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李玉华

作品数：126 被引量：345H指数：8
供职机构：中国食品药品检定研究院更多>>
发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技重大专项“重大新药创制”科技重大专项更多>>
相关领域：医药卫生生物学农业科学理学更多>>

合作作者

文献类型

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领域

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  • 9篇生物学
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  • 1篇矿业工程
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主题

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  • 20篇狂犬病病毒
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  • 10篇乙脑
  • 10篇基因
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作者

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传媒

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年份

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  • 14篇2014
  • 14篇2013
  • 7篇2012
共 126 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
重组人干扰素α1b蛋白质含量HPLC检测方法的建立被引量：2
2013年
目的建立测定重组人干扰素α1b(Recombinant human interferonα1b,rhIFNα1b)蛋白质含量的HPLC检测方法,并进行验证。方法应用HPLC外标法测定IFNα1b对照品的蛋白质含量,并对方法的线性及精密度进行验证。采用建立的HPLC外标法测定3批rhIFNα1b样品的蛋白质含量,并与Lowry法的检测结果进行比较。结果蛋白质在进样量5～50μg范围内,与峰面积呈良好的线性关系(r=0.998 1);用建立的方法重复进样6次,检测rhIFNα1b对照品溶液的蛋白质含量,相对标准偏差(RSD)为0.92%,<2%;用建立的方法检测0812001、0812003、0812006批rhIFNα1b样品溶液的蛋白质含量分别为0.465、0.503和0.496 mg/ml;HPLC外标法与Lowry法测定的蛋白质浓度有一定的差异,HPLC法的RSD<2%,Lowry法的RSD>4%,HPLC法的精密度较Lowry法好。结论建立了测定rhIFNα1b蛋白质含量的HPLC外标法,该方法操作简便,精密度较好,可用于IFNα1b原液蛋白质含量的检测。
周倩李玉华
关键词：干扰素Α1B蛋白质含量高效液相色谱法
第六批狂犬病免疫球蛋白国家标准品的协作标定
2022年
目的 对第六批狂犬病免疫球蛋白国家标准品开展赋值研究。方法 组织10个有资质的实验室,分别采用小鼠中和试验(mouse neutralization test,MNT)和快速荧光灶抑制试验(rapid fluorescence focus inhibition test,RFFIT),用第二批狂犬病免疫球蛋白国际标准品(RAI)对新标准品进行协作标定。随机抽取一定数量的新标准品,检测其pH值,方差分析检验标准品的均匀性;将新标准品分别在不同的温度(4、25和37℃)放置不同时间(1、2、3和4周),每个时间点取3支先于-20℃保存,待所有样本收集完成后采用RFFIT法检测抗体效价,方差分析检验标准品的稳定性。结果 协作标定的数据经统计学分析,MNT法的赋值为35.4 IU/mL,95%可信限为32.6~38.2 IU/mL;RFFIT法的赋值为38.7 IU/mL,95%可信限为36.8~40.6 IU/mL;将两种方法的赋值取几何均值(37.0 IU/mL)即为第六批狂犬病免疫球蛋白国家标准品的赋值,其均匀性和稳定性良好。结论 完成了第六批狂犬病免疫球蛋白国家标准品(批号:250011-201306)的赋值研究,其结果准确可靠、科学严谨,对狂犬病人免疫球蛋白类制品的质量控制具有重要意义。
石磊泰曹守春吴小红李加王云鹏李玉华
关键词：国家标准品
狂犬病病毒CTN株核蛋白可溶性高效表达及纯化
2017年
目的通过原核表达系统对狂犬病病毒CTN株核蛋白(NP)进行高效的可溶性表达及纯化。方法构建含有融合标签的狂犬病病毒CTN株核蛋白表达质粒,筛选可溶性表达条件,采用亲和层析和凝胶过滤层析对目的蛋白进行纯化,切除目的蛋白的融合标签,最终获得高效表达的可溶性目的蛋白。结果成功建立应用PBCX原核表达系统高效表达重组可溶性狂犬病病毒CTN株核蛋白rb-NP的表达及纯化工艺,获得高纯度目的蛋白。结论本研究建立的可溶性表达狂犬病病毒核蛋白的方法,操作简便,表达量高,适合目的蛋白的规模制备,为深入研究狂犬病病毒核蛋白生物学功能、开展狂犬病诊断试剂研究及新型疫苗的研发提供了新的技术手段。
李加刘雅菲王云鹏俞永新李玉华
关键词：狂犬病病毒核蛋白可溶性表达
生物制品中逆转录酶活性检查假阳性结果的原因分析及对策被引量：2
2012年
目的对造成生物制品中逆转录酶活性检查假阳性结果的原因进行分析和讨论,并探讨相应的对策。方法查阅生物制品中逆转录酶活性检查方法的相关文献,并结合实际工作中的检定结果进行分析总结。结果多种因素可造成逆转录酶活性检查结果的假阳性,可针对这些原因采取相应的策略。结论逆转录酶活性检查方法的进一步完善,对于生物制品的质量控制具有十分重要的意义。
李竹石杨会强李玉华
关键词：逆转录病毒逆转录酶
2016~2018年乙脑减毒活疫苗批签发概况和质量分析被引量：2
2020年
随着脊髓灰质炎逐渐被消灭,流行性乙型脑炎(简称乙脑)成为亚洲儿童神经系统病毒感染和残疾的主要原因。乙脑由乙脑病毒引起,主要在东南亚地区流行,近年流行范围逐步扩大至澳大利亚。全球每年约发生70000例病例,病死率为10%~30%,另有30%~50%引起严重的神经和心理后遗症[1]。儿童是乙脑病毒主要易感人群,在我国除新疆、西藏、青海外均有发病与流行,对人民健康造成极大危害,国家卫生健康委员会将其列为乙类传染病。
刘欣玉贾丽丽徐宏山李玉华
关键词：乙型脑炎减毒活疫苗批签发
乙型脑炎减毒活疫苗SA14-14-2在BHK21细胞上传代后的基因序列研究被引量：1
2019年
目的:研究乙型脑炎减毒活疫苗SA14-14-2在BHK21细胞上传代后的病毒基因序列,以深入控制乙型脑炎减毒活疫苗的安全性。方法:将乙型脑炎减毒活疫苗SA14-14-2在BHK21细胞上连续传代,选取第二代病毒(P2)、第五代病毒(P5)、第十五代病毒(P15)提取RNA,反转录为c DNA后,进行各代病毒全基因序列分析,分析与乙型脑炎病毒毒力密切相关的关键位点基因是否发生改变。结论:乙型脑炎减毒活疫苗SA14-14-2在BHK21细胞上传5代后,病毒E蛋白上关键基因第279位(E279)氨基酸由甲硫氨酸(M)突变为赖氨酸(K)。
李明赵丹华李玉华
SARS-CoV-2 mRNA疫苗免疫血清抗体水平检测方法的比较
2023年
目的对3种SARS-CoV-2 mRNA疫苗免疫血清抗体水平的检测方法进行比较。方法分别采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)、假病毒中和试验(pseudo virus-based neutralization assay,PBNA)及微量细胞病变中和试验(micro-cytopathic effect neutralization test,MCPENT)检测SARS-CoV-2 mRNA疫苗免疫前及2针免疫后共120份血清(免疫前40份,免疫后80份)的抗体水平,分析3种检测方法的一致性和相关性。结果3种方法检测120份血清的符合率均达90%以上,Kappa系数均>0.7,P均<0.01。3种方法检测阳性血清抗体滴度结果的相关系数(r)为0.825~0.902,P均<0.01。结论3种方法用于SARS-CoV-2 mRNA疫苗免疫血清抗体水平检测具有良好的一致性及相关性。
吴小红赵丹华刘欣玉杨立宏李玉华曹守春
关键词：酶联免疫吸附试验
SA14-14-2乙型脑炎病毒Vero细胞疫苗候选株的筛选及其表型和基因型特征
2023年
目的研制以Vero细胞为生产基质的SA14-14-2乙型脑炎(乙脑)减毒活疫苗候选毒株。方法将SA14-14-2株原始病毒在Vero上传代并进行空斑克隆,对克隆株病毒进行Vero细胞培养,使用3周龄小鼠及3日龄乳鼠对脑内致病力进行测定,并进行乳鼠脑内回传、弱毒稳定性实验及免疫力实验等。结果挑选到10个病毒克隆株,通过全面对比后,筛选到1株病毒滴度高(>6.0 lgPFU/ml)且稳定的毒株SA14-14-2 VC_(6)。将该株与SA14-14-2原始株进行主要指标对比,结果表明,VC_(6)株全基因序列与原株相比仅有1个位点发生突变(S66L),对小鼠和乳鼠脑内致病力、弱毒稳定性、免疫原性均与原株相同。结论筛选到的SA14-14-2 VC_(6)株符合中国药典乙脑减毒活疫苗生产毒种的要求。各项主要指标不劣于SA14-14-2生产用毒种,是可应用Vero细胞培养生产的乙脑疫苗候选株。
刘晓辉李淼刘欣玉徐宏山房恩岳俞永新李玉华
关键词：乙型脑炎病毒SA14-14-2乙型脑炎减毒活疫苗
登革病毒3型E蛋白的原核表达及抗体的制备被引量：2
2013年
目的原核表达并纯化登革病毒3型（DENV-3）E蛋白，并用于制备其抗体。方法采用PCR技术克隆DENV-3E蛋白基因，插入原核表达质粒载体pET-32a（＋），转化大肠杆菌RoseRa（DE3），IPTG诱导表达。表达产物经纯化后，免疫家兔，制备DENV-3E蛋白抗血清，并用于Westernblot鉴定。同时，采用ELISA测定其抗体效价，并初步应用于DENV-3的检测。结果重组表达载体经双酶切及测序证实构建正确；表达的重组蛋白相对分子质量约为65×103，主要以包涵体形式表达；用纯化的包涵体蛋白免疫家兔后，获得的特异性抗血清效价为1：20480，该血清可与DENV-3发生特异性反应。结论本研究原核表达并纯化了DENV-3E蛋白，制备了高滴度的特异性兔抗血清。制备获得的DENV-3E蛋白抗体可用于登革病毒的鉴定，为登革病毒相关研究奠定了基础。
林华杨会强李竹石杨健赵宇刘俐葛永红曾献武曹毅乔代蓉李玉华
关键词：登革病毒E蛋白原核表达多克隆抗体
原代细胞在人用狂犬病疫苗中的应用及研究进展被引量：3
2021年
原代细胞直接来源于动物,保留了其来源组织的特性,不具有致瘤特性。原代细胞仅使用简单的培养基和牛血清即可实现工业化生产,而且通常对多种病毒具有广泛的敏感性。但原代细胞也有不足:操作过程中污染的风险高;不同来源的动物质量不稳定;虽然非人类灵长类动物的细胞培养在过去被广泛使用,但其在某些国家和地区已越来越难以获得,而且有时使用这些动物需证明是符合要求的。我国使用原代地鼠肾细胞生产的人用狂犬病疫苗预防狂犬病已有半个世纪的历史,目前该类疫苗仍在我国疫苗市场流通,为我国狂犬病的预防和控制发挥着积极的作用。本文就原代细胞在人用狂犬病疫苗中的应用及研究进展作一综述。
石磊泰李玉华
关键词：原代细胞狂犬病疫苗
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