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氯前列醇钠对卵巢癌细胞SKOV3体外生长的影响被引量：1: 2009年; 为观察氯前列醇钠(PG-Cl)对卵巢癌细胞(SKOV3)增殖和凋亡的影响,应用细胞计数法测量癌细胞生长曲线,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定细胞体外增殖情况,吉姆萨染色法细胞观察形态学,Ho-echest-33342凋亡染色法检测加药后细胞凋亡情况。结果显示,PG-Cl对SKOV3细胞抑制率的大小与药物浓度和时间成正比,在高浓度药物作用下效果显著。而在150μg/mL PG-Cl作用12 h后细胞发生凋亡,荧光显示核质固缩呈圆形或椭圆形团块。结果表明,PG-Cl对SKOV3细胞体外生长有显著抑制作用,并诱导细胞发生凋亡。; 周涛韩苗苗陈树林赵萤李伟张宏刚何天虎; 关键词：氯前列醇钠卵巢癌细胞凋亡

苦马豆素诱导山羊黄体细胞凋亡的信号转导通路研究: [目的]建立一株能保持原代山羊黄体细胞主要生物学特征和功能的永生化黄体细胞系,以该细胞系为受体细胞,探索苦马豆素(SW)对山羊黄体细胞分泌孕酮的影响以及SW诱导山羊黄体细胞凋亡的信号转导通路,以期揭示SW引起妊娠母畜流产...; 赵晓民李伟黄勇童德文

超表达Cdc20基因不影响牛卵母细胞第一极体排出被引量：1: 2012年; CDC20(cell division cycle 20)是后期促进复合物(anaphase-promoting complex,APC)的共激活剂之一,也是纺锤体组装检查点(spindle assembly checkpoint,SAC)的靶点,在细胞周期调控中扮演重要角色.为探讨Cdc20在第一极体排出(first polar body extrusion,PBE I)中的作用,Cdc20基因被成功克隆并构建了真核表达载体pCdc20-Venus,随后用T7 Mmessage Mmachine Kit(Ambion)以线性化pCdc20-Venus为模板体外转录(in vitro transcription)获得带帽的Cdc20-Venus mRNA,将Ccdc20-Venus mRNA显微注射到体外培养的牛卵母细胞胞质中进行超量表达.结果表明,真核表达载体pCdc20-Venus转染HeLa细胞后能够正常表达,绿色荧光在细胞核周围呈弥散状分布;将Cdc20-Venus mRNA注射到牛卵母细胞胞质后,胞质内有绿色荧光出现.Cdc20-Venus mRNA注射组卵母细胞的PBE I率(48.9%)与Venus mRNA注射组卵母细胞的PBE I率(50.9%)和未注射组卵母细胞的PBE I率相比均没有显著差异(P>0.05).通过Cdc20在牛卵母细胞内的超量表达,结果显示,超量表达Cdc20基因对牛卵母细胞PBE I没有显著影响(P>0.05).; 杨文琳安鹏李伟赵贵民赵贵民史芸安; 关键词：卵母细胞超表达减数分裂

山羊绒毛干中线粒体DNA和核DNA的提取与PCR扩增被引量：4: 2013年; 本研究以PCR缓冲液、MgCl2溶液和蛋白酶K为裂解提取液,建立了一种从山羊绒毛干中快速提取DNA的方法。结果表明,该方法不仅能从山羊绒毛干中提取出线粒体DNA和核DNA,而且能够有效地进行线粒体基因和核基因组基因的PCR扩增,为拓展羊绒样品在个体识别、遗传资源评价、分子进化和分子标记辅助育种等研究领域中的应用奠定基础。; 耿荣庆周光现韩旭峰李伟李碧波王小龙陈玉林; 关键词：山羊绒线粒体DNA 核DNA DNA提取 PCR扩增

牛疱疹病毒Ⅰ型诱导MDBK细胞凋亡的初步研究: 2011年; 【目的】研究牛疱疹病毒Ⅰ型(BHV-Ⅰ)对牛肾细胞(MDBK细胞)的作用,为探讨BHV-Ⅰ诱导细胞凋亡的分子机制奠定基础。【方法】常规方法培养MDBK细胞,于对数生长期感染BHV-Ⅰ,同时设立对照组,于感染后不同时间取样,采用细胞形态观察、细胞活性检测、细胞核形态观察、DNA ladder检测、细胞凋亡率检测和细胞内Caspase-3活性检测等方法,对BHV-Ⅰ感染的MDBK细胞进行凋亡指标检测。【结果】接毒后24h,MDBK细胞即出现明显的细胞病变。活性检测表明,感染BHV-Ⅰ的细胞活性降低,并且呈病毒感染量和感染时间的依赖性。感染细胞出现核固缩,并呈新月形变化。DNA电泳结果和流式细胞术检测结果均表明,感染BHV-Ⅰ的细胞DNA出现规律的片段化,细胞凋亡比例随感染时间延长而增加,细胞内Caspase-3活性逐渐升高。【结论】BHV-Ⅰ能够诱导MDBK细胞凋亡,并且在诱导细胞凋亡过程中有Caspase-3参与。; 张宽许信刚童德文丁丽李兆才李伟; 关键词：细胞凋亡

略阳乌鸡肠道乳酸菌S-层蛋白分离及黏附特性探究: 本试验旨在分离略阳乌鸡肠道高黏附性乳酸菌,研究其S-层蛋白对黏附的影响。采用16S rDNA高通量测序检测略阳乌鸡盲、回肠乳酸菌的分布和丰度,并从其盲、回肠内容物中分离乳酸菌,16S rDNA测序鉴定种属。通过黏附性试验...; 李伟杨明明杨亚威吕妍; 关键词：略阳乌鸡乳酸菌益生特性黏附性 S-层蛋白; 文献传递

GHSR-1a在奶山羊胃肠道的分布与表达被引量：2: 2014年; 试验采用免疫组织化学、Real-time PCR和Western blotting方法测定ghrelin的功能性受体GHSR-1a(Growth hormone secretagogue receptor-1a,GHSR-1a)在奶山羊胃肠道的分布和表达。免疫组织化学结果显示,GHSR-1a免疫阳性细胞广泛分布于奶山羊胃肠道。在皱胃主要定位于黏膜层和肌层;瘤胃、网胃和瓣胃黏膜层及肌层中也可见GHSR-1a免疫阳性细胞;在小肠主要位于十二指肠、空肠和回肠的黏膜层、黏膜下层和肌层;在结肠、盲肠和直肠GHSR-1a免疫阳性细胞也有广泛分布;GHSR-1a主要表达于内在神经丛神经细胞、胃底腺上皮细胞、肠腺上皮细胞、复层鳞状上皮细胞、平滑肌细胞中。real-time PCR和Western blotting结果显示,皱胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠和直肠GHSR-1a的表达水平相对较高,显著高于瘤胃、网胃和瓣胃的表达(P<0.05)。结果表明,ghrelin可能通过GHSR-1a对奶山羊胃肠功能具有重要的调节作用。; 于高水张文龙黄勇赵晓民李伟童德文; 关键词：胃肠道奶山羊

弥散性神经内分泌细胞标志物在不同生殖周期小鼠卵巢中的表达: 2009年; 【目的】研究卵巢内弥散性神经内分泌系统细胞的分布情况。【方法】采用间接免疫荧光染色法检测弥散性神经内分泌细胞广谱、共同的标志物S100蛋白和神经元特异性烯醇化酶(NSE)在不同生殖周期小鼠卵巢中的表达情况。【结果】S100蛋白和NSE在动情周期次级卵泡和囊状卵泡外膜细胞、妊娠期囊状卵泡外膜细胞和部分黄体细胞中表达,阳性细胞散在或成簇分布,一些细胞具有明显的突起,细胞核不着色。【结论】小鼠卵巢中存在弥散性神经内分泌细胞;弥散性神经内分泌物质在卵泡不同发育阶段发挥着不同的调控作用;在卵巢的发育过程中伴随着部分细胞神经内分泌化。; 李伟唐骏启陈树林韩苗苗周涛王桂花; 关键词：S100蛋白神经元特异性烯醇化酶卵泡

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李伟