木质纤维素预处理是生物精炼制备生物能源的关键步骤之一。近年来,离子液体预处理木质纤维素逐渐受到人们的关注。本研究通过中和反应合成了7种胆碱脂肪酸盐离子液体,并用于水稻秸秆预处理。在25℃下,这些离子液体的粘度介于74~488 c P。结果表明,经这些生物离子液体预处理后,水稻秸秆中的多糖酶解效率得到了显著提高。并且,离子液体的预处理效果依赖于阴离子链长。其中,[胆碱][丁酸盐]为最适水稻秸秆预处理溶剂。在90℃下经[胆碱][丁酸盐]离子液体预处理6 h后的水稻秸秆酶解后,葡萄糖和木糖收率分别达70.62%和41.47%。这类离子液体能选择性从水稻秸秆中除去大量木质素和部分木聚糖,而不会改变纤维素的晶体结构,从而显著提高后续酶解效率。
牛肝β-糖苷酶是一种能催化核苷类化合物区域选择性糖基化反应合成二糖核苷的生物催化剂。在已有的研究报道中,采用的生物催化剂都是游离酶,不利于其大规模应用。交联酶聚合物(CLEAs)作为一种新型的无载体固定化酶,具有制备简便、成本低、体积酶活高等优点。本文研究牛肝β-糖苷酶CLEAs的制备,并对其酶学性质和结构进行了研究,探讨了其在二糖核苷合成中的应用。最适的沉降剂、交联剂及交联时间分别为70%饱和度的(NH4)2SO4、50%(V/V)葡聚糖多醛及8 h。在最适条件下,CLEAs的活性回收率为58%。该CLEAs的最适p H、温度、Vmax及Km分别为8.5、60℃、0.13μmol/(min·mg)及1.43 m M。并且该CLEAs具有较好的操作稳定性,重复利用6批次后,其催化合成5’-O-β-葡萄糖基-2’-脱氧尿苷的相对产率仅下降20%。牛肝β-糖苷酶CLEAs呈无定形态。
