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玉米赤霉烯酮对小鼠B淋巴细胞体外活化增殖及分化的影响被引量：2: 2020年; 为了探究玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEA)对离体B淋巴细胞活化、增殖及分化的影响,试验以BALB/c小鼠脾脏B淋巴细胞为材料,分设细胞空白对照组(Control)、脂多糖对照组(LPS 5?g/m L)、不同浓度ZEA染毒组(LPS+10、20或30?mol/L ZEA),CCK-8法检测24 h时细胞相对活性,流式细胞术分别检测6 h、72 h时淋巴细胞活化标识分子CD69、CD71的表达量,以及72 h时浆细胞表面标识分子CD138的表达量,CFSE法检测B淋巴细胞的增殖情况。结果显示,ZEA在终浓度10、20、30?mol/L下均可显著或极显著地降低LPS诱导的B细胞相对活性,并导致细胞表面标识分子CD69、CD71、CD138的表达量下降(P<0.05或P<0.01)。此外,ZEA还可抑制B细胞的增殖,且呈剂量效应关系。结论认为,玉米赤霉烯酮可直接通过抑制小鼠B淋巴细胞的活化、增殖、分化,影响体液免疫的进程,从而对动物机体产生免疫抑制作用。; 刘双双史嘉缤李茜蔡国栋邹辉顾建红袁燕刘学忠刘宗平卞建春; 关键词：玉米赤霉烯酮 B淋巴细胞细胞活化细胞分化细胞增殖

ZEA与DON联合染毒对CTLL-2细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Caspase3等表达的影响被引量：3: 2017年; 为了探讨玉米赤霉烯酮(ZEA)与脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)联合作用对免疫系统毒性影响及其毒理机制,试验以T淋巴细胞株(CTLL-2)为材料,在利用CCK-8试验确定ZEA、DON对CTLL-2细胞联合染毒浓度的基础上,研究了ZEA与DON联合染毒对CTLL-2细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Caspase-3等表达的影响,试验设对照组、ZEA染毒组(5μg/m L ZEA)、DON染毒组(0.5μg/m L DON)、ZEA+DON联合染毒组(5μg/m L ZEA+0.5μg/m L DON),染毒时间为48 h,用流式细胞术检测细胞的凋亡率,Western-blot检测Bax、Bcl-2和Caspase级联反应相关蛋白的表达情况。结果表明:与对照组相比,各染毒组CTLL-2细胞的凋亡率均极显著升高(P<0.01);各染毒组细胞凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2比值和Cleaved Cspase-3、Cleaved Caspase-8、Cleaved Caspase-9等蛋白的表达量均较对照组显著升高(P<0.05或P<0.01);联合染毒组呈现协同效应。说明ZEA与DON联合染毒在诱导免疫细胞凋亡方面发挥协同效应,它们共同存在可以发挥更强的免疫抑制效应;ZEA与DON联合染毒诱导CTLL-2细胞发生凋亡的机制与Bax/Bcl-2上调的线粒体通路密切相关。; 王冰洁潘顺叶李茜岑雪邹辉顾建红袁燕刘学忠刘宗平卞建春; 关键词：联合染毒 CCK-8 凋亡

脱氧雪腐镰刀菌烯醇诱导CTLL-2细胞凋亡的信号途径研究被引量：3: 2016年; 为探讨脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)对动物免疫功能的影响及其机理,以细胞毒性T淋巴细胞株CTLL-2为材料,用不同浓度的DON(0、0.5、1、2μg/m L)处理CTLL-2细胞48h,流式细胞术检测细胞的凋亡率,免疫印记法检测细胞凋亡相关通路蛋白CleavedCaspase 9、Cleaved-Caspase 3、Fas L、Fas、Cleaved-Caspase8等表达情况;并用流式细胞术检测了DON(1μg/m L)与Fas L中和抗体(10μg/m L)共处理后细胞的凋亡率。结果表明,随着DON浓度的升高,CTLL-2细胞的凋亡率呈上升趋势,染毒组均较对照组有极显著差异(P<0.01);Bax/Bcl-2的比值升高,呈剂量-效应关系;DON促进细胞色素c(Cyt-c)从线粒体中释放到胞浆中,能够上调Cleaved-Caspase 9、Cleaved-Caspase 3的表达,染毒组均较对照组有显著性或极显著差异(P<0.05或P<0.01);Fas L、Fas、Cleaved-Caspase 8蛋白表达量随着DON浓度的升高逐渐增加,染毒组均较对照组有显著性或极显著差异(P<0.05或P<0.01);随着DON浓度的升高,p38 MAPK、JNK、Erk的磷酸化水平也升高,呈剂量-效应关系;与DON处理组相比,Fas L中和抗体与DON共同处理组细胞凋亡率明显下降(P<0.01)。结果表明,DON可以诱导CTLL-2细胞发生凋亡,激活CTLL-2细胞线粒体通路、MAPKs通路,DON通过死亡受体途径诱导CTLL-2细胞凋亡,影响动物的免疫机能。; 李茜岑雪潘顺叶王冰洁王凤丽邹辉袁燕顾建红刘学忠刘宗平卞建春; 关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇免疫功能凋亡通路

玉米赤霉烯酮对小鼠原代培养T淋巴细胞细胞因子分泌的影响被引量：1: 2019年; 为探讨玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEA)对动物免疫功能的影响及其机理,试验以分离培养的原代小鼠脾脏淋巴细胞材料,研究了ZEA对T淋巴细胞细胞因子分泌的影响。以刀豆蛋白A(Con A,5 mg/L)作为T细胞活化特异性刺激剂,试验设空白对照组(不加Con A)、Con A组(5 mg/L Con A)、不同浓度的ZEA染毒组(Con A+ZEA 10、20和40μmol/L),处理48,72 h后,使用流式液相多重蛋白定量技术检测T细胞分泌IL-2、IL-3、IL-5、IL-6和GM-CSF等细胞因子的含量。结果显示,与空白对照组相比,Con A组细胞在48,72 h时间段5种细胞因子分泌均明显上升;与Con A组比较,染毒48,72 h后,10,20,40μmol/L ZEA染毒组各细胞因子分泌浓度均有极显著下降(P<0.01),并呈剂量-效应关系。结果表明,ZEA可以抑制T淋巴细胞细胞因子IL-2、IL-3、IL-5、IL-6和GM-CSF的分泌,从而影响机体正常免疫反应的进行,降低整体的免疫功能。; 李茜蔡国栋蔡国栋邹辉邹辉袁燕顾建红刘学忠刘宗平; 关键词：玉米赤霉烯酮 T淋巴细胞刀豆蛋白A 细胞因子

玉米赤霉烯酮诱导CTLL-2细胞凋亡途径的研究被引量：4: 2016年; 为探讨玉米赤霉烯酮(ZEA)对免疫细胞凋亡途径的影响,以细胞毒性T淋巴细胞株(C TLL-2)为材料,用不同浓度的ZEA(0、0.8、3.2、12.8、25.6 g/mL)处理CTLL-2细胞48 h,流式细胞术检测细胞的凋亡率,Western-blot检测Fasl、Fas、Cleaved-Caspase 9、Cleaved-Caspase 3、Bcl-2和Bax等蛋白的表达情况。结果显示,随着ZEA浓度的增加,CTLL-2细胞的凋亡率呈上升趋势,3.2 g/mL ZEA以上染毒组均较对照组有极显著差异(P<0.01);Bax蛋白的表达呈上升趋势,而Bcl-2蛋白的表达量呈下调趋势,Bax/Bcl-2的比值升高且呈剂量效应关系;Caspase 3蛋白表达量呈下调趋势,3.2 g/mL ZEA以上染毒组均较对照组有极显著差异(P<0.01);各染毒组Cleaved-Caspase 3、Cleaved-Caspase 9、Fasl和Fas蛋白表达量均较对照组极显著升高(P<0.01)。结果表明,玉米赤霉烯酮可以通过线粒体途径和死亡受体途径诱导CTLL-2细胞凋亡,影响动物的免疫机能。; 潘顺叶王光光范文桐李茜岑雪顾建红袁燕刘学忠刘宗平卞建春; 关键词：玉米赤霉烯酮免疫功能凋亡线粒体途径死亡受体途径

线粒体凋亡途径在玉米赤霉烯酮致大鼠睾丸支持细胞凋亡中的作用被引量：3: 2019年; 为探讨玉米赤霉烯酮(zearalenon,ZEA)雄性生殖毒性作用机理,研究ZEA诱导大鼠睾丸支持细胞(sertoli cell,SC)的凋亡途径,试验选取大鼠原代SC为研究材料,用不同浓度ZEA(0、5、10、20μmol/L)处理SC 24 h后,采用实时荧光定量PCR法检测Bax和Bcl-2 mRNA表达水平;用Western blotting法检测Bax、Bcl-2等线粒体凋亡途径相关蛋白表达;同时检测了20μmol/L ZEA联合Caspase-8抑制剂(Z-IETD-FMK)处理对SC凋亡率和线粒体凋亡相关蛋白的影响。结果显示,与对照组相比,20μmol/L ZEA组细胞Bcl-2转录水平显著下降(P<0.05),Bax转录水平显著上升(P<0.05);10、20μmol/L ZEA组Bax/Bcl-2比值及Cyto-CytC、Cleaved Caspase-9、Cleaved Caspase-3表达量极显著上升(P<0.01),而Mito-CytC表达量极显著下降(P<0.01);与ZEA组相比,ZEA与Z-IETD-FMK联合处理可使ZEA诱导的SC凋亡率极显著下降(P<0.01),tBid/Bid、Bax/Bcl-2、Cyto-CytC、Cleaved-Caspase3、Cleaved-Caspase9蛋白表达显著或极显著下降(P<0.05;P<0.01),而Mito-CytC表达量极显著上升(P<0.01)。综合试验结果,ZEA能够通过线粒体途径诱导大鼠SC发生凋亡。; 朱启航司梦雪李茜刘双双邹辉顾建红袁燕刘学忠刘宗平卞建春; 关键词：线粒体凋亡途径

玉米赤霉烯酮致大鼠睾丸支持细胞DNA损伤的研究被引量：1: 2018年; 以大鼠原代睾丸支持细胞为材料，用0（对照组）、5、10、20μmol／L的玉米赤霉烯酮（ZEA）进行染毒。24h后，通过彗星试验观、免疫荧光试验、Western—blot等方法检测ZEA对细胞DNA及相关蛋白表达的影响。结果显示，随着ZEA浓度的增加，DNA彗星样拖尾现象逐渐明显，与对照组比较，10μmol／L和20μmol／LZEA剂量组的细胞的彗星拖尾尾长、尾部DNA含量比例和尾矩均有极显著差异（P〈0．01）；10μmol／L和20μmol／LZEA剂量组γ—H2AX焦点数量均较对照组有极显著差异（P〈0．01）；各染毒组γ-H2AX、P53、P21等蛋白的表达水平均较对照组有显著或极显著差异（P〈0．05或P〈0．01）。结果表明。ZEA能致大鼠睾丸支持细胞DNA损伤。这一过程能激活P—ATM—P53-P21信号通路，促使细胞发生生长阻滞并抑制其增殖。; 张大委高雪梅蔡沛蓉王冰洁冯楠楠王玲李茜邹辉顾建红袁燕刘学忠刘宗平卞建春; 关键词：玉米赤霉烯酮睾丸支持细胞 DNA损伤彗星试验

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李茜

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