程建勇
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河北省自然科学基金转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 腺病毒介导人卵泡刺激素基因在山羊乳腺上皮细胞的表达及蛋白活性分析
- 2020年
- 该研究旨在构建含人FSH基因的重组腺病毒载体,在山羊乳腺上皮细胞中进行表达,验证重组人FSH的体外生物学活性。利用AdEasy重组腺病毒系统获得pAdEasy-FSH/His重组腺病毒载体,经HEK293A细胞包装、扩增后获得重组人FSH腺病毒,感染GMEC后,检测FSH表达情况。结果表明,将获得的较高滴度的含FSH目的基因的重组腺病毒感染GMEC后,经Western blot检测GMEC细胞可以成功表达FSH蛋白;通过体外细胞活性试验验证其具备生物学活性。综上所述,腺病毒介导的羊乳腺上皮细胞表达的重组人FSH具备体外生物学活性,这为进一步在大动物乳腺表达重组FSH奠定了基础。
- 李媛华荣茂段家昕陈华丽徐德军杨丽程建勇李晓亚耿果霞李青旺
- 关键词：FSH生物活性
- p38MAPK抑制剂SB202190对猪颗粒细胞活力的影响被引量：2
- 2016年
- p38MAPK是丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated potein kinase,MAPK)家族成员,是细胞内重要的信号转导系统之一,对细胞的生长、分化、凋亡具有重要影响及作用。为探究p38MAPK信号对猪卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响及其可能作用机制,研究以体外培养的猪卵巢颗粒细胞为模型,在培养液中分别添加浓度为0、1、10、20μmol/L的p38MAPK特异性抑制剂SB202190。以免疫细胞化学染色法鉴定体外培养猪卵巢颗粒细胞,通过CCK-8法检测其增殖活性,应用Annwxin V-FITC/PI及细胞周期试剂盒染色检测细胞凋亡及细胞周期状况,以实时定量PCR检测猪卵巢颗粒细胞中凋亡、周期相关基因的相对表达水平。结果表明,添加p38APK信号抑制剂SB202190可抑制体外培养猪卵巢颗粒细胞的增殖活性,20μmol/L处理组与其他组相比呈显著性差异(P<0.05);20μmol/L SB202190添加处理未显著影响颗粒细胞的凋亡水平,而该浓度SB202190可将大部分细胞阻滞在G1/G0期,与对照组相比差异显著(P<0.05);基因相对表达水平检测显示SB202190添加可抑制Fas、FasL、CDK-4的表达,而同时促进Bcl-2、Bax、P27的表达(P<0.05),对Caspase-3的表达没显著影响(P>0.05)。综上所述,SB202190通过调控猪卵巢颗粒细胞的周期来影响其增殖作用,但对其凋亡没有影响。
- 石美虹耿果霞贺亚媚程建勇李青旺
- 关键词：P38MAPK颗粒细胞细胞活力
- 熊果酸对猪精液冷冻保存效果的影响被引量：2
- 2022年
- 猪精子冷冻是长久保存珍贵家猪品种遗传物质的有效手段,然而因其细胞膜结构组成的特殊性,猪精子经过冷冻后活力大不如前。熊果酸是一种天然的、具有抗氧化作用羧酸类化合物,在其他多个领域已被报道具有优异的抗氧化功能。为研究熊果酸对长白公猪冷冻精液的作用,该试验在猪精子冷冻稀释液中分别添加不同浓度梯度(0、1.0、1.4、1.6、1.8和2.0 mg/mL)的熊果酸,并检测冷冻-解冻后猪精子的活力及其他相关参数。结果表明,当添加1.6 mg/mL熊果酸提取液时,与对照组相比较,精子活力(50.27%±3.24%)显著增加(P<0.05);同时STR和VAP数值明显提高(分别为54.95%±3.35%和36.53±3.28μm/s)(P<0.05),VCL也最高(59.63±3.11μm/s)(P<0.05)。每个处理组之间VSL、LIN、ALH值无显著性差异(P<0.05)。结果表明,1.6 mg/mL熊果酸的添加可以显著提高猪冷冻精子的各项质量参数。
- ERDENEBAYAR Ochirkhand刘定邦杨丽程建勇李青旺
- 关键词：熊果酸猪精子冷冻保存抗氧化剂
- WNT信号通路受体家族Frizzleds对猪卵母细胞体外成熟的影响
- Frizzled5在小卵泡(＜2mm)中的表达量明显低于中型卵泡(2mm≤d≤5mm)和大型卵泡(＞5mm)(p＜0.05)，而在中型卵泡和大型卵泡中的表达量没有明显的差异(p＞0.05)。免疫组化显色反应检测猪卵巢组织...
- 程建勇
- 关键词：卵母细胞体外成熟
- 文献传递
- Wortmannin抑制Wnt/β-Catenin通路对猪卵巢颗粒细胞发育的影响被引量：4
- 2019年
- 为探究PI3K通路与Wnt/β-Catenin通路在猪卵巢颗粒细胞发育中的互作关系以及调控功能,以不同浓度(DMSO,0.1,1,1.5,3,5μM)PI3K通路抑制剂Wortmannin处理体外培养猪卵巢颗粒细胞48h,CCK-8法检测猪卵巢颗粒细胞细胞活力,Western Blot法检测β-Catenin蛋白水平;5μMWortmannin处理体外培养猪卵巢颗粒细胞48h,实时定量PCR检测猪卵巢颗粒细胞内类固醇生成、激素受体和细胞凋亡相关基因的表达。结果表明,Wortmannin处理猪卵巢颗粒细胞可抑制颗粒细胞细胞增殖活力,其中3μM和5μMWortmannin,相对其他处理组,显著地(P<0.05)降低细胞增殖活力;对应的,不同浓度的Wortmannin也阻遏Wnt/β-Catenin通路,对比其他组,3μM和5μMWortmannin处理组抑制效果最显著(P<0.05);实时定量PCR检测结果表明,5μMWortmannin处理显著下调猪卵巢颗粒细胞CYP19A1(P<0.001)和CYP11A1(P<0.01)mRNA水平,抑制激素受体基因FSHR和LHCGR基因表达(P<0.05),促进Caspase3(P<0.05)和PTSG2(P<0.01)表达。综上所述,Wortmannin抑制猪卵巢颗粒细胞Wnt/β-Catenin通路,诱导细胞活力下降,促进细胞凋亡,并且阻碍激素受体表达和类固醇激素合成。
- 杨有福耿果霞陈华丽程建勇李青旺
- 关键词：WORTMANNINWNT/Β-CATENIN通路PI3K通路颗粒细胞
