周思榆
- 作品数:1 被引量:2H指数:1
- 供职机构:武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- H5N1亚型禽流感病毒神经氨酸酶的表达及抗体制备被引量:2
- 2007年
- 以禽流感病毒A/chicken/Hubei/489/2004(H5N1)NA基因全长cDNA克隆pMD-NA为模板,PCR扩增第406位至第1 353位基因片段.克隆到pET-28a表达载体,构建重组质粒pET-28/ΔNA,转化大肠杆菌,用异丙基β硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达,SDS-PAGE和Western blot分析证实,截短的NA重组蛋白获得高效表达.采用SDS-PAGE纯化重组蛋白,免疫家兔,制备特异性神经氨酸酶(NA)抗体.ELISA及间接免疫荧光检测结果显示,该抗体效价在1∶1×105以上,能与在大肠杆菌和Vero细胞中表达的NA蛋白产生特异性反应.纯化的NA重组蛋白可用作建立禽流感检测方法的诊断抗原,所制备NA抗体可用于检测禽流感基因工程疫苗中的NA抗原组分.
- 杨振华陶攀周思榆吴叔文潘兹书
- 关键词:禽流感病毒H5N1亚型神经氨酸酶抗体