叶文蔚
- 作品数：8 被引量：31H指数：2
- 供职机构：台州市立医院更多>>
- 发文基金：台州市科技计划项目浙江省医药卫生科学研究基金浙江省医学会临床科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 苦杏仁苷调控PI3K/Akt/mTOR通路对子宫内膜癌细胞增殖、侵袭及凋亡的影响被引量：9
- 2020年
- 目的研究苦杏仁苷对子宫内膜癌细胞RL95-2及HEC-1B增殖、侵袭及凋亡的影响。方法使用8、16、32、64和128mg/L浓度苦杏仁苷处理RL95-2、HEC-1B细胞24、48和72h后,采用CCK-8法检测各组细胞增殖能力并计算苦杏仁苷的半数抑制浓度(IC50);Transwell试验检测苦杏仁苷对细胞侵袭能力的影响;流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况;Western blot试验检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白以及PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达情况。结果苦杏仁苷呈浓度及时间依赖性抑制子宫内膜癌RL95-2、HEC-1B细胞生长活性,48h时半数抑制浓度(IC50)约为40mg/L;苦杏仁苷能抑制RL95-2、HEC-1B细胞穿膜细胞数[(227.67±11.06)个比(459.33±24.75)个,(188.67±11.14)个比(412.33±14)个,P均<0.01];经苦杏仁苷处理后RL95-2、HEC-1B细胞凋亡率升高[(7.85±0.71)%比(1.49±0.08)%、(8.55±0.69)%比(1.61±0.13)%,P均<0.01],凋亡蛋白Bcl-2表达下降[(0.19±0.03)比(0.36±0.04)、(0.25±0.04)比(0.39±0.05),P均<0.01],Bax表达升高[(0.37±0.06)比(0.18±0.04)、(0.41±0.06)比(0.21±0.03),P均<0.01];苦杏仁苷能显著下调RL95-2、HEC-1B细胞的PI3K[(0.42±0.04)比(0.78±0.05)、(0.36±0.05)比(0.63±0.03),P均<0.01]、Akt[(0.73±0.05)比(0.92±0.05)、(0.65±0.03)比(0.86±0.04),P均<0.01]及mTOR[(0.25±0.04)比(0.93±0.06)、(0.34±0.05)比(0.88±0.04),P均<0.01]磷酸化水平,抑制PI3K/Akt/mTOR通路活化。结论苦杏仁苷通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路活化,促进子宫内膜癌RL95-2、HEC-1B细胞凋亡,降低其增殖活性,抑制细胞侵袭功能,从而发挥抗肿瘤作用。
- 叶文蔚潘丹杨晶金吴静怡蔡仙丽
- 关键词：苦杏仁苷子宫内膜癌
- 雷帕霉素诱导鼻咽癌CNE-1细胞自噬及其机制研究
- 2020年
- 目的探讨雷帕霉素在诱导人鼻咽癌CNE-1细胞发生自噬过程中的作用及在此过程中FIP200基因的表达变化情况。方法应用CCK-8法检测不同浓度雷帕霉素处理CNE-1细胞4、12、24、48小时后对细胞增殖能力的影响;在激光共聚焦显微镜下观察自噬小体形成过程中LC3颗粒的聚集情况;qRT-PCR及Western blot检测雷帕霉素处理CNE-1细胞48小时后对LC3、p62及FIP200基因的表达水平的影响。结果 CNE-1细胞经不同浓度雷帕霉素处理4小时,各组细胞的增殖能力无明显差异(P>0.05),在处理12小时后,雷帕霉素对CNE-1细胞增殖活性产生抑制作用,且呈浓度依赖性(P<0.01);在激光共聚焦显微镜下可见细胞经雷帕霉素处理48小时后出现较明显的LC3颗粒聚集;CNE-1细胞中的自噬相关基因LC3、p62,在雷帕霉素处理48小时后,与对照组相比前者表达升高(P<0.01),后者表达量降低(P<0.01),FIP200基因表达水平升高(P<0.01)。结论雷帕霉素能抑制鼻咽癌CNE-1细胞的增殖活性,诱导细胞发生自噬,FIP200可能在调控鼻咽癌细胞自噬性死亡中发挥作用。
- 金巧智叶文蔚陈武兵陶宝鸿李志海蔡志毅
- 关键词：细胞增殖自噬肿瘤细胞雷帕霉素
- 宫颈癌预后相关长链非编码RNA筛选及其临床意义研究
- 2023年
- 目的 通过筛选宫颈癌预后相关长链非编码RNA(lncRNA),检测其在宫颈癌组织中的表达水平,并探讨其临床意义。方法 利用“edgeR”包筛选到与患者生存相关的差异表达lncRNA-AP001528.2。采用实时荧光定量聚合酶链反应技术检测AP001528.2的表达,并分析其与临床病理特征的相关性;生存曲线分析患者术后5年生存情况,Log-rank检测比较生存差异;Cox比例风险回归模型分析预后不良的独立危险因素;ROC曲线评价AP001528.2对宫颈癌的诊断价值。结果 宫颈癌组织中AP001528.2表达升高,且与FIGO分期、宫颈浸润深度和淋巴结转移相关;高表达AP001528.2的宫颈癌患者术后5年总生存率降低;FIGO分期、宫颈浸润深度、淋巴结转移和AP001528.2表达与宫颈癌患者生存率相关,且后三者是宫颈癌患者的独立危险因素。AP001528.2表达诊断宫颈癌ROC曲线下面积为0.84,敏感度为96.7%,特异度为60.7%。结论 AP001528.2可能是宫颈癌预后的独立不良因素之一,在宫颈癌的诊断中有一定的临床应用价值。
- 叶文蔚郭丙静应柳青蒋梦亭柴芝红蔡仙丽
- 关键词：宫颈癌预后
- miR-7-5p靶向调控ATG4A介导自噬对子宫内膜癌细胞增殖、侵袭的影响被引量：2
- 2020年
- 目的观察miR-7-5p在子宫内膜癌组织中的表达情况,并探讨miR-7-5p对子宫内膜癌细胞(HEC-1B)增殖、侵袭的影响及其机制。方法利用逆转录聚合酶链反应法(qRT-PCR)实验检测42例子宫内膜癌患者子宫内膜癌组织和癌旁正常组织中miR-7-5p的表达水平,并分析其与临床病理学特征的关系;CCK-8法及Tran⁃swell试验检测过表达miR-7-5p后HEC-1B细胞增殖及侵袭情况;通过生物信息学预测网站预测到自噬相关基因4A(ATG4A)与miR-7-5p有互补结合位点,并利用双荧光素酶报告系统鉴定它们的靶向关系;再通过Western blot实验检测上调miR-7-5p表达后HEC-1B细胞中ATG4A、LC3-Ⅱ、p62的表达情况,以及敲低ATG4A表达后LC3-Ⅱ、p62的表达情况。结果miR-7-5p在子宫内膜癌组织中相对表达量明显低于癌旁组织(t=18.65,P<0.05),其表达量与FIGO分期、肿瘤浸润深度及淋巴结转移密切相关(t分别=2.45、3.40、2.27,P均<0.05);上调miR-7-5p表达能明显抑制HEC-1B细胞的增殖能力以及侵袭能力(t分别=59.89、8.99,P均<0.05);miR-7-5p靶向调控ATG4A的表达,上调miR-7-5p水平能降低ATG4A、LC3-Ⅱ的表达(t分别=7.82、12.88,P均<0.05),升高p62的表达(t=-10.42,P<0.05),而敲低ATG4A水平后LC3-Ⅱ表达降低(t=11.41,P<0.05),p62表达升高(t=-23.13,P<0.05)。结论miR-7-5p与子宫内膜癌的发展及预后密切相关,miR-7-5p可通过靶向调控ATG4A基因的表达,抑制细胞自噬活性,从而降低HEC-1B细胞的增殖及侵袭水平。
- 叶文蔚杨晶金应灵潇柴芝红蔡仙丽
- 关键词：子宫内膜癌自噬
- 双荧光素酶报告系统鉴定miRNA-3133对200kD黏着斑激酶家族相互作用蛋白基因的靶向调控作用被引量：2
- 2021年
- 目的通过构建分子量大小为200 kD的黏着斑激酶家族相互作用蛋白(FIP200) 3’UTR双荧光素酶报告基因载体,研究FIP200与mi R-3133的靶向关系。方法采用生物信息学软件targetscan预测mi R-3133与FIP200 3’端非翻译区(3’UTR)潜在的互补结合位点;利用PCR扩增FIP200基因3’UTR序列,并克隆到psicheck2载体中,构建FIP200野生型和突变型重组双荧光素酶报告基因载体;将野生型psicheck2-FIP200-wt 3’UTR或突变型psicheck2-FIP200-mut 3’UTR双荧光素酶报告质粒分别与mi RNA-3133 mimics或mimics-NC共转染CNE-1细胞;通过双荧光素酶报告系统检测各组荧光素酶活性,观察mi RNA-3133对FIP200表达的影响。结果生物信息学分析显示FIP200 3’UTR与mi RNA-3133有潜在的结合位点,酶切和测序结果表明野生型和突变型双荧光素酶报告载体构建成功;双荧光素酶报告系统检测显示,mi RNA-3133可抑制野生型FIP200载体的荧光素酶的表达(P <0.05),而对突变型载体的荧光素酶表达无影响(P> 0.05)。结论成功构建FIP200基因3’UTR的双荧光素酶报告载体,mi RNA-3133可以直接靶向调控FIP200基因的表达。
- 金巧智叶文蔚陶宝鸿张朝晖李志海蔡志毅
- 雷帕霉素通过诱导自噬抑制子宫内膜癌HEC-1B细胞的恶性生物学行为研究被引量：1
- 2021年
- 目的研究雷帕霉素对人子宫内膜癌HEC-1B细胞增殖、侵袭迁移能力的影响及其可能的机制。方法不同浓度雷帕霉素作用于HEC-1B细胞不同时间后,采用CCK-8法检测细胞增殖能力并计算雷帕霉素的半数抑制浓度(IC50),划痕及Transwell试验检测细胞侵袭迁移能力;在激光共聚焦显微镜下观察LC3颗粒的聚集情况;Western blot检测对照组及雷帕霉素组细胞中LC3Ⅱ、p62蛋白表达情况。结果在一定药物浓度及时间条件下,雷帕霉素抑制HEC-1B细胞的生长活性,且与药物浓度和作用时间呈正相关(P<0.01);雷帕霉素呈浓度依赖性的抑制细胞侵袭及迁移能力(P<0.05);在激光共聚焦显微镜下可见细胞经雷帕霉素处理后出现较明显的LC3颗粒聚集;雷帕霉素能升高LC3Ⅱ蛋白表达量(P<0.05),降低p62蛋白表达量(P<0.05)。结论雷帕霉素可通过诱导HEC-1B细胞自噬抑制子宫内膜癌细胞的增殖、侵袭迁移能力。
- 叶文蔚郭丙静柴芝红潘丹蔡仙丽
- 关键词：子宫内膜癌雷帕霉素细胞增殖细胞侵袭细胞迁移自噬
- 宫颈不同疾病患者合并HPV感染的病原菌感染状况及免疫功能被引量：15
- 2019年
- 目的调查分析宫颈不同疾病患者合并人乳头瘤病毒(HPV)感染的病原菌感染状况及免疫功能。方法选择2015年3月至2018年1月在我院就诊的96例宫颈不同疾病患者为研究组,其中宫颈炎组18例,宫颈上皮内瘤变组54例(CINⅠ组15例,CINⅡ组17例,CINⅢ组22例),宫颈癌组24例;并以同期在我院进行体检的80例健康女性为对照组,检测所有研究对象的HPV感染、阴道菌群情况和宫颈分泌物CD_4^+、CD_8^+细胞数。结果研究组HPV感染率明显高于对照组(P<0.05);宫颈炎组、CIN组、宫颈癌组HPV感染率呈上升趋势,组间两两比较差异均有统计学意义(Ps<0.05)。宫颈炎组、CINⅠ组、CINⅡ组、CINⅢ组、宫颈癌组细菌性阴道病(BV)、解脲支原体(UU)和衣原体(CT)感染率呈上升趋势,宫颈癌组与宫颈炎组比较差异有统计学意义(P<0.05);各组间人型支原体(MH)、滴虫和霉菌的感染率差异无统计学意义(P>0.05)。宫颈炎组、CINⅠ组、CINⅡ组、CINⅢ组、宫颈癌组CD_4^+T细胞表达阳性率呈下降趋势,宫颈癌组与宫颈炎组、CINⅠ组比较差异有统计学意义(P<0.05),CINⅢ组与宫颈炎组比较差异有统计学意义(P<0.05);CD_8^+T细胞表达阳性率呈上升趋势,组间比较差异无统计学意义(P>0.05);CD_4^+/CD_8^+<1患者所占比例呈上升趋势,宫颈癌组、CINⅢ组、CINⅡ组与宫颈炎组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HPV感染、病原菌感染及免疫功能下降与宫颈病变发生发展密切相关,临床中应给予足够重视并及时进行有效干预。
- 潘丹蔡仙丽叶文蔚邱晓晓
- 关键词：人乳头瘤病毒宫颈疾病病原菌感染免疫功能
- 微小RNA-29c对人鼻咽癌细胞株增殖、侵袭的调控作用被引量：2
- 2017年
- miRNA-29c表达异常减少是导致一些恶性肿瘤细胞无限增殖及肿瘤发生、发展的重要因素。Senqupta等采用基因芯片技术研究结果显示微小RNA（miRNA，miR）-29c表达的浓度仅为正常鼻咽上皮细胞的1／5。本研究旨在观察miR-29c在体外对鼻咽癌细胞增殖侵袭能力的影响及体内对肿瘤生长的抑制作用。
- 金巧智叶文蔚蔡志毅孟易禹黄栋栋李志海
- 关键词：人鼻咽癌细胞株增殖恶性肿瘤细胞基因芯片技术鼻咽上皮细胞癌细胞增殖
