李巧明
- 作品数：1 被引量：9H指数：1
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- 濒危植物望天树SSR-PCR反应体系的优化被引量：9
- 2011年
- 为探索适宜望天树(Parashorea chinensis)的SSR-PCR反应体系,利用L16(45)正交试验设计,对SSR-PCR反应体系中的5个反应组分(dNTPs、引物、DNA模板、Mg2+、Taq DNA聚合酶)进行优化.结果显示,各因素水平的变化对望天树SSR-PCR反应的影响由大到小依次为:模板DNA>dNTPs>引物>Mg2+>TaqDNA聚合酶.最终建立了适合望天树SSR-PCR分析的最佳反应体系:在25μL反应体系中,10×buffer(Mg2+Free)2.5μL,模板DNA 30 ng,dNTPs 20 mmoL/L,引物13μmoL/L,Mg2+50 mmoL/L,Taq DNA聚合酶0.5 U.利用该优化体系,采用3对不同引物对12份分布于不同地区的望天树材料进行了检验,证明此反应体系具有较好的稳定性和可重复性.
- 张美玲李巧明
- 关键词：望天树SSR正交设计PCR反应
