江伟华
- 作品数：5 被引量：27H指数：3
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- 相关领域：农业科学生物学理学轻工技术与工程更多>>
- 牦牛胃蛋白酶原C基因的克隆及序列分析
- 2014年
- 采用RT-PCR技术,成功获得了牦牛胃蛋白酶原C基因,用ProtParam在线工具对牦牛胃PGC蛋白的基本性质进行测定。结果表明,其相对分子质量为42 931.6,pI值为4.45,半衰期为30 h,不稳定系数为40.76,总平均亲水性为0.041。对该蛋白的二级、三级结构分析表明,牦牛胃蛋白酶结构与黄牛没有明显区别,均含有5个α-螺旋、25个β-折叠,三维结构也基本一致。
- 朱小翌张林骆美蓉江伟华林忠荔刘益丽江明锋
- 关键词：牦牛克隆
- 牦牛哺乳期乳脂肪酸变化规律研究被引量：3
- 2015年
- 为了研究脂肪酸的含量、种类及变化规律,试验采用气相色谱-质谱法对20头牦牛在哺乳期内（1-180 d）12个时间点的乳样进行了分析测定。结果表明：在牦牛乳样内共检测出30余种脂肪酸,其中含量最高的为十六烷酸即软脂酸/棕榈酸,其次为十八碳烯酸,含量最低的是十三碳酸和全顺式-5,8,11,14-二十碳四烯酸即花生四烯酸。相对产犊后第15天而言,长链脂肪酸在整个哺乳期无显著差异;中链脂肪酸在产犊后3-7天及120天与其他时间点相比有显著差异（P〈0.05）;单不饱和脂肪酸则在产犊后第3,4天有显著差异,在5,6,7天有极显著差异（P〈0.01）;而多不饱和脂肪酸仅在120天与其他时间点有显著差异。
- 林忠荔张金灵蔡自建江明锋刘益丽江伟华
- 关键词：饱和脂肪酸气相色谱-质谱法
- 大肠杆菌外源蛋白表达载体稳定性的研究进展被引量：5
- 2014年
- 构建高产、稳定、可靠的质粒载体成为基因重组表达技术的研究重点之一。宿主细胞代谢反应和质粒不稳定性相关信息的缺乏,仍然阻碍着质粒载体的优化,成为限制外源蛋白在大肠杆菌中高效表达的瓶颈之一。主要论述了大肠杆菌外源蛋白表达载体的稳定性,分别从质粒和外源基因的本身特性、重组质粒转化对宿主细胞造成的影响及其他因素等方面阐述了对质粒载体稳定性的影响,同时介绍了相关的解决办法,从而为大肠杆菌表达系统高效表达外源蛋白提供参考。
- 江伟华刘益丽江明锋
- 关键词：大肠杆菌外源蛋白稳定性
- 麦洼牦牛全泌乳期乳中矿物质元素变化规律研究被引量：15
- 2014年
- 为阐明牦牛乳中矿物质元素含量在全泌乳期的变化规律，试验采集了四川省龙日种畜场麦洼牦牛产犊当天到180d（即0～180d）内共12个时间点的乳样。采用微波消解法处理乳样，用电感耦合等离子体发射光谱仪（ICP—OES）测定牦牛乳中14种矿物质元素，分别为4种大量元素（钾（K）、钙（Ca）、镁（Mg）、磷（P））和10种微量元素（硼（B）、钡（Ba）、镉（Cd）、钴（Co）、铜（Cu）、钼（Mo）、镍（Ni）、钛（Ti）、锌（Zn）、锰（Mn）），并以牦牛产犊后30d采集的乳样数据为基准进行统计分析。结果显示，麦洼牦牛初乳中K、Ca、Mg、P4种大量元素含量较高。与30d的常乳含量相比，K的含量在0d时差异极显著（P〈0．01），在120d时差异显著（P〈0．05）；Ca的含量在5d时差异显著（P〈0．05）；Mg的含量在180d时差异显著（P〈0．05）；P的含量变化差异不显著（P〉0．05）。在0～180d泌乳期内微量元素随泌乳期的变化也较明显，与30d的常乳含量相比，Ba的含量在0和1d时差异极显著（P〈0．01），在2、3、4、5和180d时差异显著（P〈0．05）；Mo、Ni、Zn的含量在180d时差异显著（P〈0．05）；B、Cd、Cu、Ti、Mn的含量随泌乳期变化差异均不显著（P〉0．05）。综上所述，牦牛乳中K、Ca、Mg、Ba、Mo、Ni、Zn的含量随泌乳期的变化差异显著（P〈0．05），P、B、Cd、Cu、Ti、Mn的含量变化不显著（P〉0．05）；整体上看，K、Mg、P、Ba、Zn的含量变化呈先降低后增加的趋势，而Ca的含量呈现出先增加后降低的趋势。
- 刘益丽江明锋江伟华林忠荔蔡自建张林朱小翌任洪辉李建波
- 关键词：牦牛乳矿物质元素
- 藏绵羊溶菌酶1基因的克隆、原核表达及生物信息学分析被引量：4
- 2015年
- 试验旨在研究藏绵羊溶菌酶(lysozyme,LZM)1基因在瘤胃、瓣胃、皱胃、气管、肝脏和肾脏各组织中的表达情况、进化关系及抑菌活性。采用RT-PCR技术克隆藏绵羊LZM1基因,定量PCR检测LZM1基因在瘤胃、瓣胃、皱胃、气管、肝脏和肾脏中的表达情况,并将该基因的氨基酸序列与普通牛胃LZM等氨基酸序列进行比对,根据邻位连接法构建系统进化树;将该基因插入pET-32a质粒后构建得到pET-32a-LZM1重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞并诱导表达,SDS-PAGE法鉴定表达产物;采用比浊法测定LZM1蛋白的活性;采用琼脂糖平板扩散法研究异源表达蛋白的抑菌活性。结果表明,从藏绵羊瘤胃、瓣胃、皱胃、气管、肝脏和肾脏各组织中成功克隆藏绵羊LZM1基因,其在瘤胃、瓣胃、皱胃、气管、肝脏和肾脏中均有表达,在皱胃中表达量最高;其氨基酸序列与普通牛胃LZM(GenBank登录号:NM_001080339.1)序列的同源性最高(96%);重组蛋白LZM1分子质量约为35ku;其比活力约为400U/mL;该重组LZM1对金黄色葡萄球具有良好的抑菌活性。
- 江伟华朱莲莲刘益丽林忠荔江明锋
- 关键词：藏绵羊溶菌酶克隆原核表达
