王亚莉
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：浙江农林大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 靶向猪CLTC基因的miRNA对乙脑病毒侵入PK15细胞作用的研究
- 乙型脑膜炎病毒（Japanese encephalitis virus,JEV）为虫媒病毒，属于黄病毒科。能够在世界范围内引起严重的急性脑膜炎疾病。猪是乙型脑膜炎病毒的贮存宿主，猪-蚊-猪，猪-蚊-人的循环传播严重威胁着...
- 王亚莉
- 关键词：PK15细胞
- 文献传递
- 靶向猪CLTC基因miRNA的预测与验证
- 2017年
- 网格蛋白介导的胞吞是病毒侵入细胞的重要途径,网格蛋白重链(clathrin heavy chain,CLTC)是形成网格蛋白小窝结构的重要组成部分。针对CLTC基因的转录后调控特别是调控猪Sus scrofa CLTC的miRNA目前还不太清楚。本研究旨在筛选出调控猪CLTC基因的miRNA。利用生物信息学方法预测出6个靶向猪CLTC基因的miRNA,将猪CLTC基因3′UTR克隆至双荧光素酶报告基因载体psi CHECK2中获得双荧光素酶报告基因重组载体psi CHECK2-CLTC-3′UTR。将预测得到的miRNA分别和重组载体psi CHECK2-CLTC-3′UTR共转染到细胞中,以乱序序列作为阴性对照(NC),检测miRNA对重组质粒荧光素酶活性的影响。结果发现miR-205,miR-1,miR-129-5p和miR-206均能够显著抑制荧光素酶活性(P<0.05)。在猪肾上皮细胞系PK15细胞中超表达miR-1和miR-129-5p后,定量PCR(q-PCR)结果显示:猪CLTC基因的表达量显著下调。突变了psi CHECK2-CLTC-3′UTR载体中这4个miRNA的种子序列的结合位点发现:miR-1对突变质粒中的荧光素酶无显著抑制作用。表明miR-1与猪CLTC基因有直接的靶向关系,并通过其种子序列抑制CLTC基因的表达。
- 王亚莉何珂于静杨松柏赵阿勇
- 关键词：MIRNA胞吞
