王芳
- 作品数：56 被引量：208H指数：7
- 供职机构：中国兽医药品监察所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划北京市科技新星计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生轻工技术与工程化学工程更多>>
- 猪瘟活疫苗效力检验替代方法的研究被引量：4
- 2015年
- 目前，我国猪瘟活疫苗效力检验最常用的方法是测定猪瘟疫苗中病毒的兔体感染量（ RID），但是用该方法易受到检验兔品种、个体和饲养环境的影响。为了探索一种不依赖动物的疫苗效力检验新方法，本研究将待检猪瘟活疫苗系列稀释后分别接种易感细胞，使用抗原捕获ELISA、RT－nestPCR和RT－PCR三种方法检测不同稀释度疫苗中活病毒在感染细胞后增殖的子代病毒，计算疫苗病毒的最高细胞感染剂量，建立了猪瘟疫苗病毒的细胞感染量（ CID）的效力检验方法。结果显示：疫苗中活病毒粒子越多，CID就越高；对不同类型猪瘟疫苗的检测结果表明，该方法适用于传代细胞源和细胞源猪瘟活疫苗的效力效检。使用CID和RID两种检测方法同时对12批猪睾丸传代细胞源（传代细胞源）和3批牛睾丸原代细胞源（细胞源）猪瘟活疫苗进行了比对效检，结果表明，用CID测定方法检验，12批猪瘟活疫苗（传代细胞源）每头份均含10^5 CID，3批猪瘟活疫苗（细胞源）每头份含量均为10^4 CID；用兔子感染体温测定法，12批猪瘟活疫苗（传代细胞源）每头份含量在2．6×10^4～3．0×10^4 RID之间，3批猪瘟活疫苗（细胞源）每头份含7．0×10^3～8．0×10^3 RID。试验证明：本实验室建立的CID检测结果与现有质量标准RID的结果存在良好的相关性，能够较好反映疫苗中活病毒的含量，有望成为RID的替代方法。
- 王海光宁宜宝赖月辉吴文福王芳刘灿张文利黄秋雪陈坚林旭埜张毓金范学政徐璐王琴赵启祖丁家波
- 关键词：猪瘟活疫苗效力检验
- 用半数变色单位法精确测定支原体活菌滴度被引量：3
- 2013年
- 【目的】使用半数变色单位法实现对支原体活菌滴度的精确测定,以替代当前常用的CCU(变色单位)测定法。【方法】参考病毒滴度TCID50(半数组织细胞感染量)的标准测定方法,对早期学者提出的支原体活菌滴度指标—CCU50(半数变色单位)的测定方法进行改进,并做了重复性、敏感性试验以及与CCU的比对验证试验。为进一步验证该方法的适用性,使用其对猪肺炎支原体和鸡滑液支原体培养物进行了活菌滴度精确测定和评价。【结果】该方法可重复性良好,并具有较强的敏感性和适用性。【结论】CCU50测定法能对支原体活菌滴度进行精确评估,有望成为支原体培养工艺研究、支原体疫苗研发等方面的有效工具。
- 沈青春李聪研冯倩倩孙晔宁宜宝朱良全王芳
- 关键词：支原体
- 一种支原体的通用PCR检测方法及其检测试剂盒
- 本发明涉及一种支原体通用PCR检测方法及其检测试剂盒。本发明选取16S rRNA序列V6高变区和V9高变区序列作为支原体特异性通用引物设计区域，在保证特异性的前提下，多处引入兼并碱基，设计并筛选获得MF20.1/MF20...
- 沈青春罗玉峰王芳刘博耿仁浩曲鸿飞魏津蒋卉马欣肖璐王德丽冯宇
- 文献传递
- 一种双基因缺失粗糙型牛种布鲁氏菌及其疫苗的生产方法
- 本发明涉及一种双基因缺失粗糙型牛种布鲁氏菌及其疫苗的生产方法。该重组菌株通过非抗性基因筛选技术，缺失牛种布鲁氏菌2308株WboA基因以及vjbR基因。上述2个基因的缺失，一方面使其失去了光滑型布鲁氏菌细胞壁LPS结构中...
- 王芳丁家波冯宇王楠朱良全蒋卉宁宜宝王忠田张广川毛开荣康孟佼范学政印春生李宁戴志红
- 文献传递
- 一株重组鹦鹉热衣原体外膜蛋白MOMP基因的粗糙型布鲁氏菌及其疫苗生产方法
- 本发明涉及一株重组鹦鹉热衣原体(Cps)外膜蛋白MOMP基因的粗糙型布鲁氏菌的构建及其疫苗。本发明以粗糙型牛种布鲁氏菌弱毒株RA343株为亲本株，以蔗糖自杀质粒为载体，将含有特定启动子序列的鹦鹉热衣原体外膜蛋白MOMP基...
- 丁家波范学政朱良全冯宇彭小薇秦玉明王芳许冠龙李秋辰蒋卉
- 文献传递
- 口蹄疫灭活疫苗安全种毒载体及应用
- 本发明涉及一种口蹄疫灭活疫苗安全种毒载体及应用，即在该载体基础上构建不同血清型的口蹄疫灭活疫苗安全生产种毒。本发明中构建的嵌合病毒既保留了经典疫苗毒株细胞适应性良好的优点，又能通过插入流行毒株的结构蛋白克服抗原匹配性不高...
- 赵启祖邹兴启朱元源徐璐范学政王琴沈青春王芳宁宜宝
- 文献传递
- 抗布鲁氏菌单克隆抗体的研制及cELISA方法的建立被引量：6
- 2014年
- 利用杂交瘤技术筛选出3株抗布鲁氏菌的特异性单克隆抗体5C10、4D2和3E4;利用单抗5C10建立了检测血清中布鲁氏菌抗体的竞争ELISA(cELISA)方法。用该方法对320份牛血清样品和147份绵羊血清样品进行了检测,并与商品化布鲁氏菌病试剂盒进行了比较。结果显示,用建立的cELISA方法和商品化布鲁氏菌病试剂盒对320份牛血清样品和147份绵羊血清样品的检测符合率分别为95.6%和92.5%。用补体结合试验(CFT)进一步检测差异结果的样品(25份),证明建立的cELISA与CFT的吻合率更高(21/25),而商品化布鲁氏菌病试剂盒与CFT的吻合率较低(4/25)。结果表明,本研究建立的用于检测布鲁氏菌抗体的cELISA方法更特异敏感,在布鲁氏菌病根除计划中将具有重要的应用价值。
- 王志明赵妮王芳钱琨邵红霞叶建强秦爱建丁家波
- 关键词：布鲁氏菌病单克隆抗体CELISA
- 一株重组A型口蹄疫病毒VP1基因的粗糙型布鲁氏菌及其疫苗生产方法
- 本发明涉及一株重组A型口蹄疫病毒VP1基因的粗糙型布鲁氏菌的构建及其疫苗生产方法。本发明以粗糙型牛种布鲁氏菌弱毒株RA343株为亲本株，以蔗糖自杀质粒为载体，将含有特定启动子序列的A型口蹄疫病毒VP1基因经密码子优化后无...
- 孙石静王芳蒋卉朱良全秦玉明许冠龙丁家波彭小薇冯宇范学政王楠
- 文献传递
- 布鲁氏菌抗体检测试纸条
- 本发明涉及一种布鲁氏菌抗体检测试纸条。本发明具有以下意义：(1)丰富了我国布鲁氏菌病诊断方法；(2)为我国布鲁氏菌病诊断提供了一种简便快捷、能对多种不同动物实施现场快速检测的新方法；(3)本试纸条克服了常规布鲁氏菌病诊断...
- 丁家波冯宇朱良全蒋卉彭小薇王芳王楠毛开荣徐磊
- 文献传递
- 兽用生物制品外源支原体检验方法
- 本文件描述了用聚合酶链式反应(PCR)法、培养法检验兽用生物制品外源支原体的原理、方法和综合判定。本文件适用于兽用生物制品中外源支原体的检验。
- 罗玉峰沈青春孟杰郑存哲曲鸿飞王芳刘博耿仁浩魏津马欣王德丽肖璐陈冬阳
