任李玥
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 供职机构：云南中医学院中药学院更多>>
- 发文基金：云南省自然科学基金更多>>
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- 胡黄连SRAP反应体系的建立与引物筛选
- 2011年
- 目的:建立胡黄连SRAP的反应体系,并筛选出适合胡黄连的引物组合,为胡黄连的遗传多样性研究奠定基础。方法:采用5因素(dNTP、Mg2+、Taq酶、引物、DNA)4水平正交试验一步法建立SRAP-PCR的反应体系,采用梯度温度法筛选PCR反应程序的最佳退火温度,对已发表的SRAP引物组合进行了筛选。结果:胡黄连SRAP-PCR的最佳反应体系,即20μL反应体系:10×buffer 2μL,dNTP 150μmol.L-1,Mg2+3mmol.L-1,Taq酶2U,引物为0.5μmol.L-1,DNA为20ng,DMSO 1μL;最适的退火温度是30.0℃～33.2℃;最适的引物组合为Me1Em1,Me1Em2,Me1Em3,Me3Em3,Me1Em4,Me2Em4,Me3Em4,Me4Em4,Me1Em5,Me3Em5,Me4Em5,Me3Em6,Me4Em6。结论:该体系是适合胡黄连SRAP-PCR反应的最适宜体系,为今后胡黄连遗传多样性研究奠定了基础。
- 任李玥刘小莉
- 关键词：胡黄连SRAP引物筛选
