白雪
- 作品数:6 被引量:18H指数:3
- 供职机构:广西大学化学化工学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广西研究生教育创新计划广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域:化学工程生物学理学环境科学与工程更多>>
- 桃金娘烯醛基噻二唑-酰胺化合物的合成及性能被引量:7
- 2017年
- 以α-蒎烯(Ⅰ)为原料,经选择性烯丙位甲基氧化反应制备了桃金娘烯醛(Ⅱ),Ⅱ再经缩合反应得到了桃金娘烯醛缩氨基硫脲(Ⅲ),进一步氧化环化得到了桃金娘烯醛基噻二唑(Ⅳ),然后与系列酰氯化合物进行N-酰化反应,以66%~81%的收率合成得到了11个桃金娘烯醛基噻二唑-酰胺化合物Ⅴa^k。采用FTIR、1HNMR、13CNMR和ESI-MS对目标化合物进行了结构表征,并测试了目标化合物的抑菌和除草活性。结果表明:在化合物Ⅴa^k的质量浓度为50 mg/L时,Ⅴa^k对测试的苹果轮纹病菌、黄瓜枯萎病菌、花生褐斑病菌、小麦赤霉病菌和番茄早疫病菌均显示不同程度的抑菌活性,其中桃金娘烯醛基噻二唑-乙酰胺(Ⅴa)、桃金娘烯醛基噻二唑-氯乙酰胺(Ⅴb)和桃金娘烯醛基噻二唑-正丙酰胺(Ⅴc)对苹果轮纹病菌的相对抑制率分别为93.0%、93.0%和98.2%,化合物Ⅴb对黄瓜枯萎病菌的相对抑制率为84.3%,表现出与阳性对照嘧菌酯(对苹果轮纹病菌和黄瓜枯萎病菌的相对抑制率分别为96.0%和87.5%)相当的抑菌活性。构效分析表明:脂肪族取代基衍生物表现出更好的抑菌活性。此外,在质量浓度为100 mg/L时,化合物Ⅴc对油菜胚根生长的相对抑制率为79.6%,显示出比阳性对照丙炔氟草胺(抑制率为63.0%)更好的除草活性。
- 林桂汕段文贵利镇升白雪胡琼雷福厚
- 关键词:Α-蒎烯桃金娘烯醛除草活性精细化工中间体
- 新型桃金娘烯醛基双酰胺-噻二唑化合物的合成及其抗真菌活性被引量:6
- 2015年
- 以α-蒎烯为起始原料,经氧化制得桃金娘烯酸(3);脂肪族二酸在POCl3作用下与氨基硫脲经脱水环合制得脂肪族双噻二唑(4a^4h);4a^4h分别与3经脱水反应合成了8个新型的桃金娘烯醛基双酰胺噻二唑化合物(5a^5h),其结构经1H NMR,13C NMR,IR和ESI-MS表征。抗真菌活性测试结果表明,在用药量为50μg·m L-1时,5a^5h对黄瓜枯萎病菌、花生褐斑病菌、苹果轮纹病菌、番茄早疫病菌和小麦赤霉病菌均有一定的抑制作用,其中桃金娘烯醛-辛二酸基双酰胺-噻二唑(5f)对苹果轮纹病菌的抑制率为60.3%,桃金娘烯醛-丁二酸基双酰胺-噻二唑(5b)和桃金娘烯醛-癸二酸基双酰胺-噻二唑(5h)对小麦赤霉病菌的抑制率分别为52.8%和54.4%。
- 白雪段文贵林桂汕黄铎云刘陆智雷福厚
- 关键词:Α-蒎烯桃金娘烯醛抗真菌活性
- 铜绿假单胞菌耐热亮氨酸氨肽酶基因在大肠杆菌中的克隆、表达及表达产物的酶学特性鉴定
- 2022年
- 氨肽酶在食品加工、饲料生产、生物活性肽制备等多个领域被广泛应用,尤其是耐热氨肽酶的应用前景更加广阔。目前,有关铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)耐热氨肽酶基因的成功克隆和表达的研究较少,本研究将源自铜绿假单胞菌GF31的亮氨酸氨肽酶基因aps进行密码子优化,通过全基因合成得到aps序列并构建周质表达载体pET22b(+)-pelB-aps,在大肠杆菌(Escherichia coli)Rosetta gami2(DE3)中进行表达。纯化后的重组菌所产亮氨酸氨肽酶比活力为6.8 U/mg,最适反应温度和pH值分别为80℃和8.0;在50℃~70℃或pH 7.0~9.0下孵育1 h后该酶仍保持80%以上的活力;Co^(2+)对其酶活力有较强激活作用,Fe^(2+)、Ni^(2+)、Zn^(2+)、β-巯基乙醇、DTT、EDTA、1,10-邻菲咯啉和Bestatin对其有较强的抑制作用;该酶对Leu-pNA和Met-pNA的水解效果较好,对Ala-pNA和Arg-pNA也有一定水解能力,其中对Leu-pNA水解的Km和V_(max)分别为1.11 mmol/L和101.01μmol·L^(-1)·min^(-1)。通过三维结构分析发现该酶由PA结构域与催化结构域组成,分子对接显示了关键氨基酸GLU305、GLU304、ASP272、ASP333和ARG386与底物通过氢键结合,并在反应过程中有重要作用。研究结果为发掘铜绿假单胞菌GF31亮氨酸氨肽酶的应用价值、结构特征及定向改造提供了有价值的参考。
- 李进李青云刘幽燕刘幽燕白雪唐爱星
- 关键词:酶学性质铜绿假单胞菌
- 枯草芽孢杆菌表面展示氨肽酶的构建及协同水解大豆蛋白
- 2024年
- 氨肽酶是蛋白质深度水解的重要协同酶,但游离酶使用成本高且稳定性差,限制了其工业化应用。本研究利用表面展示技术将来源于铜绿假单胞菌GF31的氨肽酶基因Aps展示到Bacillus subtilis WB800N芽孢的表面,构建了一种易分离且稳定性好的新型全细胞生物催化剂。通过免疫荧光分析,证明氨肽酶在芽孢表面正确表达。在最适反应温度60℃、pH=9.0的条件下,氨肽酶活力最高可达75.61U/g芽孢。将表面展示氨肽酶协同碱性蛋白酶水解大豆蛋白,在60℃、碱性蛋白酶与表面展示氨肽酶加入比例为2∶1、水解pH先为10.0后为9.0的条件下,水解5.0%的大豆蛋白8h,水解度最高可达55.50%,分别是表面展示氨肽酶与碱性蛋白酶单独水解时的3.3倍、1.5倍。同时16种游离氨基酸含量大幅度提升,其中疏水性氨基酸亮氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸含量分别增加19.21mg/L、8.59mg/L和16.77mg/L,鲜味氨基酸谷氨酸、天冬氨酸含量增加13.98mg/L和4.11mg/L,说明表面展示氨肽酶在蛋白质的深度水解及对蛋白水解液脱苦、增鲜方面具有显著的作用,具有良好的工业应用前景。
- 袁晓黎李青云刘幽燕刘幽燕白雪唐爱星
- 关键词:氨肽酶枯草芽孢杆菌大豆蛋白协同水解
- 来源于铜绿假单胞菌GF31的拟除虫菊酯降解酶在大肠杆菌细胞的功能性表面展示
- 2023年
- 拟除虫菊酯类农药由于其高疏水性和高分子质量,难以被微生物吸附、摄取和降解,如何提高此类底物的生物可及性是环境生物修复的关键之一.利用细胞表面展示技术将拟除虫菊酯降解酶展示到大肠杆菌细胞表面,构建新型全细胞催化剂,克服拟除虫菊酯类农药的吸附-摄取限制.将丁香假单胞菌冰核蛋白InaK的N-末端作为锚定基序与来自铜绿假单胞菌GF31的拟除虫菊酯降解酶基因融合,转化大肠杆菌Rosetta-gami,构建全细胞催化剂.结果表明在0.05mmol/L的IPTG条件下诱导培养12 h后,该全细胞催化剂的氨基肽酶活性达到0.25 U/OD_(600)/mL,对高效氯氰菊酯农药底物的降解速率达到35.9μmol L^(-1)d^(-1),且对5种常用拟除虫菊酯类农药均具有降解能力.通过细胞的分级分离和免疫荧光分析确定了功能蛋白在细胞膜上的正确位置.该全细胞催化剂经过10次重复反应,残余活性仍能保持在70%以上,具有较好的稳定性.本研究实现了拟除虫菊酯降解酶在大肠杆菌细胞表面上的功能性展示,为高疏水性有机农药的环境修复提供了一种方法.
- 陆柳萃李青云刘幽燕刘幽燕白雪唐爱星
- 关键词:大肠杆菌
- 2-取代酰氨基-5-(α-龙脑烯醛基)-1,3,4-噻二唑化合物的合成及抑菌活性被引量:8
- 2016年
- 以α-蒎烯为原料,先经环氧化和催化异构得到α-龙脑烯醛,再与氨基硫脲反应得到α-龙脑烯醛基缩氨基硫脲,然后环合生成α-龙脑烯醛基噻二唑,最后将其与一系列酰氯发生N-酰化反应,合成得到12个未见文献报道的2-取代酰氨基-5-(α-龙脑烯醛基)-1,3,4-噻二唑化合物(6a^6l)。通过FT-IR、~1H NMR、^(13) C NMR和ESI-MS对12个目标产物进行结构表征,并对目标产物的抑菌活性进行了测试。抑菌活性测试表明:在50 mg/L质量浓度下,目标化合物对5种供试病菌均有不同程度的抑制活性,部分目标化合物的抑菌活性与商品抑菌剂嘧菌酯相近,甚至超过嘧菌酯,其中目标化合物6j对小麦赤霉病菌(Fusarium graminearum)的抑菌率达94.4%,6h对苹果轮纹病菌(Physalospora piricola)的抑菌率达97.7%。
- 黄铎云段文贵林桂汕白雪肖昊杨章旗
- 关键词:Α-蒎烯酰胺1,3,4-噻二唑抑菌活性