何丽
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院卫生学环境医学研究所天津市环境与食品安全风险监控技术重点实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技支撑计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 水中肠道食源性病毒的多重RT-PCR检测法被引量：2
- 2012年
- 目的建立能同时检测水环境中肠道病毒(Enterovirus,EVs)、诺如病毒GⅡ(Norovorus,Nov GⅡ)、轮状病毒(Rotavirus,RVs)、腺病毒(Adenovirus,AdVs)的多重RT-PCR检测方法。方法根据GenBank收录的肠道食源性病毒核酸序列,利用软件DNAMAN设计肠道病毒通用引物以及Nov GⅡ、RVs、AdVs的特异性引物;将这4对引物置于同一体系中进行多重RT-PCR,利用各种肠道食源性病毒的核酸模板检测其特异性并通过不同滴度[100～107pfu(copies)/ml]病毒测试其灵敏度;利用加标实验验证该方法的准确性;通过对5份河水或某水厂出水大体积水样(50 L)进行病毒富集与检测,以确定该方法的实用性,同时,采用传统细胞培养法验证其结果。结果该方法对目的病毒均获得了理想的电泳条带,而对其他病毒无非特异扩增;对EVs、AdVs的最低检出滴度均为10 pfu/ml,Nov GⅡ-4为10 copies/ml,对RVs的最低检出滴度为102pfu/ml;加标实验检测结果准确率为100%;对5份河水或某水厂出水大体积水样进行病毒富集与检测,对以上各种病毒均有检出且与细胞培养结果一致。结论该方法不仅特异性强、灵敏度高、简便快捷,而且准确率高,实际应用性强,适用于水中肠道食源性病毒的快速检测。
- 郭旋李君文王新为何丽邱志刚谌志强陈照立金敏
- 关键词：诺如病毒轮状病毒腺病毒
- 常见食源性致病菌PCR快速检测技术建立被引量：3
- 2014年
- 目的验证常见食源性致病菌聚合酶链式反应（PCR）检测方法特异性,并建立相应的快速简便PCR检测新体系。方法利用166株实验菌株验证4种常见食源性致病菌PCR检测方法的特异性;同时,针对副溶血性弧菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特菌的toxR、fimY、nuc、hly基因序列设计特异引物,通过统一PCR反应条件和缩短反应时间,实现对4种常见食源性致病菌的快速检测。结果 4种常见食源性致病菌PCR检测方法存在一定问题,不仅相关引物特异性差,而且操作繁琐、反应参数不统一、细菌总体检测周期长;而新建立的相应PCR检测体系具有良好的特异性和灵敏度,不仅能特异性扩增出目的片段,而且特异性达100%,其他干扰菌株均不能获得阳性结果,对致病菌DNA的检测限值为6pg;用该方法对人工污染食品样品进行检测,准确率为100%;完成检测的时间在3~4h以内。结论成功建立常见食源性致病菌的PCR快速检测技术,操作步骤简单、检测时间短,特异性强、灵敏度高。
- 何丽王新为叶桂煊王宇谌志强邱志刚陈照立李秀梅李君文金敏
- 关键词：食源性致病菌
- 水中肠道病毒三种富集方法的效果比较被引量：1
- 2013年
- 目的探讨一种效果较好的水中病毒富集方法,为水中病毒的检测提供依据。方法向高压灭菌处理的水样中接种已知滴度的脊髓灰质炎Ⅰ型病毒,采用载阳电荷滤料法、膜吸附-洗脱法Ⅰ、膜吸附-洗脱法Ⅱ对水样分别进行病毒富集后,利用荧光定量RT-PCR技术检测并计算回收率。结果当水中病毒载量为7×102～7×105pfu/L时,载阳电荷滤料法的病毒回收率为92%～94%;2种膜吸附-洗脱法的回收率为72%～77%。结论载阳电荷滤料法富集水中病毒的效果好于2种膜吸附-洗脱法。
- 何丽王新为王永广陈照立邱志刚谌志强金敏
- 关键词：肠道病毒实时荧光定量PCR
