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石伟
作品数:
7
被引量:19
H指数:2
供职机构:
中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所
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发文基金:
国家自然科学基金
中国医学科学院基金
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相关领域:
医药卫生
生物学
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合作作者
朱立平
北京协和医学院
王汛
中国医学科学院北京协和医学院基...
张淑珍
中国医学科学院北京协和医学院基...
李国燕
中国医学科学院北京协和医学院基...
张立新
中国医学科学院北京协和医学院基...
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分化抗原
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B细胞
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ER
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信使
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序贯试验
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北京协和医学...
作者
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石伟
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朱立平
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中国医学科学...
1篇
基础医学与临...
年份
2篇
1998
1篇
1997
2篇
1996
1篇
1995
1篇
1987
共
7
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被引量排序
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从人活化B细胞株3D5细胞λgtll cDNA文库筛选到的1529bp cDNA的核苷酸序列分析
1996年
对用单抗5C5和单抗5C5-G1的混合物从3D5细胞λgtllcDNA文库筛选到的7个阳性cDNA克隆中的1个(3D5-5)进行了核苷酸序列分析。由于3D5-5cDNA长1.6kb左右,不能直接测序,故先依测序用质粒pBScript-KS多克隆位点中的内切酶点行单酶切,经电泳分析画出测序用的物理图谱,再用相应内切酶行单酶酶切。藉低熔点琼脂糖回收各个片段。带质粒pBScript-K5的大片段经直接自身环化,小片段与质粒载体pBScript-KS重组,构建测序用的亚克隆。用双链双脱氧末端终止法测各亚克隆的核苷酸序列,再拚接出全长为1529bp的3D5-5cDNA全长序列。与国际基因库资料比较,未见有相同的序列。此cDNA中有一个长465bp(从540bp-1004bp)的ORF,编码154个氨基酸的蛋白质。此蛋白质中有二个疏水区(第1~34位氨基酸及第79~109位氨基酸),提示它可能属Ⅰ类穿膜蛋白。
石伟
朱立平
崔莲仙
张立新
张淑珍
王汛
李国燕
关键词:
CDNA
DNA
B细胞
用单抗5C5和5C5-G1筛选的613bp cDNA的核苷酸序列分析
被引量:2
1996年
用识别人活化B细胞分化抗原5C5的单克隆抗体5C5和5C5-G1的混合物从人扁桃体细胞λgt11cDNA文库筛选到3个阳性克隆。其cDNA插入到质粒pUC18,经双链双脱氧测序法作核苷酸序列分析,知其中一个cDNA长613bp,另二个长467bp,后者与前者的前467bp完全重叠。613bpcDNA中有一个开放阅读框架,从103bp到429bp,共327bp。Northern印迹分析显示,此613bp cDNA与人扁桃体细胞和3D5细胞的RNA在2.0kb左右有杂交带。与国际上有关基因库的资料比较,未发现有任何同源核苷酸序列。由于这是一个新的cDNA序列,GenBank已接受(接受号为U25041)。从此cDNA的读框推断的蛋白质中第20-30氨基酸为明显的疏水区,故这个蛋白有典型的膜蛋白结构。
石伟
朱立平
崔莲仙
张淑珍
王汛
李国燕
关键词:
分化抗原
CDNA
核苷酸序列
用细胞酶联免疫吸附法筛选分泌抗人B细胞分化抗原单抗的杂交瘤
被引量:2
1995年
用活化的人B细胞株3D5细胞免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾脏细胞与SP2/0细胞融合。融合后细胞置甲基纤维素半固体培养基生长。以0.5%甲醛处理的3D5细胞和CEM细胞包被酶标板作为靶细胞,用细胞酶联免疫吸附(CELISA)试验筛选290个杂交瘤细胞克隆,得到33个与3D5细胞反应阳性而与CEM细胞反应阴性的克隆。再经间接免疫荧光染色后,用流式细胞仪复测以上所得33个阳性克隆,结果3D5阳性CEM阴性者27例,占81.82%,表明CELISA法是一个粗筛抗人B细胞分化抗原的简便有效方法。
郭彩云
石伟
王汛
朱立平
关键词:
单克隆抗体
一个与编码大鼠ERα-甘露糖苷酶同源的人cDNA分子克隆
被引量:12
1997年
用抗人B细胞和T细胞共同分化抗原6A8单克隆抗体从人扁桃体细胞λgt11cDNA文库克隆到1个长1358bp的cDNA。此cDNA内有一个长1278bp(26~1303bp)的开放阅读框架,编码425个氨基酸的蛋白质。此蛋白质氨基酸序列中第157位到223位为疏水跨膜区。蛋白质的氨基酸序列与大鼠ERα-甘露糖苷酶(1040个氨基酸)的632~1038位氨基酸序列间的相同性和相似性高达82.045%和88%。它与酵母Saccharomycescervisiaeα-甘露糖苷酶(1083个氨基酸)的659~1083位氨基酸序列间的相同性和相似性也有32.5%和51.75%。前者163~277位间与后者832~946位间115个氨基酸序列间的相同性和相似性达到57%和74%。由于6A8cDNA核苷酸顺序未见于国外基因库资料,故已为NIHGenBank接受登记,接受号为U37248。
张立新
朱立平
朱立平
石伟
祝庆麟
马凤蓉
王汛
李国燕
关键词:
分化抗原
甘露糖苷酶
CDNA
分子克隆
临床试验的重要性(综述)
被引量:2
1987年
一、临床试验的发展过程 有关临床试验的最早记载可追溯到十八世纪。1947年Sir James Lind为寻找治疗坏血病的有效方法,将患者分为6组,每组2人,分别给予苹果汁、硫酸酏剂、醋,海水、桔子、柠檬和肉豆蔻治疗。结果,服用桔子与柠檬的2位病人很快痊愈,其他病人无好转,说明柑桔类水果可治疗坏血病。1935年Lonald Fisher首次用随机方法进行试验分组应用于农业研究。第二次世界大战以后。
石伟
纪宝华
关键词:
病人
偏倚
序贯试验
编码与大鼠ERα-甘露糖苷酶同源的人6A8cDNA在真核细胞的表达
被引量:7
1998年
目的观察6A8cDNA(1358bp)在真核细胞的表达。方法Northernblot,构建6A8cDNA表达载体pRc/CMV-6A8cDNA,转染COS-7细胞,及基因免疫小鼠。结果6A8cDNA有4.3kb和3.5kb两种mRNA转录形式。4.3kbmRNA以外周血白细胞最丰富,其次为淋巴结、脾脏和骨髓,胸腺组织表达较少,胎肝则缺如。3.5kb者也以外周血白细胞最丰富,其次为肝脏、淋巴结和骨髓,胸腺和脾脏表达量最少。pRc/CMV-6A8cDNA在COS-7细胞表达了分子量45000左右的蛋白质,与单抗6A8有反应。pRc/CMV-6A8cDNA基因免疫小鼠,6/10只小鼠血清与人活化B细胞株3D5细胞膜有反应,5/5只对照小鼠血清呈阴性反应。结论6A8cDNA(1358bp)在真核细胞获得表达,但此cDNA非为全长。
张立新
马凤蓉
朱立平
李波
石伟
张淑珍
李国燕
王汛
赵方萄
关键词:
RNA
信使
甘露糖苷酶
真核细胞
分化抗原6A8在B淋巴细胞膜和胞浆中的表达
1998年
采用间接免疫荧光染色、流式细胞仪、激光扫描共聚焦显微镜、Northernblot及Westernblot分析研究分化抗原6A8在人淋巴细胞的表达。流式细胞仪分析显示,单抗6A8与所检测的B细胞株3D5、CESS和Daudi有反应,与人组织细胞瘤细胞株U937也有反应,与慢性髓性白血病细胞株K562及所检测的T细胞株Jurkat和Peer不反应。Northernblot检测支持上述现象,3D5和U937细胞mRNA转录较丰富,CESS细胞次之,而Jurkat与Peer细胞的mRNA转录很少。激光扫描共聚焦显微镜观察显示,单抗6A8识别的分化抗原见于3D5细胞浆和胞膜。可见在人B细胞株3D5,分化抗原6A8不仅表达于胞膜,也表达于胞浆。
张立新
朱立平
朱立平
马凤蓉
石伟
张淑珍
石伟
李国燕
张淑珍
关键词:
分化抗原
B细胞
单克隆抗体
全选
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