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Notch抑制剂DAPT体外改善L02细胞脂肪变研究: 2024年; 目的探讨Notch抑制剂(DAPT)体外对脂肪变肝细胞细胞炎症因子及脂质相关基因水平的影响。方法采用棕榈酸(PA)干预体外构建肝细胞脂肪变模型,采用不同浓度的DAPT干预。采用CCK-8检测细胞存活率,采用尼罗红染色了解细胞脂滴量,采用RT-qPCR法检测TNF-α、IL-1β和IL-6和脂肪相关因子【固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP1c)、FASN和ACACA】mRNA水平,采用Western blot法检测细胞p65和SREBP1c蛋白表达。结果在无PA干预的L02细胞,经1μM、2μM、5μM和10μM DAPT处理细胞24 h,细胞存活率均较对照组显著下降(分别为85.2±5.3%、84.6±2.9%、84.4±6.0%和84.5±3.2%对100.0%,P均<0.05);经2μM和5μM浓度的DAPT干预,细胞TNF-αmRNA水平分别为(0.6±0.01)和(0.5±0.1),显著低于对照组【(1.0±0.0),P<0.01】,IL-1β水平分别为(0.7±0.2)和(0.4±0.0),显著低于对照组【(1.1±0.1),P<0.01】,IL-6水平分别为(0.8±0.1)和(0.6±0.1),显著低于对照组【(1.0±0.0),P<0.05】,细胞p65蛋白表达量也显著降低(P<0.05);2μM、5μM和10μM DAPT处理细胞脂滴荧光强度较对照组显著减弱【分别为(0.2±0.1)、(0.3±0.0)和(0.1±0.0)对(0.7±0.0),P均<0.001】,2μM和5μM DAPT处理细胞FASN mRNA水平分别为(0.7±0.0)和(0.4±0.1),显著低于对照组【(1.0±0.0),P<0.001】、ACACA mRNA水平分别为(0.6±0.1)和(0.3±0.0),显著低于对照组【(1.0±0.0),P<0.001】;5μM DAPT处理细胞SREBP1c蛋白表达量显著低于对照组(P<0.01)。结论DAPT能有效降低体外脂肪变细胞炎症因子表达量,缓解细胞内脂滴形成,其机制可能与调控脂肪相关因子的表达有关,提示抑制Notch信号通路有改善细胞脂肪变发生和进展的潜力。; 吴伟杰丁雯瑾杨蕊旭范建高; 关键词：L02细胞脂肪变脂质

DAPT基础上利伐沙班与低分子肝素在ACS患者短期抗凝中的疗效对比: 2024年; 目的探讨双联抗血小板治疗(Dual Antiplatelet Therapy,DAPT)基础上利伐沙班与低分子肝素在急性冠状动脉综合征(Acute Coronary Syndrome,ACS)患者短期抗凝治疗的安全性及有效性对比。方法选取2022年1月至2023年1月在我院收治的ACS患者100例,按随机数字表法分为利伐沙班组(n=50)和低分子肝素组(n=50),两组患者均进行DAPT治疗,利伐沙班组患者给予口服利伐沙班片进行治疗,低分子肝素组给予皮下注射低分子肝素进行治疗,对比两组患者不同程度出血发生情况、不良心血管事件发生情况、凝血指标[凝血酶时间(Thrombin Time,TT)、活化部分凝血活酶时间(Activated Partial Thromboplastin Time,APTT),凝血酶原时间(Prothrombin Time,PT)和血浆纤维蛋白原(Fibrinogen,FIB)]。结果干预后,利伐沙班组总出血率低于低分子肝素组;利伐沙班组不良性心血管事件发生率低于低分子肝素组;利伐沙班组TT、APTT、PT升高且较低分子肝素组更明显,利伐沙班组FIB下降且较低分子肝素组更明显,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论在ACS患者DAPT治疗基础上,利伐沙班短期抗凝效果优于低分子肝素,且出血率及不良心血管事件发生率更低,具有安全性。; 秦忠吴志福黄有敏刘文杰; 关键词：DAPT 利伐沙班低分子肝素 ACS 抗凝治疗

1例烟雾病合并子宫内膜异位症患者围手术期抗血小板药物调整及术后预防内异症复发药物选择的病例分析: 2024年; 目的:探讨临床药师在烟雾病患者围术期个体化治疗与用药监护中的工作要点。方法:参与1例烟雾病合并子宫内膜异位症患者围术期双联抗血小板治疗的药物调整、围术期应用质子泵抑制剂及深部子宫内膜异位症术后预防复发方案的制订与用药监护。结果:通过对患者的个体化评估确定符合患者的双联抗血小板治疗在围术期停药方案,制订个体化的围术期应用质子泵抑制剂及深部子宫内膜异位症术后预防复发方案。结论:个体化用药方案的制订及用药监护是临床药师开展药学服务的切入点。; 罗莉婷金经; 关键词：烟雾病子宫内膜异位症双联抗血小板预防复发

DAPT在维持扩展多潜能干细胞多能性及提高其增殖能力中的应用: 本发明公开了DAPT在维持扩展多潜能干细胞多能性及提高其增殖能力中的应用。本发明首次发现DAPT能够有效维持扩展多潜能干细胞多能性并提高其增殖能力，解决了EPSC增殖过程中多能性逐渐丢失的问题，本发明可以实现EPSC的体...; 赵谦宋文鹏卢惠迪顾雨春吴理达刘颖

抗EGFRvⅢCAR-T疗法联合Notch1通路抑制剂对人胶质瘤起始细胞自我更新能力的抑制作用: 2024年; 目的观察抗表皮生长因子受体vⅢ嵌合抗原受体基因修饰T淋巴细胞(抗EGFRvⅢCAR-T)疗法联合Notch1通路抑制剂DAPT对人胶质瘤起始细胞(GICs)自我更新能力的抑制作用。方法将胶质母细胞瘤原代细胞分为DT007和DT008两部分,经干细胞成球培养后采用免疫磁珠法分选,Western blotting法及免疫荧光法鉴定为GICs,分别命名为PA37S和PA38S。取PA37S、PA38S两种细胞,每种细胞随机分为对照组(加入细胞培养液)、DAPT组(加入10µmol/L DAPT)、CAR-T组(加入慢病毒转染获得的抑制EGFRvⅢ表达的抗EGFRvⅢCAR-T淋巴细胞)、CAR-T+DAPT组(加入抗EGFRvⅢCAR-T淋巴细胞和10µmol/L DAPT),均培养24 h。采用Western blotting法检测细胞EGFRvⅢ、Notch1活化相关指标Hes1蛋白相对表达量,成球实验检测细胞球直径和数目,极限稀释实验检测5、10、20、50、100、200、500个/孔细胞密度下的细胞球数目。结果在PA37S、PA38S细胞中,CAR-T组、CAR-T+DAPT组EGFRvⅢ蛋白相对表达量均低于对照组、DAPT组,DAPT组、CAR-T+DAPT组Hes1蛋白相对表达量均低于对照组、CAR-T组(P均<0.05)。成球实验结果显示,在PA37S、PA38S细胞中,DAPT组、CAR-T组、CAR-T+DAPT组细胞球数量和直径均低于对照组,以CAR-T+DAPT组降低更明显(P均<0.05)。极限稀释实验结果显示,在PA37S细胞和PA38S细胞中,5、10个/孔细胞密度下各组细胞球数量比较差异均无统计学意义(P均>0.05);20个/孔细胞密度下CAR-T+DAPT组细胞球数量低于对照组,50、100、200个/孔细胞密度下CAR-T+DAPT组细胞球数量均低于对照组、DAPT组、CAR-T组,500个/孔细胞密度下DAPT组、CAR-T组、CAR-T+DAPT组细胞球数量均低于对照组且CAR-T+DAPT组降低更明显(P均<0.05)。结论抗EGFRvⅢCAR-T疗法联合DAPT可抑制GICs的自我更新能力。; 周星辰王大巍赵彪束汉生程哲闵敬亮; 关键词：NOTCH1 自我更新

通督调神针刺法联合DAPT治疗短暂性脑缺血发作的临床效果分析: 2024年; 目的:探究通督调神针刺法联合双重抗血小板(DAPT)治疗短暂性脑缺血发作(TIA)的临床效果。方法:选取2020年5月—2022年5月我院收治的78例TIA患者为观察对象,根据数字随机法分为观察组及对照组,各39例,对照组采用DAPT治疗,观察组在此基础上联合通督调神针刺法治疗。比较两组患者的临床疗效、脑氧代谢指标、脑血流动力学、血清因子[人血浆脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)、可溶性血管细胞黏附因子(sVCAM-1)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)]水平。结果:观察组的总有效率为94.87%,高于对照组的79.49%;治疗后,观察组左椎动脉、右椎动脉、基底动脉血流速度及CjvO_(2)、SjvO_(2)水平均高于对照组(P<0.05),观察组的Lp-PLA2、sVCAM-1及HIF-1α水平均低于对照组(P<0.05)。结论:采用通督调神针刺法联合DAPT方案治疗TIA患者疗效确切,可有效改善患者脑氧代谢、脑血流动力学水平,降低其血管炎症反应,改善血管内皮功能。; 习淑静; 关键词：短暂性脑缺血脑血流动力学脑氧代谢

DAPT对慢性社会挫败应激诱导小鼠抑郁样行为的作用及机制: 2023年; 目的探究DAPT对慢性应激诱导的小鼠抑郁样行为的作用及机制。方法C57BL/6J小鼠给予慢性社会挫败应激(chronic social defeat stress,CSDS)处理10 d以建立抑郁模型,药物处理组小鼠每天腹腔注射DAPT 5 mg·kg^(-1)。通过社会接触、糖水偏爱、旷场、强迫游泳和悬尾实验来评价小鼠的抑郁样行为;采用Western blot检测小鼠海马NLRP3、ASC、caspase-1、TNF-α、p62、Atg7、Atg5和Beclin1蛋白的表达,运用ELISA检测小鼠海马IL-1β和IL-18的表达水平。结果CSDS诱导小鼠出现明显的抑郁样行为,同时增加了小鼠海马NLRP3、ASC、caspase-1的表达和炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-18的水平,另外,CSDS处理小鼠海马自噬相关蛋白Atg7、Atg5和Beclin1表达明显减少,而p62的表达则明显增加。DAPT处理能明显改善CSDS诱导的小鼠抑郁样行为,并能抑制NLRP3、ASC、caspase-1、TNF-α、IL-1β、IL-18以及p62蛋白表达的增加和Atg7、Atg5和Beclin1蛋白表达的减少。结论DAPT能够改善慢性应激诱导的小鼠抑郁样行为,其机制可能与其抑制NLRP3炎症小体激活和上调自噬功能有关。; 黄静李永何鑫段文馨吴文宁; 关键词：DAPT 抑郁炎症自噬

Notch信号通路抑制剂DAPT改善酒精诱导的斑马鱼神经元分化障碍被引量：1: 2023年; 目的探讨Notch信号通路在胎儿酒精谱系障碍(FASD)斑马鱼模型的神经元分化及及感觉-运动能力中的作用。方法首先,将斑马鱼胚胎分为二甲基亚砜(DMSO)组和50μmol/L氮-[氮-(3,5-二氟苯乙酰基)-L-丙氨酰]-S-苯基甘氨酸丁酯(DAPT,Notch信号通路抑制剂)处理组,检测比较两组斑马鱼的死亡率、孵化率以及畸形率;比较两组斑马鱼的身体长度;利用原位杂交和qRT-PCR技术检测两组神经干/前体细胞标志物sox2、神经前体细胞分化因子neurogenin1、神经元标志物huc的表达;检测两组在无刺激、强光、震动刺激情况下的行为学表现。其次,将斑马鱼胚胎分为DMSO组、1.5%酒精处理组、DAPT处理组、酒精和DAPT联合处理组,利用原位杂交和qRT-PCR技术检测各组sox2、neurogenin1、huc的表达,检测Notch信号通路相关基因(Notch)信号受体notch1a,促进神经发育的靶基因her8a及Notch胞内活性片段(NICD)的mRNA表达水平;检测各组在无刺激、强光、震动刺激情况下的行为学表现。结果50μmol/L DAPT处理斑马鱼胚胎后,受精后1 d(1 dpf)胚胎死亡率(P<0.01)显著增加,2 dpf孵化率显著降低(P<0.01),3 dpf畸形率(P<0.001)显著增加,15 dpf斑马鱼体长显著缩短(P<0.05);斑马鱼胚胎sox2表达水平显著降低(P<0.01),neurogenin1(P<0.05)和huc mRNA(P<0.01)表达水平显著增加;在无刺激、强光、震动刺激情况下,DAPT处理组的斑马鱼运动距离均显著缩短(P<0.001),运动速度均显著降低(P<0.05)。单独使用1.5%酒精处理斑马鱼胚胎后,notch1a、her8a及NICD的mRNA表达水平显著升高(P<0.05);1.5%酒精联合DAPT处理斑马鱼胚胎后,较酒精单独处理组,neurogenin1和huc mRNA表达水平显著增加,sox2 mRNA表达水平显著降低(P<0.01),在强光刺激下的运动距离显著变长,运动速度显著变快(P<0.05)。结论酒精上调斑马鱼胚胎Notch信号、抑制神经元分化并降低感觉-运动能力,而抑制Notch信号通路可改善斑马鱼胚胎�; 殷果李荣刘岳飞王晓睛吴炳义; 关键词：酒精神经元分化 NOTCH信号通路 DAPT

VEGF combined with DAPT promotes tissue regeneration and remodeling in vascular grafts: 2023年; Previous research on tissue-engineered blood vessels(TEBVs)has mainly focused on the intima or adventitia unilaterally,neglecting the equal importance of both layers.Meanwhile,the efficacy of grafts modified with vascular endothelial growth factor(VEGF)merely has been limited.Here,we developed a small-diameter graft that can gradually release VEGF andγsecretase inhibitor IX(DAPT)to enhance tissue regeneration and remodeling in both the intima and adventitia.In vitro,experiments revealed that the combination of VEGF and DAPT had superior pro-proliferation and pro-migration effects on endothelial cells.In vivo,the sustained release of VEGF and DAPT from the grafts resulted in improved regeneration and remodeling.Specifically,in the intima,faster endothelialization and regeneration of smooth muscle cells led to higher patency rates and better remodeling.In the adventitia,a higher density of neovascularization,M2 macrophages and fibroblasts promoted cellular ingrowth and replacement of the implant with autologous neo-tissue.Furthermore,western blot analysis confirmed that the regenerated ECs were functional and the effect of DAPT was associated with increased expression of vascular endothelial growth factor receptor 2.Our study demonstrated that the sustained release of VEGF and DAPT from the graft can effectively promote tissue regeneration and remodeling in both the intima and adventitia.This development has the potential to significantly accelerate the clinical application of small-diameter TEBVs.; Tao YangGuangxu LiXifeng LiBoyang WeiHengxian SuWenchao LiuShenquan GuoNan YangTao XuChuanzhi Duan; 关键词：VEGF NOTCH GRAFT REMODELING

不同剂量利伐沙班与DAPT联合治疗ACS支架植入术后合并高危血栓栓塞风险的NVAF患者的效果比较被引量：1: 2023年; 目的比较不同剂量利伐沙班与双联抗血小板治疗(DAPT)联合治疗急性冠脉综合征(ACS)支架植入术后合并高危血栓栓塞风险的非瓣膜性心房颤动(NVAF)患者的效果。方法回顾性选取2017年1月—2022年6月乐山市人民医院收治的ACS支架植入术后合并高危血栓栓塞风险的NVAF患者370例作为研究对象。将采用利伐沙班20 mg/d+DAPT的123例患者作为高剂量组,利伐沙班15 mg/d+DAPT的137例患者作为中剂量组,利伐沙班10 mg/d+DAPT的110例患者作为低剂量组。统计比较3组患者在治疗期间发生主要不良心血管事件、出血事件、出血事件严重程度。结果 3组主要不良心血管事件发生率及总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。3组各项出血事件发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。中剂量组、低剂量组出血事件总发生率低于高剂量组(P<0.016 7)。3组大出血、小出血发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。中剂量组、低剂量组轻微出血发生率低于高剂量组(P<0.016 7)。结论 ACS支架植入术后合并高危血栓栓塞风险的NVAF患者无论选择何种剂量的利伐沙班+DAPT的三联抗栓方案均有较好的抗栓效果,均能有效预防主要不良心血管事件的发生,其中中等剂量或低剂量利伐沙班+DAPT联合安全性较高,出血事件相对较少,且多为轻微出血。; 张慧童素霞; 关键词：利伐沙班双联抗血小板治疗

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