魏明旭
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 供职机构：中山大学生命科学学院基因工程教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- mNUDC基因在巴斯德毕赤酵母中表达载体的构建及表达
- 2009年
- 目的:探索小鼠核迁移蛋白C(mNUDC)在毕赤酵母分泌表达的方法。方法:应用PCR扩增本实验室所构建的重组质粒PET28b-his-mNUDC中的mNUDC基因,使用基因重组方法构建毕赤酵母真核表达载体pPICZαA-his-mNUDC,电击转化酵母菌株KM71后,经摇瓶发酵和甲醇诱导,SDS-PAGE和Westernblot分析鉴定上清中重组mNUDC蛋白表达量。结果:经过PCR方法,有效扩增了mNUDC基因,构建了pPICZαA-his-mNUDC酵母表达质粒,序列分析表明所构建的含mNUDC基因的质粒与设计相同,mNUDC蛋白得到正确表达。使用SDS-PAGE和Western blot方法可以检测到mNUDC的稳定、高效地分泌表达。结论:成功地构建了mNUDC基因的毕赤酵母表达载体pPICZαA-his-mNUDC,并在毕赤酵母中实现分泌型离表达,为进一步研究mNUDC蛋白对小鼠的生物活性奠定了实验基础。
- 陈彦球魏明旭张磊杨燕
- 关键词：毕赤酵母分泌表达
