王云艳
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 供职机构：南昌大学生命科学与食品工程学院更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 台兰ISSR-PCR反应体系的建立与优化被引量：2
- 2014年
- [目的]建立台兰稳定可靠的ISSR-PCR分子标记反应体系。[方法]用改良的CTAB法提取叶片的基因组DNA,并对影响台兰ISSR-PCR反应体系的主要成分进行筛选和优化。[结果]台兰的ISSR-PCR优化反应体系为：25μl PCR反应体积中,2.5μl 10×PCR buffer,2.0 mmol/L MgCl2,100 ng模板DNA,0.5 mmol/L dNTPs,0.22 U Taq DNA聚合酶,0.4μmol/L引物,15.78μl双蒸水。最佳扩增程序为：94℃预变性5 min,然后进行40个循环：94℃变性30 s,复性温度根据各引物的TM值略低1～2℃,30 s,72℃延伸50 s,循环结束后72℃延伸7 min。[结论]台兰ISSR-PCR优化反应体系为今后利用ISSR技术进行台兰种质资源的遗传多样性分析奠定了技术基础。
- 王朝雯王云艳肖春宏孙小琴杨柏云
- 关键词：ISSR分子标记ISSR-PCR反应体系
