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厦门出入境检验检疫局科技计划项目: 作品数：9 被引量：50H指数：5; 相关作者：王荣孔繁德徐淑菲吴德峰黄蓬英更多>>; 相关机构：福建农林大学厦门出入境检验检疫局厦门出入境检验检疫局检验检疫技术中心更多>>; 发文基金：国家质检总局科技计划项目质检公益性行业科研专项项目福建省自然科学基金更多>>; 相关领域：农业科学理学生物学更多>>

斑点免疫金渗滤法同时检测猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征抗体的研究被引量：1: 2008年; 在猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征单重斑点免疫金渗滤法的基础上,建立能同时检测HC和PRRS的双重斑点免疫金渗滤法。将提纯的HC和PRRS抗原同时包被在硝酸纤维膜上,利用胶体金标记SPA显色,当猪血清中含有HC、PRRS抗体时,则相应的点会显现红色(呈红色斑点),结果易于判断。且操作简单,耗时短,与猪细小病毒、口蹄疫和猪伪狂犬病毒阳性血清不发生交叉反应。; 王荣孔繁德陈琼吴德峰徐淑菲; 关键词：斑点免疫金渗滤法猪瘟蓝耳病胶体金

台湾甜椒种子中辣椒轻斑驳病毒检测及其致病型鉴定被引量：5: 2011年; 利用双抗体夹心酶联免疫吸附法(DAS-ELISA)、反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和基因序列分析法对一批台湾进境的辣椒种子进行病毒检测及致病型鉴定,同时使用特征序列扩增区域(SCAR)标记引物利用PCR方法对该辣椒品种进行L抗性基因检测。DAS-ELISA及RT-PCR结果表明,从该批种子中检测到辣椒轻斑驳病毒(Peppe rmild mottle virus,PM MoV)。PCR产物测序分析表明,该序列为PM MoV的外壳蛋白(CP)基因,与已报道的PM MoV序列同源性为92.4%～99.8%。CP蛋白氨基酸序列分析表明,该分离物(命名为TW分离物)属于PM MoV的P1,2,3致病型。抗性基因检测表明,该辣椒品种携带有L3抗性基因。TW分离物能够系统侵染该辣椒品种,意味着该分离物已经克服L3基因介导的抗性。本研究报道的PM MoV的P1,2,3致病型在中国大陆尚属首次,这对于抗病辣椒品种的选育具有重要的指导意义。; 廖富荣沈建国吴媛郭木金黄蓬英陈青陈红运林石明; 关键词：甜椒辣椒轻斑驳病毒种子传播外壳蛋白基因

猪瘟病毒SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法的建立和初步应用被引量：12: 2009年; 根据GenBank已发表的HCV 5’NTR核苷酸序列设计一对特异性引物，扩增位置在整个基因的221～377位，片段长度为167bp。提取由厦门出入境检验检疫局技术中心动物实验室保存的HCV细胞毒的RNA，并反转录成cDNA，以此cDNA为模板建立了SYBR Green I实时定量PCR检测猪瘟病毒的方法，并用该方法检测送检的临床疑似病料。结果表明：本研究建立的HCV-SYBR Green I PCR特异性强，与FMDV、PCV2、PRRSV、PPV、PRV等常见猪病毒病病原没有交叉反应；灵敏度高，可以检测到5．3×10^2的病毒拷贝数；操作简单，耗时短，只需3h即可完成整个试验过程，可初步用于临床检测。; 王荣孔繁德陈琼吴德峰徐淑菲; 关键词：SYBR HCV

SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测猪繁殖与呼吸综合征病毒被引量：3: 2009年; 根据GenBank发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）M基因核苷酸序列设计一对特异性引物,扩增位置在M基因的14744～14846位,片段长度为103bp。提取PRRS RNA,并反转录成cDNA,以此cDNA为模板建立了SYBR Green Ⅰ实时定量PCR检测PRRSV的方法。并用该方法检测送检的临床疑似病料,结果表明,本研究建立的PRRSV-SYBR Green I PCR特异性强,操作简单,耗时短,只需3h即可完成整个实验过程,可初步用于临床检测。; 王荣孔繁德陈琼吴德峰徐淑菲; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒

进境西瓜种子中西瓜细菌性果斑病菌的检测鉴定被引量：3: 2010年; 由嗜酸菌属西瓜种(Acidovorax citrulli)引起的西瓜细菌性果斑病是西瓜等葫芦科作物上的一种极具毁灭性的病害,该病原细菌可以由种子携带传播。本研究通过直接研磨种子,用双抗体夹心酶联免疫吸附测定法(DAS-ELISA)和免疫捕捉聚合酶链式反应法(IC-PCR)对进境的西瓜种子进行检测,并且对PCR产物进一步克隆测序。结果表明,在DAS-ELISA产生阳性结果的样品中,IC-PCR结果也产生阳性。序列分析表明,该序列与已知的该病菌16S rRNA基因的相应序列具有100%同源性。因此,2006年这批来自台湾的西瓜种子携带有嗜酸菌属西瓜种(Acidovorax citrulli)。; 廖富荣林石明方志鹏黄蓬英陈红运陈青吴媛; 关键词：西瓜种子 DAS-ELISA 种子携带

斑点免疫金渗滤法同时检测猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征抗体的研究: 在猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征单重斑点免疫金渗滤法的基础上,建立能同时检测HC和PRRS的双重斑点免疫金渗滤法。将提纯的HC和PRRS抗原同时包被在硝酸纤维膜上,利用胶体金标记SPA显色,当猪血清中含有HC、PRRS抗体时,...; 王荣孔繁德陈琼吴德峰徐淑菲; 关键词：斑点免疫金渗滤法猪瘟蓝耳病胶体金; 文献传递

进境番茄种子中番茄花叶病毒的检测与鉴定被引量：5: 2011年; 利用双抗夹心-酶联免疫吸附试验（DAF〉EI。ISA）和反转录-聚合酶链式反应（Rrr_PCR）方法对来自韩国的番茄种子进行种传病毒检测。结果表明，在该批番茄种子中检测到番茄花叶病毒（ToMV）和烟草花叶病毒（TMV）。PCR产物测序结果表明，ToMV特异引物（ToA／ToB）与TMV特异引物（TA／TB）扩增的片段均为ToMV的外壳蛋白（CP）基因及3’非编码区（3’-UTR），该片段与其他ToMV分离物的核苷酸序列相似性为98．2％～99．9％。本研究利用重新设计合成TMV和ToMV特异引物对该批种子进行RT-PCR检测，仅ToMV特异性引物（ToMfl／ToMrl）扩增到670bp的预期片段，TMV特异引物（TMfl／TMrl）则未出现特异性扩增，表明重新设计的引物可准确区分ToMV和TMV。以上结果证实该批番茄种子仅携带ToMV。; 廖富荣郭木金林石明陈红运陈青黄蓬英吴媛谢惠明; 关键词：番茄种子反转录-聚合酶链式反应番茄花叶病毒烟草花叶病毒种子传播

侵染百合的病毒种类及其检疫重要性被引量：6: 2011年; 在侵染百合的18种病毒中,有6种病毒为我国禁止进境的检疫性有害生物,在进境的百合中曾检出4种检疫性病毒,因而在进境百合中具有十分重要的检疫重要性。本文介绍了国内外报道的百合病毒种类和最新分类进展以及从进境百合中截获的病毒种类。; 廖富荣林石明吴媛沈建国黄蓬英陈青陈红运; 关键词：百合病毒检疫重要性

气相色谱/气质联用分析食品及环境基质中特丁硫磷残留量被引量：4: 2008年; 建立在食品及环境样品中特丁硫磷残留量的气相色谱检测及气质联用确证法。样品采用乙酸乙酯提取、活性炭-酸性氧化铝复合小柱净化，丙酮-正己烷混合溶液（体积比为1：9）洗脱，样液浓缩后经GC—FPD检测．外标法定量，GC—MS定性。GC—FPD法分析时，特丁硫磷在不同样品、不同水平的加标回收率为74．5％～103．3％．RSD为2．1％～11．7％（n=5），方法的检出限为0．001mg／kg.气质联用法确证时，特丁硫磷的SIM离子为186、231（Q，100）、288.; 郑向华方恩华庄丽丽杜凤君柴越强王兆守

斑点免疫金渗滤法同时检测猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征抗体的研究被引量：11: 2009年; 在猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征单重斑点免疫金渗滤法的基础上,建立能同时检测HC和PRRS的双重斑点免疫金渗滤法。将提纯的HC和PRRS抗原同时包被在硝酸纤维膜上,利用胶体金标记SPA显色,当猪血清中含有HC、PRRS抗体时,则相应的点会显现红色(呈红色斑点),结果易于判断。且操作简单,耗时短,与猪细小病毒、口蹄疫和猪伪狂犬病毒阳性血清不发生交叉反应。; 王荣孔繁德吴德峰徐淑菲; 关键词：斑点免疫金渗滤法猪瘟蓝耳病胶体金

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