搜索到29109篇“ SOEING“的相关文章
- 应用SOEing方法构建SOD1-G93A的真核表达载体被引量：1
- 2013年
- 目的构建铜/锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn superoxide dismutase,SOD1)-G93A的真核表达载体。方法应用重叠区扩增基因拼接法(SOEing)分别扩增前段M1基因与包含突变位点的后段M2基因,然后将2段基因拼接起来,得到SOD1-G93A基因,并克隆至pcDNA3.1(-)真核表达载体上。结果成功扩增出SOD1-G93A基因,测序结果与GenBank完全一致;对重组质粒SOD1-G93A-pcDNA3.1(-)进行双酶切鉴定,测序结果与预期完全一致。结论成功构建了SOD1-G93A-pcDNA3.1(-)真核表达载体。
- 陆玉成车峰远苏全平尤翠平王龙王富敏于继徐
- 关键词：点突变肌萎缩侧索硬化重叠区扩增基因拼接法
- 利用重叠PCR实现乙肝表面抗原CTL表位的替换
- 2009年
- 目的以磷酸酰肌醇蛋白聚糖-3蛋白(glypican-3,GPC3)的CTL表位EYILSLEEL替换HBsAg中内源性CTL表位LLD,构建用于预防和治疗乙肝的DNA疫苗。方法以重组表面抗原基因pcHBsAg质粒为模板,应用重叠延伸PCR扩增出含EYILSLEEL表位的HBsAg基因HBsAg/GPC3,将其插入pBSSK+载体中,构建出pBSSK/GPC3载体。利用DNA重组技术将其定向插入真核表达载体pcDNA3.1+中,将真核表达载体经PCR、酶切和测序鉴定,构建表达CTL表位EYILSLEEL的DNA疫苗。结果酶切和测序的结果显示序列无错配,获得了完整表达EYILSLEEL表位的真核质粒pcDNA3-HBsAg/GPC3。结论成功将EYILSLEEL表位替换HBsAg的内源性CTL表位,构建了pcDNA3-HBsAg/GPC3真核表达质粒。
- 王文敬黎诚耀李明松
- 关键词：重叠延伸PCR
- C型乙型肝炎病毒基因SOEing法引入228位点突变被引量：1
- 2008年
- 目的为获取乙型肝炎病毒(HBV)基因分型芯片病毒靶序列,对C型HBV第228位碱基进行点突变。方法通过不同基因型HBV全基因组的序列比对分析,显示基因型A,C,D,G在228位上的碱基为G,而基因型B,E,F,H为A,所以检测该位点的碱基类型可以实现HBV基因型的初步分型。结果将C型乙肝病毒第228位上的单位碱基由G突变为A,经测序后证明突变成功。结论重叠区扩增基因拼接法(SOEing)是一种简便引入点突变的方法,可以应用此法制备HBV基因分型芯片检测基因片段序列。
- 徐晓雪房凯钟连生潘忠诚吴土焕赵雨杰
- 关键词：乙型肝炎病毒基因分型重叠区扩增基因拼接法
- SOEing法构建EGFP真核表达载体及其在杜氏盐藻中的表达被引量：1
- 2007年
- 通过重叠区扩增基因拼接法(Gene splicing by overlap extension,SOEing)构建含有杜氏盐藻(Dunaliella salina)硝酸盐还原酶(NR)基因5′-上游序列(Pnr)and 3′-端序列(Tnr)的EGFP真核表达载体,并将其转化杜氏盐藻。利用改进的SOEing法,将杜氏盐藻NR基因Pnr与报告基因EGFP cDNA融合,并与pEGM-7zf克隆载体连接,顺序将盐藻NR基因Tnr序列与融合片段相连,构建含Pnr-EGFP-Tnr表达盒的盐藻真核表达载体p7NET。电击法转化杜氏盐藻,在盐藻转化株中观察到了EGFP的瞬时表达。此研究为转基因杜氏盐藻研究和成功建立杜氏盐藻生物反应器奠定了实验基础。
- 李杰闫红霞曲东京刘红涛鲁照明薛乐勋
- 关键词：杜氏盐藻真核表达载体
- SOEing法在构建人瘦蛋白乳腺表达载体中的应用被引量：2
- 2004年
- 目的 :将奶牛CSN2 5′端启动子区与人瘦蛋白cDNA序列进行拼接 ,进而构建人瘦蛋白乳腺特异性表达载体。方法 :设计特殊的“巨型引物” ,运用PCR方法分别从质粒pBBC和pHL上扩增了牛CSN2 5′端启动子 ( 2 8kb)和有完整读码框的人瘦蛋白基因。利用改进的重叠区扩增基因拼接法 (SOEing法 ) ,将两个独立的片断进行了拼接。结果 :得到了两者线形融合基因 。
- 刘金龙刘津杨瑞锋张涌
- 关键词：SOEING乳腺启动子奶牛重叠区扩增基因拼接法
- 重叠区扩增基因拼接法在构建膜锚定共刺激分子融合基因上的应用被引量：4
- 2002年
- 目的 将小鼠共刺激分子 B7- 1(m B7- 1)基因的胞外区与人胎盘碱性磷酸酶 (h PL AP- 1) C末端信号肽序列进行拼接 ,探讨其形成融合基因的作用。方法 利用重叠区扩增基因拼接法 ,分别扩增 h PL AP- 1C末端信号肽序列和 m B7- 1基因的胞外区序列 ,然后将二段基因拼接起来 ,拼接后与 p GEM- T克隆载体连接 ,酶切和测序鉴定。结果 分别成功扩增出 h PL AP- 1C末端信号肽序列 15 5 bp和 m B7- 1基因的胞外区序列 76 4 bp,并将二段基因序列成功拼接 (891bp) ,经测序是正确的。结论 重叠区扩增基因拼接法能拼接 m B7- 1基因的胞外区与 h PL AP-1C末端信号肽序列 。
- 易平勇余海马文学孙文军姜槐
- 关键词：融合蛋白质类碱性磷酸酶胎盘重叠区扩增基因拼接法
- 利用SOEing技术构建的大肠杆菌肠毒素LTB—STI融合基因在原核生物中的高效表达
- 利用SOEing技术构建LT—ST融合基因,并将其克隆到表达载体pGEX—4T—3载体上,转化到大肠杆菌BL21中得到重组菌株BL21(P—LS),经序列分析表明该重组质粒具有正确的基因序列和阅读框,具有起始密码子ATG...
- 王莹周智爱李震曹祥荣
- 文献传递
- 华榛播种育苗技术被引量：1
- 2018年
- 华榛为桦木科榛属落叶乔木,为中国特有的稀有珍贵树种,已陷入濒危境地。文章介绍华榛生物学特性及应用价值,并从采种、育苗、栽植等方面总结华榛育苗技术,为华榛优质苗木培育提供参考。
- 李翩翩张国禹黄桂云邱利文
- 关键词：播种育苗
- SIP-GAPDH融合基因的构建与原核表达
- 利用重叠延伸(SOEing) PCR技术,将罗非鱼源无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)ZQ0910株SIP 基因与GAPDH基因通过Linker序列融合,构建成为SIP-GAPDH融合基因.经...
- 李桂欢王蓓鲁义善汤菊芬黄郁葱吴灶和简纪常
- 关键词：SOEING原核表达
- 群体感应调控的GFP报告质粒构建与表达
- 2009年
- 根据重叠区延伸基因拼接法(SOEing)设计特别的引物,运用PCR分别从pLuxI-aiiA质粒和pEGFP-N1质粒上扩增海洋费氏弧菌(Vibrio fischeri)荧光素酶操纵子的启动子pLuxI和绿色荧光蛋白基因EGFP。然后利用SOEing法将这两个独立片段拼接得到pLuxI-EGFP融合基因,接着使用AatⅡ、HindⅢ限制性酶双酶切pLuxI-EGFP融合基因和载体pluxCcdB3,再用T4 DNA连接酶进行连接,接着转化DH5α感受态细菌。挑取长出的单克隆培养并抽提质粒,经测序鉴定质粒构建成功。以GFP报告质粒和pLuxRI2质粒共转化DH5α细菌,流式细胞计检测共转化菌有明显的荧光信号。
- 王建军曹旭妮叶邦策
- 关键词：SOEING流式细胞计
相关作者
- 徐晓雪
- 作品数：33被引量：58H指数：5
- 供职机构：中国医科大学附属第一医院
- 研究主题：癫痫大鼠 遗传性癫痫 遗传性 海马 电压门控性钙通道
- 钟连生
- 作品数：3被引量：2H指数：1
- 供职机构：中国医科大学基础医学院
- 研究主题：乙型肝炎病毒基因 乙型肝炎病毒 基因分型 结构域 系统进化树
- 张红娟
- 作品数：2被引量：3H指数：1
- 供职机构：中国计量学院生命科学学院浙江省生物计量及检验检疫技术重点实验室
- 研究主题：单核细胞增生李斯特菌 蜂产品 双重PCR 荧光定量PCR 穿梭载体
- 刘津
- 作品数：2被引量：7H指数：2
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院
- 研究主题：基因打靶 动物乳腺生物反应器 转基因 体细胞克隆 乳腺生物反应器
- 于继徐
- 作品数：25被引量：50H指数：4
- 供职机构：临沂市人民医院
- 研究主题：肌萎缩侧索硬化 氧化应激 SOD1 献血者 献血
