李佩佩
- 作品数：14 被引量：5H指数：1
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- 一种柞蚕微孢子虫株（系）的分离、培养及保存的方法
- 本发明公开了一种柞蚕微孢子虫株(系)分离、培养及保存的方法。利用柞蚕精巢或卵巢组织制备原代细胞，分离、培养柞蚕微孢子虫；利用柞蚕蛹期滞育可以长期储存的特点，将柞蚕原代细胞分离、培养的柞蚕微孢子虫经发芽后注射入健康柞蚕蛹体...
- 岳冬梅范琦王林美李佩佩叶博赵振军张波
- 文献传递
- 利用荧光定量PCR检测方法对柞蚕不同生产阶段柞蚕微孢子虫发生情况的初步调查
- 2019年
- 柞蚕微粒子病是柞蚕生产中重点检测的病害,目前主要采用镜检淘汰带毒母蛾及子代卵的方法进行病害防控,而荧光定量PCR检测方法具有较高的灵敏度,能够有效提高柞蚕生产中对微孢子虫的阳性检出率。应用荧光定量PCR检测方法对来自2个蚕区柞蚕蛹、蛾的微孢子虫发生情况进行初步调查,同时考察蛹期不同积温发育时期微孢子虫的发生情况以及蛾期亲本带毒对子代卵带毒的影响。结果表明,在蛹期积温中后期(150℃以后)柞蚕微孢子虫的阳性检出率提高,可以考虑在这一发育阶段利用荧光定量PCR方法进行蛹期提前预检;在检验柞蚕微孢子虫垂直传播过程中,发现亲本蛾带毒情况对子代卵带毒存在不同程度的影响,有必要用荧光定量PCR检测方法在卵期对柞蚕微孢子虫进行辅助检测,可以弥补常规蛾期检测的漏检问题。研究结果为应用荧光定量PCR检测技术,在蛹期提前预检以提高种茧品质,在蛾期检测以及卵期辅助检测以减少柞蚕微孢子虫的垂直传播,最终有效控制柞蚕微粒子病的发生提供了参考依据。
- 米锐米锐李青峰马淑慧李佩佩赵振军马淑慧李亚洁叶博孟楠赵振军朱有敏孙永欣范琦
- 关键词：柞蚕柞蚕微孢子虫荧光定量PCR发育时期
- 一组用于快速诊断柞蚕微孢子虫的荧光定量PCR引物及其应用
- 本发明公开一组用于诊断柞蚕微孢子虫的特异性引物及其应用，通过SYBR Green荧光定量PCR方法实现了对柞蚕微孢子虫的高灵敏特异性检测，最优反应条件为:95℃30s；以95℃5s，62.5℃30s循环40次；熔解曲线条...
- 米锐李佩佩范琦李亚洁赵振军李树英都兴范
- 文献传递
- 高通量柞蚕微孢子虫快速诊断方法研究
- 【背景】柞蚕微粒子病严重困扰柞蚕产业发展,对其病原微孢子虫进行准确诊断,是切断胚种传播、控制微粒子病的有效手段。分子诊断技术通过特异性扩增靶标基因达到诊断目的,灵敏度高,特异性好,广泛应用于病原微生物的检测。然而,现行柞...
- 李佩佩米锐岳冬梅叶博赵振军张波王林美范琦
- 关键词：柞蚕微孢子虫分子诊断灵敏度DNA提取荧光定量PCR
- 文献传递
- 一组柞蚕微孢子虫检测引物及其应用
- 本发明公开一组柞蚕微孢子虫检测引物及其应用，具体的所述引物碱基序列如SEQ ID NO.1～3所示，其模板提取的方法为，应用碱裂解结合磁珠进行DNA的释放、富集、分离与纯化，该引物特异性好，灵敏度高，利用该引物建立的柞蚕...
- 李佩佩范琦叶博赵振军王晓燕都兴范
- 一组柞蚕微孢子虫检测引物及其应用
- 本发明公开一组柞蚕微孢子虫检测引物及其应用，具体的所述引物碱基序列如SEQ ID NO.1～3所示，其模板提取的方法为，应用碱裂解结合磁珠进行DNA的释放、富集、分离与纯化，该引物特异性好，灵敏度高，利用该引物建立的柞蚕...
- 李佩佩范琦叶博赵振军王晓燕都兴范
- 文献传递
- 一种高通量快速提取疟原虫DNA的方法及其应用
- 本发明公开一种高通量快速提取疟原虫DNA的方法及其应用，具体的所述模板提取的方法为，应用碱裂解结合磁珠进行DNA的释放、富集、分离与纯化，该方法操作简单快速、成本低、通量高、污染风险低，提取的DNA品质高、可自动化，可以...
- 李佩佩范琦赵振军叶博曹雅明
- 文献传递
- 一种柞蚕微孢子虫模板DNA的提取方法及其在分子诊断方面的应用
- 本发明公开一种快速提取柞蚕微孢子虫模板DNA的方法及其应用，具体的所述模板提取的方法为，应用碱裂解结合磁珠进行DNA的释放、富集、分离与纯化，该方法操作简单快速、成本低、通量高、能活蛹取样、抗干扰能力强、污染风险低，提取...
- 李佩佩范琦米锐岳冬梅赵振军叶博王林美张波
- 一种柞蚕微孢子虫株（系）的分离、培养及保存的方法
- 本发明公开了一种柞蚕微孢子虫株(系)分离、培养及保存的方法。利用柞蚕精巢或卵巢组织制备原代细胞，分离、培养柞蚕微孢子虫；利用柞蚕蛹期滞育可以长期储存的特点，将柞蚕原代细胞分离、培养的柞蚕微孢子虫经发芽后注射入健康柞蚕蛹体...
- 岳冬梅范琦王林美李佩佩叶博赵振军张波
- 柞蚕抗菌肽cecropin B的结构和抑菌活性及基因表达分析
- 2019年
- 抗菌肽对昆虫抵御病原微生物的侵染具有重要作用。使用在线软件分析成熟的柞蚕抗菌肽cecropin B高级结构,并与鳞翅目其他昆虫抗菌肽进行聚类分析。利用巴斯德毕赤酵母体外表达柞蚕cecropin B,并测试重组柞蚕cecropin B的抑菌活性。采用qRT-PCR方法检测3个不同品种柞蚕蛹在柞蚕肠球菌、柞蚕核型多角体病毒和柞蚕微孢子虫感染情况下,体内cecropinB基因的转录表达情况。结果显示,柞蚕cecropin B成熟肽的N端和C端分别有1个α螺旋结构,聚类分析将柞蚕cecropin B归为昆虫抗菌肽cecropin B亚型;柞蚕cecropin B在巴斯德毕赤酵母工程菌中得到体外表达,重组柞蚕cecropin B具有体外抑菌活性;柞蚕肠球菌感染的不同品种柞蚕蛹的cecropinB基因转录表达水平均上调,柞蚕核型多角体病毒或柞蚕微孢子虫感染的不同品种柞蚕蛹的cecropinB基因转录表达水平有明显差异,提示柞蚕cecropin B在柞蚕抵抗不同病原微生物的感染过程中可能具有不同的作用。
- 叶博叶博李佩佩赵振军张波李佩佩李树英岳冬梅
- 关键词：柞蚕巴斯德毕赤酵母表达系统病原微生物实时荧光定量PCR
