小鼠的半数致死量(LD_(50))为1.4×10~8 CFU。药物敏感性试验结果表明,分离的猪源阴沟肠杆菌对阿米卡星、大观霉素、诺氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星、庆大霉素、多黏菌素B敏感;对头孢他啶、头孢曲松、氨苄西林、青霉素、氟苯尼考、四环素、磺胺、复方新诺明、美罗培南、替加环素、利奈唑胺耐药。综上,分离获得1株猪源阴沟肠杆菌,且耐药性较强。
- 冯丽丽高春艳李庆东李海利张菡于彤彤姬向波段强德彭志锋
- 关键词：阴沟肠杆菌药物敏感性耐药性
- 猪流行性腹泻疫苗研究进展被引量：2
- 2023年
- 猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED)是一种由猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的一种猪急性、高度接触性的肠道传染病,由于其高发病率和高致死率,给全球养猪业造成了巨大的经济损失。接种疫苗是当前预防PED最经济和有效的措施,但由于PEDV变异株的不断出现,疫苗的免疫保护效果不佳。因此,急需研发更加安全、高效的疫苗来预防PED。综述了PEDV的病原学特性、致病机制以及PEDV疫苗研究的最新进展,并对PEDV新型高效疫苗的研究策略进行展望,以期为临床上有效防控PED提供参考。
- 梁雨萱庞胜美刘梅王龙龙段强德
- 关键词：猪流行性腹泻猪流行性腹泻病毒疫苗致病机制
- FimH黏附素对F18ac+大肠杆菌黏附能力和生物被膜形成能力的影响被引量：1
- 2017年
- 为研究Ⅰ型菌毛FimH黏附素在F18ac+大肠杆菌(F18ac+E.coli)致病机制中的作用,采用λ-Red同源重组方法成功构建了F18ac+E.coli的fim H基因缺失株(F18ac△fim H)。并使用体外仔猪上皮细胞感染模型,探讨FimH黏附素缺失后对F18ac+E.coli黏附能力和体外生物被膜形成能力的影响。结果表明,与野生株相比,F18ac△fim H缺失株对易感仔猪上皮细胞系IPEC-1和IPEC-J2的黏附能力和体外生物被膜形成能力均显著下降,且其黏附能力可被8%的D-甘露糖所抑制。但是F18ac△fim H/pfim H回补株的黏附能力以及生物被膜形成能力均基本恢复至野生株水平。可见,FimH黏附素是介导F18ac+E.coli黏附的重要黏附因子。
- 段强德许保疆王录军付宏岐朱国强
- 关键词：生物被膜
- 肠炎沙门菌sef14基因缺失株生物学功能被引量：2
- 2022年
- 构建了肠炎沙门菌参考株SE50336的SefA主要亚单位编码基因sefA的缺失株SE50336ΔsefA,进一步探究野生株及SEF14菌毛缺失株的生物学功能。以SE50336为模板,利用λ-red同源重组技术构建sefA缺失株,通过绘制生长曲线、生物被膜测定试验、刚果红-考马斯亮蓝无盐培养基菌落表型试验、RT-qPCR(real-time quantitative polymerase chain reaction)、人结肠腺癌上皮细胞(Caco-2)的体外黏附测定来检测和比较2种菌株的生物学特性,并利用野生株和缺失株分别攻毒小鼠,探究SEF14菌毛对肠炎沙门菌致病力的影响。结果显示,野生株及缺失株生长情况无明显差异。与野生株相比,ΔsefA缺失株的生物被膜形成能力有所下降;菌落表型试验中野生株表现出典型的rdar(red,dry and rough)表型,而ΔsefA缺失株表现出saw(smooth and white)表型;RT-qPCR试验中,野生株的生物被膜形成主要关联基因csgA、bcsA、pgaC、fimA的转录量均显著高于ΔsefA缺失株。但缺失株与野生株对于Caco-2上皮细胞的黏附差异不显著(P=0.41)。小鼠体内致病性试验显示,野生株的LD;(10 CFU)显著低于缺失株(17.78 CFU),表明sefA亚单位编码基因缺失株减弱了肠炎沙门菌对BALB/c小鼠的毒力。上述数据和试验结果为进一步研究SEF14菌毛的生物学功能及其致病性提供了基础。
- 顾宣强侯千禧刘家奇李雅倩夏芃芃段强德朱国强
- 关键词：肠炎沙门菌生物学功能
- 动物源产肠毒素大肠杆菌(ETEC)黏附素研究进展
- 段强德羊扬周明旭夏芃芃朱国强
- 细菌Ⅷ型分泌系统的研究进展
- 2020年
- 细菌为了促进生物被膜(Biofilm,BF)的形成、提高对宿主细胞的黏附和定植能力,进化出了许多简洁的机制,用来加工、组装和分泌相应的功能性蛋白[1]。目前已经在细菌中发现了9种分泌系统,包括:Ⅰ型分泌系统(Type Ⅰ secretion system,TISS)由3种蛋白(内膜ABC转运蛋白、周质膜融合蛋白和外膜孔蛋白)组成跨细胞双层膜的复合物,使分泌的蛋白一次性穿过内外膜分泌到胞外[2];Ⅱ型分泌系统(T2SS),与V型分泌系统(T5SS)的蛋白均依赖内膜上的Sec转位酶进入细胞周质,再利用β折叠桶实现跨外膜分泌[3];Ⅲ型分泌系统(T3SS)较复杂,效应蛋白利用针状复合体以注射的方式注入宿主细胞内[4]。
- 王奕婷张东许姝段强德朱国强朱国强
- 关键词：分泌系统宿主细胞ABC转运蛋白双层膜生物被膜复合体
- 研究生值班制度在高校兽医检测专业实验室建设管理中的实践
- 2019年
- 高校兽医检测实验室面对社会接收样品,提供兽医诊断和病原检测服务,对样品接收、处理有时效性要求;同时对整个实验室的人、机、料、法、环等要素有着较高要求。依靠高校全职工作人员对专业兽医检测实验室进行全面管理,限于效率不高、样品接收不够及时、周末及假期无人值班、环境要素有时无人监控等问题。通过对研究生值班制度的摸索、实践,使得以上问题得到基本解决。本文介绍了该制度运行模式、实行要点,总结了相关的管理经验及体会。
- 羊扬张欣王志成夏芃芃夏芃芃孟霞段强德朱国强
