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α-乳白蛋白单克隆抗体的制备及斑点印迹定性检测方法的建立被引量：2: 2014年; 以α-乳白蛋白为抗原免疫Balb/c小鼠,采用淋巴细胞杂交瘤技术制备抗α-乳白蛋白单克隆抗体;采用碳二亚胺法,并通过工艺优化,将单抗与量子点高效偶联;在此基础上,建立了基于斑点印迹技术定性检测乳制品中过敏原α-乳白蛋白的方法。结果表明:采用杂交瘤技术制备的单克隆抗体特异性好,与牛奶中其他蛋白无交叉反应;当量子点、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)、N-羟基丁二酰亚胺(NHS)、单抗摩尔比为1∶10∶6∶4时,量子点与单抗有较好的偶联效果;以量子点标记单抗建立的斑点印迹方法可直观、快速的定性分析乳制品中过敏原α-乳白蛋白。因此,该方法具有一定的实用价值。; 龙彩云郑义成程芬芬杨安树陈红兵; 关键词：Α-乳白蛋白单克隆抗体量子点斑点印迹

鸡蛋过敏原卵转铁蛋白标准物质候选物的研究被引量：1: 2017年; 目的:制备高纯度的鸡蛋过敏原卵转铁蛋白,并详细表征其理化性质及免疫学性质,满足标准物质候选物的质量要求。方法:通过两步柱层析法制备卵转铁蛋白并分装、冻干,然后借助质谱鉴定身份;采用SDS-PAGE银染方法鉴定纯度,圆二色光谱、荧光光谱和核磁共振表征高级结构;利用Bradford法检测含量和SDS-PAGE银染方法评估稳定性,间接ELISA方法评估其与Ig E结合能力。结果:制备的蛋白经质谱鉴定为鸡蛋卵转铁蛋白,分子量约79.55 ku,等电点为6.85,纯度高达94.6%;结构分析显示,制备的卵铁蛋白保留了其天然结构特性,并且冻干未使卵转铁蛋白的结构产生明显的变化;在4℃条件下储藏5个月,卵转铁蛋白的含量、纯度、结构和免疫学活性均无明显变化。结论:制备的卵转铁蛋白可作为标准物质候选物。; 袁锦周煌佟平吴志华陈红兵高金燕; 关键词：卵转铁蛋白

花生过敏原蛋白Ara h 6基因克隆和原核表达被引量：6: 2016年; 本实验首先从花生中提取总RNA,利用反转录聚合酶链式反应技术克隆了花生过敏原蛋白Ara h 6全c DNA,并以此为模板扩增出Ara h 6目的基因。将目的基因与p MD19-T Simple质粒进行重组后转入BL21(DE3)宿主表达菌中,异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷诱导产物表达,并利用镍离子亲和层析纯化表达产物。DNA测序结果显示Ara h 6基因片段全长为438 bp,编码145个氨基酸,与已知该蛋白DNA序列97%相同;十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示表达产物分子质量为24 k D,与融合组氨酸标签的重组Ara h 6蛋白理论分子质量相符;质谱鉴定结果表明重组蛋白的一级结构与天然Ara h 6匹配度为100%;Western blotting结果显示融合蛋白能够为抗Ara h 6多克隆抗体所识别,具有免疫原性。; 詹少德邱昌将朱盼吴志华陈红兵; 关键词：花生 ARA H 基因克隆表达质谱鉴定

酪蛋白糖基化对其胰蛋白酶消化物在免疫低下模型小鼠中免疫活性的影响被引量：2: 2020年; 本研究揭示酪蛋白美拉德糖基化反应对其胰蛋白酶消化物在免疫低下小鼠中免疫活性的影响。通过酪蛋白与乳糖发生美拉德糖基化反应得到糖基化酪蛋白,利用胰蛋白酶消化分别制备酪蛋白消化物和糖基化酪蛋白消化物,并用80 mg/kg mb的环磷酰胺处理小鼠3 d以诱导其出现免疫低下;低(100 mg/kg mb)、中(200 mg/kg mb)和高(400 mg/kg mb)剂量的酪蛋白消化物灌胃小鼠25 d后,测定小鼠免疫器官指数(脾脏指数和胸腺指数)、血清生化指标、血清免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)质量浓度、脾淋巴细胞增殖指数和自然杀伤(natural killer,NK)细胞活力。结果表明,与生理盐水处理的正常组小鼠相比,模型组小鼠的免疫状况低下,其免疫器官指数、血清生化指标、血清中Ig质量浓度、脾淋巴细胞增殖指数和NK细胞活力等指标显著降低(P<0.05)。与模型组小鼠相比,中、高剂量酪蛋白消化物灌胃小鼠脾脏指数和胸腺指数分别增加35.9%~66.4%和50.5%~62.9%,血清IgM、IgA和IgG质量浓度分别增加21.6%~30.4%、27.1%~41.8%和37.2%~45.1%,脾淋巴细胞增殖指数及NK细胞活力分别增加34.2%~51.1%和32.1%~90.7%;中、高剂量糖基化酪蛋白消化物灌胃小鼠后脾脏指数和胸腺指数分别增加27.7%~51.9%和39.2%~52.6%,血清IgM、IgA和IgG质量浓度分别增加19.1%~29.0%、21.8%~35.3%和30.1%~41.6%,脾淋巴细胞增殖指数及NK细胞活力分别增加32.9%~41.6%和27.3%~81.1%。酪蛋白消化物和糖基化酪蛋白消化物均可明显减轻由环磷酰胺引起的上述免疫指标水平下降,且酪蛋白消化物比糖基化酪蛋白消化物具有更好的免疫指标水平提升作用。酪蛋白的美拉德糖基化反应会降低酪蛋白消化物对小鼠免疫状况的提升作用。; 时佳刘宛宁付余赵新淮; 关键词：酪蛋白美拉德反应糖基化免疫作用

发酵法降低豆粕致敏性及发酵豆粕在养殖业中的应用被引量：4: 2015年; 豆粕蛋白质含量丰富,氨基酸比例均衡,是优良的植物性蛋白来源。然而,豆粕中大豆过敏原蛋白等抗营养因子的存在降低了动物对豆粕营养物质的吸收和利用,是限制其广泛应用于动物饲料中的主要原因。该文简述了豆粕中过敏原蛋白对动物机体的危害及豆粕常用发酵方式,全面阐述了发酵对豆粕中过敏原降解、致敏性变化的影响以及发酵豆粕在养殖业中的应用,旨在为进一步深入研究和高效利用发酵豆粕提供科学依据。; 程友飞左玲玲闵芳芳杨安树陈红兵范膑; 关键词：豆粕微生物发酵致敏性养殖业

日本食物过敏原的管理及对我国的启示被引量：16: 2016年; 随着我国食物过敏问题对消费者和食品企业的影响越来越严重,食物过敏原的管理和控制问题亟待解决。日本是世界上第一个建立强制性食物过敏标识并加以立法保护的国家,现已形成完善的食物过敏原标签管理系统。日本食物过敏原法规的形成过程、约束范围及食物过敏原标签的标注方式、不规范标注的处罚措施和过敏原成分的检测方法,对中国制定符合本国国情的食物过敏原强制性管理法规和建立相关的检测技术具有启示作用。; 郑颖陈曙光叶钰方卿颖陈红兵高金燕; 关键词：食物过敏标签

微波固相合成糖基化卵清蛋白及其理化功能特性研究被引量：1: 2016年; 以卵清蛋白(ovalubumin,OVA)和葡萄糖(glucose)为原料,以传统加热为对比,研究不同底物配比下微波加热协同美拉德反应对卵清蛋白的游离氨基含量、p H值、褐变程度、乳化性质和起泡性的影响。结果表明:在微波加热以及底物中蛋白质比例较低的条件下,更能促进糖基化OVA的游离氨基含量和p H值的下降,褐变程度、乳化性质及起泡性质的提高。; 段邓乐涂宗财王辉沙小梅黄涛; 关键词：卵清蛋白葡萄糖美拉德反应

日本沼虾原肌球蛋白线性表位预测研究被引量：4: 2020年; 本文旨在预测日本沼虾原肌球蛋白的线性表位,为相关食物过敏的识别与检测提供依据,同时为基于抗原表位的致敏性消减提供靶标。采用DNAStar软件、SOPMA、BepiPred 1.0 Server及ABCpred在线网站预测日本沼虾原肌球蛋白的B细胞线性表位,应用SYFPEITHI、NetMHCII 2.3 Server与NetMHCIIpan 3.2 Server预测T细胞表位。综合分析以上预测结果,表明日本沼虾原肌球蛋白可能的B细胞线性表位有21RADTLEQQNKEANN^34、37EKTEEEIRTTQKKMQQ^52、71LEEKEKA^77、99LERSEERLN^107、119AADESER^125、134SLSDEER^140、158ADRKYDE^164、177ERAEERAETG^186、210SEEKANQREEAYKE^223、262NEKEKYK^268,可能的T细胞表位有82EGEVAALNRRIQLL^95、105RLNTATTKLAEAS^117、165VARKLAMVEADLE^177、195EELRVVGNNLKSLE^208、222KEQIKTLTNKLKAA^235。该结果可为继续深入开展日本沼虾过敏原基础性研究提供更精准的靶标。; 华希玮谢彦海谢彦海; 关键词：日本沼虾原肌球蛋白 B细胞表位 T细胞表位

豆粕蛋白在小鼠胃肠道内的吸收与分布研究被引量：2: 2019年; 探讨一次性灌胃豆粕,不同时间段豆粕蛋白在小鼠胃肠道内的吸收与分布情况。以豆粕中的β-伴大豆球蛋白作为标记,采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验技术检测豆粕在小鼠胃肠道内不同部位的吸收量,并采用免疫金银染色技术,对其主要成分豆粕蛋白在胃肠道的分布位置进行示踪,明确其吸收途径。结果表明,当小鼠摄食豆粕0.5~1h后,豆粕蛋白主要分布于小肠内,部分于胃内,较少量残余豆粕蛋白分布于大肠内,且于摄食2~4h,豆粕蛋白在小鼠胃肠道内的吸收趋于稳定,这与普通蛋白的吸收位置和途径是一致的。采用稳定的食物蛋白质作为标记进行示踪,为研究食物在机体胃肠道内的吸收、分布情况提供了新的思路。; 童深广郝红江李洪波陈红兵曾辛吴志华; 关键词：豆粕小鼠酶联免疫免疫金银染色

食物过敏原致敏性评估方法研究进展被引量：8: 2014年; 食物过敏是一个全球性公共卫生问题,检测和评价食物过敏原的致敏性也日益受到重视。食物过敏原致敏性的评估方法可分为体内法、体外法和生物信息学比对法。体内法主要包括双盲安慰剂对照的食物激发实验、皮肤实验和动物模型。体外法包括过敏原吸附抑制实验、免疫印迹法、酶联免疫吸附实验和组胺释放实验等。生物信息学比对法主要用于转基因食物中过敏原的致敏性评价。虽然评价食物过敏原致敏性的方法众多,但是目前还没有一种独立的方法能够完全有效地评价食物过敏原的致敏性。因此,应尽快建立快速、高效、精准的评价方法。; 高琳杨安树高金燕陈红兵; 关键词：食物过敏原致敏性生物信息学

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国家高技术研究发展计划(2013AA102205)

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