沈娜
- 作品数：12 被引量：42H指数：4
- 供职机构：天津市第四中心医院更多>>
- 发文基金：天津市应用基础与前沿技术研究计划中西医结合科研计划课题天津市科技计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 不同方式诱导的树突状细胞-细胞因子诱导的杀伤细胞对荷结肠癌HT29细胞干细胞瘤裸鼠免疫治疗的研究被引量：1
- 2016年
- 目的比较不同方式诱导的树突状细胞联合细胞因子诱导的杀伤细胞(DC-CIK细胞)对荷结肠癌HT29细胞干细胞瘤裸鼠的免疫治疗效果及其安全性的研究。方法建立BALB/c裸鼠结肠癌干细胞模型,随机分为6组,每组3只裸鼠:空白对照组、DC-CIK组(D组)、HT29细胞干细胞全细胞裂解液-DC-CIK组(L-D组)、HT29细胞干细胞RNA-DCCIK组(R-D组)、DC-CIK联合化疗5-Fu组(F-D组)和化疗5-Fu组。其中D组、L-D组、R-D组和F-D组裸鼠在肿瘤干细胞接种4 d后通过尾静脉注射1×106个DC-CIK细胞给予治疗,每周2次,共3周;5-Fu组和F-D组在裸鼠给予DC-CIK治疗前1天通过尾静脉注射50 mg/kg剂量的5-Fu化疗药物,每周1次,共3周;空白对照组以等体积生理盐水代替。各组裸鼠在治疗3周期间每2天测量瘤体大小及裸鼠体重,治疗结束后处死裸鼠取出瘤体称重,绘制裸鼠生长曲线,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测蛋白磷酸化(AKt)信号通路中关键原癌基因c-Myc表达水平。结果各组治疗结束后,比较各组瘤体生长速率,L-D组
- 孙雯雯崔晓旭窦金霞乔丽葵沈娜高文远
- 关键词：C-MYC
- 结肠癌HT29细胞干细胞诱导的树突状细胞-细胞因子诱导的杀伤细胞对结肠癌干细胞的体外杀伤实验研究被引量：1
- 2015年
- 目的研究结肠癌干细胞(CSC)经RNA转染或全细胞裂解诱导树突状(DC)细胞,与细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)共培养,对结肠癌HT29细胞及其CSC的杀伤作用,为结肠癌的治疗提供依据。方法提取健康人单个核细胞,培养DC和CIK细胞,用结肠癌HT29细胞干细胞的RNA转染或全细胞裂解诱导DC细胞,然后与CIK细胞共培养,形成CSC-RNA-DC-CIK、CSC-裂解物-DC-CIK以及HT29细胞RNA-DC-CIK、HT29细胞裂解物-DC-CIK,用LHD法检测其对HT29细胞及其干细胞的杀伤效果。用SPSS 18.0统计软件进行方差分析。结果 CSC-RNA-DC-CIK组、CSC-裂解物-DC-CIK组、HT29-RNA-DC-CIK组和HT29-裂解物-DC-CIK组的CIK免疫表型(CD3、CD8、CD56)和DC免疫表型(CD40、CD80、CD86、HLA-DR)成熟表达率均明显高于CIK组和DC-CIK组,差异均有统计学意义(P<0.05)。但CSCRNA-DC-CIK组、CSC-裂解物-DC-CIK组、HT29-RNA-DC-CIK组和HT29-裂解物-DC-CIK组之间,差异无统计学意义(P>0.05)。随着效靶比的增加,CIK、DC-CIK、CSC-RNA-DC-CIK、CSC-裂解物-DC-CIK、HT29-RNA-DC-CIK和HT29-裂解物-DC-CIK作为效应细胞对HT29细胞及其干细胞的杀伤作用也逐渐增强,各效靶比中,CSC-RNA-DC-CIK组、CSC-裂解物-DC-CIK组、HT29-RNA-DC-CIK组和HT29-裂解物-DC-CIK组的杀伤率高于CIK组和DC-CIK组,差异均有统计学意义(P<0.05);DC-CIK组高于CIK组,差异有统计学意义(P<0.05);但CSC-RNA-DC-CIK组、CSC-裂解物-DCCIK组、HT29-RNA-DC-CIK组和HT29-裂解物-DC-CIK组之间,差异无统计学意义(P>0.05)。结论利用CSC经RNA转染或全细胞裂解诱导DC细胞,与CIK细胞共培养,强于常规DC-CIK细胞对结肠癌HT29细胞及其CSC的杀伤作用,为今后的肿瘤患者提供了新免疫治疗的方法。
- 孙雯雯沈娜窦金霞刘子艳金健梁佩芬乔丽葵高文远
- 关键词：结肠癌干细胞树突状细胞
- CDK5介导的PPARγ磷酸化在动脉粥样硬化泡沫细胞形成过程中的作用被引量：2
- 2019年
- 目的探讨细胞周期素依赖蛋白激酶5(CDK5)介导的过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)磷酸化在动脉粥样硬化中的作用。方法常规培养小鼠Raw264.7巨噬细胞,实验设对照组(C组)、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)组(O组,50mg/Lox-LDL)、Roscovitine+ox-LDL组(R组,15μmol/LRoscovitine+50mg/Lox-LDL)。待细胞融合至70%左右,R组加入15μmol/LRoscovitine预处理30min,之后O组和R组分别加入50mg/Lox-LDL继续培养24h,使其转化为泡沫细胞;C组不作处理。利用Westernblot检测各组pPPARγ、tPPARγ、p35和CDK5蛋白表达的变化,油红O染色和异丙醇萃取实验分析各组细胞内脂质聚积情况,酶法测定细胞内胆固醇含量,反转录PCR(RT-PCR)检测各组ox-LDL摄取相关基因CD36、SR-A1和胆固醇外流相关基因ABCA1、ABCG1的mRNA表达水平。结果ox-LDL诱导后,O组pPPARγ/tPPARγ比值、p35/CDK5比值、细胞内脂质聚积、总胆固醇含量、游离胆固醇含量、胆固醇酯/总胆固醇比值均较C组明显升高(P<0.05);CDK5抑制剂干预后,R组上述指标均较O组降低(P<0.05)。RTPCR结果显示,ox-LDL诱导后,O组ox-LDL摄取相关基因CD36、SR-A1的mRNA表达水平升高,而胆固醇外流相关基因ABCA1、ABCG1的mRNA表达水平降低(P<0.05);CDK5抑制剂干预后,上述指标变化与O组呈相反趋势(P<0.05)。结论CDK5/pPPARγ途径参与动脉粥样硬化泡沫细胞的形成。
- 沈娜沈娜贺晶刘勇刘勇田凤石
- 关键词：动脉粥样硬化泡沫细胞ABCG1
- 铁元素在抗铜绿假单胞菌生物膜感染中应用进展
- 2023年
- 铜绿假单胞菌生物膜形成是使其具有更强的适应生存环境的能力,也是导致耐药性增加及感染难以根除的重要原因之一。铜绿假单胞菌高效的铁摄取能力赋予其多样的生存适应表现,被认为是其毒力标志之一。铁元素是参与铜绿假单胞菌黏附、微菌落形成和生物膜成熟的重要信号分子,通过破坏铁稳态来干预铜绿假单胞菌生物膜发育成熟进程是临床抗铜绿假单胞菌生物膜感染的新策略。该文仅就铁元素在铜绿假单胞菌生物膜发生发展及抗生物膜感染的新进展做一综述,为临床治疗铜绿假单胞菌感染提供新思路。
- 崔亚斌沈娜苏卫东
- 关键词：铁铜绿假单胞菌生物膜细菌感染
- ox-LDL诱导的Raw264.7细胞炎症因子表达变化及PPARγSer273磷酸化调控作用观察被引量：1
- 2020年
- 目的观察氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的小鼠单核巨噬细胞白血病细胞株Raw264.7炎症因子的表达变化及PPARγSer273磷酸化的调控作用,探讨PPARγSer273磷酸化在动脉粥样硬化(AS)中的作用。方法取Raw264.7细胞并分为ox-LDL组和对照组,ox-LDL组以50 mg/L ox-LDL诱导,对照组不予处理,采用ELISA法检测两组细胞培养液中的TNF-α、IL-1β,Western blot法检测细胞中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)和PPARγSer273磷酸化蛋白,计算PPARγSer273磷酸化与PPARγ蛋白相对表达量的比值。取缺陷型Raw264.7细胞并分为4组,S273A+ox-LDL组细胞经PPARγSer273突变型质粒转染,并以50 mg/L ox-LDL诱导;S273A组细胞经PPARγSer273突变型质粒转染,但不予50 mg/L ox-LDL诱导;WT+ox-LDL组经PPARγ野生型质粒转染,并以50 mg/L ox-LDL诱导;WT组经PPARγ野生型质粒转染,但不予50 mg/L ox-LDL诱导;采用ELISA法检测细胞培养液中TNF-α和IL-1β分泌量,实时荧光定量PCR法检测细胞中TNF-α和IL-1βmRNA。结果ox-LDL组和对照组TNF-α的分泌量分别为229.43±10.92、186.85±16.12,IL-1β分泌量分别为69.68±6.87、54.80±3.27,PPARγSer273磷酸化与PPARγ蛋白相对表达量的比值为0.67±0.06、0.55±0.01,两组比较,P均<0.05。S273A+ox-LDL组、S273A组、WT+ox-LDL组、WT组TNF-α分泌量分别为333.05±41.44、251.47±24.73、445.68±31.63、373.64±37.59,TNF-αmRNA相对表达量分别为1.35±0.28、0.63±0.12、2.37±0.21、1.00±0.00,IL-1β分泌量分别为83.25±4.74、67.56±6.14、110.73±10.01、94.47±7.48,IL-1βmRNA相对表达量分别为1.18±0.09、0.67±0.13、1.55±0.15、1.00±0.00,S273A+ox-LDL组与WT+ox-LDL组比较,S273A组与WT组比较,P均<0.05。结论PPARγSer273磷酸化通过促进ox-LDL诱导的Raw264.7细胞炎症因子TNF-α和IL-1β的分泌和表达,促进了AS进程。
- 沈娜方涛苏卫东刘勇李焕明
- 关键词：RAW264.7细胞
- miR-137调节AKT2对内皮细胞增殖与凋亡的影响被引量：2
- 2019年
- 目的探讨miR-137对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖、凋亡的影响及机制.方法将HUVECs细胞分为低糖组(用5.5 mmol/L的葡萄糖处理)、高糖组(用33.36 mmol/L的葡萄糖处理)、anti-NC(转染anti-NC后用33.36 mmol/L葡萄糖处理细胞)和anti-miR-137组(转染miR-137 inhibitor后用33.36 mmol/L萄糖处理细胞后),48 h后用qRT-PCR检测细胞miR-137表达;分别用CCK-8法及流式细胞术检测细胞的增殖和凋亡率.通过双荧光报告基因检测系统及过表达或抑制miR-137表达后AKT2蛋白表达验证miR-137与AKT2的靶向关系.结果高糖可明显上调HUVECs细胞miR-137 mRNA的表达,细胞转染miR-137 inhibitor后miR-137表达明显减弱(P<0.05).高糖可明显抑制HUVECs细胞增殖,诱导细胞凋亡,而抑制miR-137表达可减弱高糖对HUVECs细胞增殖抑制和凋亡促进作用(P<0.05).抑制AKT2表达可减弱miR-137 inhibitor对HUVECs细胞增殖促进和凋亡抑制作用(P<0.05).结论抑制miR-137基因表达可减弱高糖诱导的HUVECs增殖抑制和凋亡促进作用,其机制与激活AKT2表达有关.
- 徐泽民刘勇沈娜方涛田凤石
- 关键词：血管内皮细胞高糖凋亡
- 自然杀伤细胞和自然杀伤T细胞对结肠癌HT29细胞干细胞的体外杀伤实验研究被引量：4
- 2015年
- 目的研究自然杀伤细胞(NK细胞)和自然杀伤T细胞(NKT细胞)对结肠癌HT29细胞干细胞的体外杀伤作用,为结肠癌的治疗提供依据。方法培养NK和NKT细胞,检测该细胞的细胞表型(包括CD3-、CD3+、CD56+、CD16+和CD336+的比例),并检测该细胞分泌的细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)和γ-干扰素(IFN-γ)以及分泌的穿孔素和颗粒酶的量及该细胞对HT29细胞及其干细胞的杀伤效果。用SPSS 13.0统计软件对数据进行处理。结果 NK和NKT细胞中的CD3-、CD3+、CD56+、CD16+和CD336+的比例分别为65.60%±5.56%、34.40%±3.54%、97.96%±4.57%、46.64%±3.03%和24.03%±2.34%,分泌TNF-α、IFN-γ、穿孔素和颗粒酶含量分别为(1 194.25±46.7)pg、(202.51±26.1)ng、(92.57±20.1)pg和(856.72±54.6)ng。NK和NKT细胞作为效应细胞,效靶比为10∶1、20∶1、40∶1、80∶1,对结肠癌HT29细胞及其干细胞的杀伤率分别为36.37%±3.45%、44.86%±4.97%、56.65%±5.31%、62.57%±5.89%和24.33%±2.03%、31.78%±3.11%、40.41%±3.54%、49.51%±4.31%。结论培养NK和NKT细胞是切实可行、有效的简单方法,为肿瘤患者的免疫治疗提供了一种新方法。
- 孙雯雯沈娜窦金霞刘子艳梁佩芬高文远
- 关键词：自然杀伤细胞自然杀伤T细胞体外杀伤作用
- 一种肥胖人用自由加宽床体
- 本实用新型属于家居领域，公开了一种肥胖人用自由加宽床体，包括第一床体，第一床体的内部套装有第二床体，第二床体的内部套装有第三床体；第二床体的下表面通过螺栓固定安装有与第一床体相匹配的液压杆，第三床体的末端通过螺栓固定安装...
- 王珅李真方涛崔晓旭沈娜范金爽
- 文献传递
- 小檗碱抑制内质网应激炎症通路对2型糖尿病大鼠局部脑缺血再灌注损伤的探讨被引量：9
- 2020年
- 目的观察小檗碱(BBR)对2型糖尿病大鼠局部脑缺血再灌注损伤半影区内质网应激相关炎症通路的影响。方法72只健康雄性Sprague-Dawley大鼠,采用高脂饮食和链尿佐菌素注射建立2型糖尿病大鼠模型,数字抽签随机将糖尿病大鼠分为假手术组(Sham组)、糖尿病大鼠+BBR治疗组(BBR组)、糖尿病大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型组(MCAO组)、糖尿病大鼠MCAO+BBR治疗组(MCAO+BBR组),纳入研究每组6只。治疗组在术前48 h、24 h和术后6 h经胃灌注给予相应剂量药物。采用线拴法制备大鼠MCAO模型,进行神经缺损评分,酶联免疫吸附法(ELISA)检测肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-1β的表达;实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测内质网应激标志蛋白葡萄糖调控蛋白78(GRP78)的mRNA表达;蛋白质印迹法(Western blot)检测内质网应激相关炎症通路蛋白GRP78、胰腺内质网激酶(PERK)、磷酸化PERK(p-PERK)、核因子(NF)-κB p65表达情况。结果在脑缺血半影区,缺血2 h再灌注24 h后,MCAO组大鼠神经功能缺损评分(2.83±0.41)分,高于MCAO+BBR组大鼠(1.67±0.52)分(P<0.05),促炎因子TNF-α和IL-1β和内质网应激相关炎症通路蛋白GRP78、PERK和NF-κB p65的表达水平亦增高(P<0.05)。BBR治疗亦可降低脑缺血再灌注半影区促炎因子(TNF-α和IL-1β)和内质网应激相关炎症通路蛋白(GRP78、PERK和NF-κB p65)的表达水平。结论BBR可通过抑制内质网应激相关炎症通路降低2型糖尿病大鼠局部脑缺血再灌注损伤的炎症反应,发挥神经保护作用。
- 刘冲杨旭沈娜邸研博刘璇陈强何峰李焕明
- 关键词：小檗碱炎症脑缺血
- 槐耳联合DC-CIK对荷结肠癌HT29干细胞瘤裸鼠的体内杀伤实验研究被引量：6
- 2018年
- 为了比较不同治疗方法对荷结肠癌HT29细胞干细胞瘤裸鼠的治疗效果。建立了Bal B/C裸鼠结肠癌干细胞模型,随机分为以下4组,每组8只裸鼠：空白对照组、DC-CIK组、槐耳组、槐耳联合DC-CIK组（联合治疗组）。其中DC-CIK组、联合治疗组裸鼠在肿瘤干细胞接种4 d后通过尾静脉注射1×10^6个DC-CIK细胞给予治疗,每周2次共3周;槐耳组和联合治疗组,按每60 kg体质量20 g给药,每天1次灌胃0.2 mL,共3周;对照组以等体积生理盐水代替。各组裸鼠在治疗3周期间每2d测量瘤体大小及裸鼠体重,治疗结束后处死裸鼠取出瘤体称重,观察对荷结肠癌HT29干细胞裸鼠的治疗后影响,RT-PCR法检测信号通路关键基因的表达水平。各组治疗结束后,槐耳组、DC-CIK组、联合治疗组荷结肠癌HT29干细胞裸鼠的瘤质量明显低于对照组,联合治疗组又明显低于槐耳组和DC-CIK组,其中,联合治疗组抑瘤率可达46.77%。在信号通路关键基因的表达水平变化方面,联合治疗组与DC-CIK组、槐耳组相比,PI3K/Akt通路中关键基因PI3KR1和Akt,Wnt/β-catenin通路中关键基因Wnt1,CTTNB1,Notch通路中关键基因Notch1,Notch2,Notch3的mRNA表达均有所下调。不同治疗方法对结肠癌HT29细胞干细胞瘤裸鼠治疗效果中,槐耳联合DC-CIK组效果最佳,为临床治疗结肠癌提供了新思路。
- 孙雯雯窦金霞张琳乔丽葵沈娜高文远
- 关键词：DC-CIK槐耳
