陈伟
- 作品数：13 被引量：21H指数：3
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- pLTRNL介导HSV-1 TK基因长期稳定转染人肝癌细胞系的建立被引量：1
- 1998年
- 以脂质体基因转移技术，将含ＨＳＶ１ＴＫ基因的重组逆转录病毒载体ｐＬＴＲＮＬ转染人肝癌细胞系ｈＨＣＣ。经抗生素Ｇ４１８选择，筛选出ＨＳＶ１ＴＫ基因转染的ｈＨＣＣ，再进行克隆化和亚克隆化后扩大培养。应用ＰＣＲ，ＲＴＰＣＲ及ｓｌｏｔｂｌｏｔ狭槽印迹等方法，对转染细胞基因组ＤＮＡ和总ＲＮＡ进行了鉴定。结果表明，ＨＳＶ１ＴＫ基因已整合入ｈＨＣＣ细胞基因组中，且有ＴＫ基因的ｍＲＮＡ转录。ＨＳＶ１ＴＫ基因稳定转染的ｈＨＣＣ的建立，为在体外和动物模型上对肝癌进行基因治疗奠定了实验基础。
- 陈伟喻启桂樊荣甄荣芬薛采芳
- 关键词：基因治疗胸苷激酶HSV-1
- MTT比色法测定药物对Acc-M细胞作用的实验研究
- 目的观察体外应用羟基喜树碱（HCPT）、平阳霉素（PYM）两种药物单用和两两联合应用对人腺样囊性癌Acc-M 细胞的生长抑制作用。方法采用MTT 法研究用药前后细胞增殖活性的影响,用流式细胞仪观察细胞凋亡及细胞周期变化。...
- 安永谦孙沫逸李建虎马家海张圃陈伟王鑫杨耀武
- 关键词：羟基喜树碱
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- 雪旺细胞标记物GFAP与肌上皮细胞标记物α-SMA在涎腺腺样囊性癌中共表达
- 目的:检测雪旺细胞标记物GFAP 与肌上皮细胞标记物α-SMA 在涎腺腺样囊性癌（ACC）中的表达情况,并探讨GFAP、α-SMA 与ACC 嗜神经侵袭的关系。方法:利用免疫荧光双标记及激光共聚焦显微镜技术检测GFAP ...
- 孙沫逸陈伟杨连甲李建虎杨耀武安永谦居云
- 关键词：雪旺细胞肌上皮细胞嗜神经性免疫荧光双标记
- 文献传递
- 雪旺细胞分化在涎腺腺样囊性癌嗜神经侵袭中的意义
- 目的: 检测腺样囊性癌中是否存在雪旺细胞分化,雪旺细胞分化是否与腺样囊性癌嗜神经侵袭有关,腺样囊性癌中哪种细胞成分发生了雪旺细胞分化。方法:利用免疫组织化学、免疫荧光双标记及激光共聚焦显微镜技术检测雪旺细胞标记物S100...
- 孙沫逸陈伟罗小龙李建虎张圃杨耀武杨连甲董绍忠
- 关键词：腺样囊性癌嗜神经侵袭肌上皮细胞免疫荧光双标记
- 文献传递
- 雪旺细胞标记物Leu-7与肌上皮细胞标记物α-SMA在涎腺腺样囊性癌中共表达
- 目的: 检测雪旺细胞标记物Leu-7与肌上皮细胞标记物α-SMA在涎腺腺样囊性癌（ACC）中的表达情况,并探讨Leu-7、α-SMA与ACC嗜神经侵袭的关系。方法:利用免疫组织化学、免疫荧光双标记及激光共聚焦显微镜技术检...
- 陈伟孙沫逸刘宝林陈丹居云
- 关键词：雪旺细胞肌上皮细胞嗜神经侵袭
- 文献传递
- 雪旺细胞标记物Leu-7(HNK-1)与肌上皮细胞标记物α-SMA在涎腺腺样囊性癌中共表达
- 目的检测雪旺细胞标记物Leu-7与肌上皮细胞标记物α-SMA 在涎腺腺样囊性癌(ACC)中的表达情况,并探讨Leu-7、α-SMA 与ACC 嗜神经侵袭的关系。方法收集1995年至2003年间在第四军医大学口腔医院接受手...
- 孙沫逸陈伟杨连甲李建虎杨耀武安永谦居云
- 关键词：雪旺细胞肌上皮细胞嗜神经侵袭免疫荧光双标记
- 文献传递
- β-丙内酯在Vero细胞HFRS疫苗中的应用被引量：11
- 2003年
- 目的 探讨 β -丙内酯灭活双价Vero细胞肾综合征出血热纯化疫苗的最佳条件。 方法 采用不同终浓度的 β-丙内酯和不同的灭活时间对疫苗进行灭活 ,用细胞培养法进行病毒增殖试验 ,以确定灭活效果。应用高效液相色谱法分析 β -丙内酯的最佳水解条件和 3批双价vero细胞出血热纯化灭活疫苗 β-丙内酯残留量。检测 3批双价纯化灭活疫苗的免疫效果。结果 疫苗经终浓度为 1∶2 0 0 0和 1∶4 0 0 0的 β -丙内酯作用 2 4h ,均可完全灭活病毒 ;疫苗中的 β-丙内酯在 37℃水浴下 ,随着水解时间的延长 ,其含量逐渐下降 ,水解 2h后已无 β-丙内酯检出 ;3批经 β-丙内酯灭活的双价Vero细胞出血热纯化疫苗均未检出 β-丙内酯残留 ,在家兔体内诱导产生针对汉滩型和汉城型病毒的中和抗体效价均达到 1∶2 0。结论 肾综合征出血热纯化疫苗经终浓度为 1∶4 0 0 0 β -丙内酯 4℃灭活 2 4h ,然后再于 37℃水浴中水解 2h ,既可达到完全灭活病毒且无 β-丙内酯残留的目的 ;
- 陈伟李忠义刘江秋于笑难薛采芳蔡群徐璐廖辉
- 关键词：肾综合征出血热疫苗VERO细胞病毒灭活高效液相色谱
- 单纯疱疹病毒I型胸苷激酶基因融合表达产物的免疫学特性研究被引量：3
- 2000年
- 目的研究TK基因在真核细胞中的表达。方法应用已构建和表达的单纯疱疹病毒I型胸苷激酶(HSV 1TK)融合蛋白免疫兔制备抗HSV 1TK血清 ,并以免疫印迹法鉴定其特异性 ,以免疫荧光法检测HSV 1TK基因在转染人肝癌细胞系中的表达。结果免疫印迹显示 ,自制和国外提供的抗TK兔血清 ,均能特异性地识别Mr 约为97000的TK融合蛋白。免疫荧光染色得到的结果满意 ,而且自制抗血清的效价和染色强度均优于国外提供的免疫血清。结论原核表达的HSV 1TK融合蛋白具有较好的免疫学活性 ;自制抗HSV
- 陈伟薛采芳甄荣芬樊荣
- 关键词：单纯疱疹病毒胸苷激酶基因治疗
- 肾综合征出血热纯化疫苗候选毒株在Vero细胞上的适应传代及其免疫原性研究被引量：4
- 2003年
- 目的 将肾综合征出血热纯化疫苗候选毒株适应于Vero细胞 ,并对其抗原性和免疫原性进行研究。方法 将汉滩病毒H82 0 7株和汉城病毒Y86 0 13株在Vero细胞上进行连续终末稀释传代 ,采用间接免疫荧光法、酶联免疫吸附试验和空斑减少中和试验 ,研究传代后毒株的繁殖特性、病毒滴度、抗原量及免疫原性。结果 经过 5次终末稀释传代 ,两株病毒在Vero细胞上均显示出良好的适应性 ,从第六代开始病毒滴度稳定在 7 0LgTCID50 ml以上 ,第八代两毒株抗原量均已达到 1∶6 4 ,H82 0 7株抗原量继续升高 ,最高时达 1∶2 5 6。用两株病毒不同培养代次上清液制备的单价原液灭活疫苗免疫家兔二针 ,免疫血清对同型毒株的中和效价均达到 1∶10。结论 两株病毒已适应于Vero细胞 ,且具有病毒滴度高和免疫原性良好的特性 ,适合用作Vero细胞肾综合征出血热灭活纯化疫苗的候选毒株。
- 陈伟薛采芳刘江秋李忠义范永星徐璐廖辉
- 关键词：肾综合征出血热纯化疫苗VERO细胞免疫原性抗原性
- 单纯疱疹病毒Ⅰ型胸苷激酶基因的扩增、克隆和测序被引量：2
- 1998年
- 目的：对单纯疱疹Ⅰ型胸苷激酶基因扩增、克隆和测序．方法：从单纯疱疹病毒Ⅰ型（ＨＳＶ－１）１７ｓｙｎ＋株感染的ＢＨＫ２１细胞上清液中提取ＨＳＶ－１基因组ＤＮＡ，以此为模板，用ＰＣＲ方法扩增胸苷激酶（ＴＫ）．将扩增的片段克隆入载体ｐＵＣ１８中，并进行测序．结果：除终止码外，ＨＳＶ－１ＴＫ基因全部编码区为１１２８ｂｐ，编码３７６个氨基酸，其中含１２个蛋氨酸，４个半胱氨酸．ＴＫ的第２４９和２５０位氨基酸残基分别为Ｌｅｕ和Ｇｌｎ，其相应密码子为ＣＴＧ，ＧＡＧ，构成１个ＰｓｔＩ位点，第３１３和３１４氨基酸残基分别为Ａｓｐ和Ｖａｌ，其相应密码子为ＧＡＣ和ＧＴＣ，构成另一个ＰｓｔＩ位点．
- 喻启桂胡宁婕薛采芳陈伟陈伟甄荣芬
- 关键词：单纯疱疹病毒胸苷激酶核苷酸
