国家自然科学基金(30660066)
- 作品数：21 被引量：58H指数：4
- 相关作者：刘亮明张吉翔罗杰郭宏兴于芳苹更多>>
- 相关机构：南昌大学第二附属医院南京医科大学上海交通大学附属第一人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市松江区科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 胃癌演化过程中PIAS3的表达研究
- 2010年
- PIAS3是近年鉴定的基因,是原癌基因STAT3的特异性抑制因子[1].我们前期实验已证实,PIAS3在胃癌组织内表达降低甚至缺失,而癌旁非瘤组织出现超高表达.在本文中,我们进一步研究了在胃癌演化过程中,PIAS3在胃黏膜病变各个阶段的表达情况,以期阐明PIAS3与胃癌发生和演化的关系.
- 鄢明果刘亮明杨道华孙玮玮张吉翔
- 关键词：PIAS3胃癌组织癌基因STAT3胃黏膜病变
- 早期百草枯中毒大鼠的急性肝损伤研究被引量：11
- 2014年
- 目的 探讨百草枯中毒大鼠肝细胞凋亡、炎症因子表达情况及其发生机制.方法 按随机数字表法将40只Wistar大鼠分为对照组（n=8）与模型组（n=32）.模型组腹腔注射20％百草枯浓缩液30 mg/kg;对照组则给予等量生理盐水.制模后0.5、1、3、7d分别处死8只大鼠,收集下腔静脉血及肝组织,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平;采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测IL-1β、TNF-α、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和p53的mRNA表达;采用底物显色法检测3d时肝组织天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶（caspase-3、-8、-9、-12）的活性;经苏木素-伊红（HE）染色后光镜下观察肝组织病理学改变.结果 模型组肝组织出现碎片状坏死、毛细血管扩张、炎性细胞广泛浸润等现象,且随时间延长明显加重.模型组0.5 d时血清IL-1β、TNF-α水平即明显高于对照组[IL-1β（ng/L）：220.13±69.74比0.14±0.03,TNF-α（ng/L）：102.66±26.43比0.16±0.02,P＜0.01和P＜0.05],分别于3d、1d时达高峰[IL-1β：（423.72±153.11） ng/L,TNF-α：（690.35±229.64） ng/L],随后均逐渐降低,7d时仍明显高于对照组[IL-1β：（357.47±87.28） ng/L,TNF-α：（12.39±5.06） ng/L,均P＜ 0.05].模型组肝组织IL-1β、TNF-α和iNOS的mRNA表达均较对照组明显升高,其峰值分别出现在1d、1d、3d时[IL-1β mRNA（灰度值）：1.569±0.057比0.123±0.016,TNF-α mRNA（灰度值）：0.683±0.077比0.261±0.025,iNOS mRNA（灰度值）：3.259±0.135比0.002±0.001,P＜0.05或P＜0.01].模型组早期p53 mRNA表达与对照组无差异,均为低表达,染毒7d时p53 mRNA表达显著增高（灰度值：2.959±0.086比0.263±0.032,P＜0.01）.模型组3d时肝组织caspase活性（pmol/mg）显著高于对照组（caspase-3：857.25±309.26比169.73±48.21,caspase-8：199.18±61.41比32.26±11.09,caspase-9：321.62±80.73比90.38±29.76,caspase-12：41
- 郭宏兴高珂罗亮邓庆文张艳平罗杰刘亮明
- 关键词：急性肝损伤天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶诱导型一氧化氮合酶
- 胸水中尾加压素Ⅱ检测在肿瘤性、结核性胸腔积液鉴别诊断中的应用被引量：4
- 2020年
- 目的观察尾加压素Ⅱ(UⅡ)检测在肿瘤性胸腔积液(MPE)、结核性胸腔积液(TPE)鉴别诊断中的应用价值。方法收集80例胸腔积液患者,其中MPE 30例、TPE 50例;采用酶联免疫吸附法检测两种患者胸水中UⅡ,绘制ROC曲线分析UⅡ鉴别诊断两种疾病的最佳截点、灵敏度、特异度、阳性预测值、准确度。结果 MPE、TPE患者胸水中UⅡ水平分别为(24. 906±22. 427)、(8. 525±8. 214) ng/m L,两者比较,P <0. 05。鉴别诊断MPE和TPE的UⅡ最佳截点为12. 635 ng/m L,曲线下面积为0. 779(95%CI 0. 672~0. 886),灵敏度为63. 3%,特异度为86%,阳性预测值为70. 37%,阴性预测值为79. 24%,正确诊断MPE 19例,TPE 42例,准确度为76. 25%。结论MPE患者胸水中UⅡ水平高于TPE患者,检测胸水中UII指标有助于MPE和TPE的鉴别诊断。
- 谢平白茹陈彩萍何玉杨雪杨雪刘亮明
- 关键词：胸腔积液肿瘤性胸腔积液结核性胸腔积液
- 大鼠内毒素性急性肝损伤后肝细胞凋亡与炎性因子的表达被引量：10
- 2008年
- 目的探讨脂多糖诱导D-氨基半乳糖胺致敏大鼠急性肝损伤肝细胞凋亡、炎性因子表达情况及其发生机制。方法56只大鼠分为0h对照组与1、2、4、6、24和48h脂多糖＋D-氨基半乳糖胺处理组。在相应时间点处死大鼠后收集肝组织及血清，肝组织苏木精-伊红染色后光学显微镜下观察；ELISA法检测血清细胞因子表达；反转录（RT）-PCR法检测TNF-α、IL-1β、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和p53基因表达；收集24h肝组织用底物显色法检测Caspase-3、8、9、12活性。组间比较用方差分析。结果经药物处理后，肝组织出现碎片状坏死、大量炎性细胞浸润等表现，从6h开始，24h和48h显著加重。血清TNF-α浓度在1h处理组为（727．8±261．3）ng／L，显著高于对照组及其他处理组（F=49．82，P〈0．01），2h处理组为（156．4±52．2）ng／L，显著低于1h组，但高于对照组（F=30．23，P〈0．01）；血清IL-1β浓度逐渐上升，24h处理组最高，为（360．5±121．6）ng／L（F=18．61，P〈0．01）。24h处理组肝组织Caspase-3、8、9、12活性明显高于对照组（F=84．96，P〈0．01）。iNOS基因在对照组无表达，药物作用后6h达最高，24h和48h则显著下降（F=34．07，P〈0．01）；p53基因在24h和48h处理组表达明显增高（F=37．43，P〈0．01）；TNF-α和IL-1β基因表达均较对照组升高（F=2．94，P〈0．05），其峰值均出现在1h处理组。结论小剂量脂多糖可诱导D-氨基半乳糖胺致敏大鼠发生急性肝损伤；Caspase-3、8、9、12活性明显增强是其特征性改变之一；肝损伤的发生与TNF-α、iNOS和p53基因早期高水平表达有密切关系。
- 郭宏兴刘亮明张吉翔罗杰徐江晶陈建勇熊高飞
- 关键词：内毒素类白细胞介素1
- 干扰素调节因子3在感染性疾病固有免疫机制中的研究进展
- 2015年
- 固有免疫系统是机体天然的免疫防御系统，是抵抗病原微生物感染的第一道防线。固有免疫功能发挥的一个重要机制在于固有免疫细胞模式识别受体（pattern recognition receptors,
- 朱彤刘亮明涂文娟谈志丽
- 关键词：干扰素调节因子3感染性疾病免疫机制模式识别受体免疫系统
- 鼠尾静脉流体力学转染技术对绿色荧光蛋白表达质粒器官靶向分布的影响被引量：7
- 2007年
- 目的:观察流体力学尾静脉注射对绿色荧光蛋白基因器官靶向性的影响,为今后质粒载体的基因治疗和功能研究寻找潜在的靶器官。方法:实验于2005-12/2006-04在江西省分子医学重点实验室完成。选用健康雄性昆明鼠40只,将32只小鼠按随机数字表法分为流体力学注射和常规注射两大组,每大组再分为转染组和对照组两个小组(n=8),并设正常对照组(n=8)。①流体力学转染组将100μg/只绿色荧光蛋白表达质粒溶液2mL在5s内快速注入尾静脉;对照组仅在5s内注入林格氏液2mL。②常规注射组则将2mL林格氏液或绿色荧光蛋白表达质粒溶液在30s左右注入尾静脉。注射结束后24h采集各组小鼠血清检测转氨酶,并采集肝、脾、心、肾、肺和脑组织进行冰冻切片,部分肝组织采用多聚甲醛固定后切片,荧光显微镜下观察。结果:40只小鼠全部进入结果分析,无脱失。①流体力学注射组和常规注射组小鼠血清转氨酶与正常对照组比较差异均无显著性意义(P>0.05)。②常规尾静脉注射引起少数肾小球细胞表达绿色荧光蛋白,而肝、脾、心、肺及脑等组织未见明显绿色荧光蛋白表达。③流体力学注射引起肝内绿色荧光蛋白高水平表达,肝细胞表达率接近45%,其他组织则无绿色荧光蛋白表达。结论:流体力学方法是肝靶向性的活体基因转染方法,绿色荧光蛋白可作为该方法进行目的基因研究的一个可靠和方便的示踪剂。
- 刘亮明罗杰张吉翔郭宏兴邓欢徐江晶尹东熊高飞
- 关键词：发光蛋白质类质粒
- 脂多糖(LPS)对小鼠Raw 264.7细胞Irak1bp1表达的影响
- 2019年
- 目的研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激小鼠Raw264.7细胞IL-1受体相关激酶1结合蛋白1(IL-1 receptor associated kinase 1 binding protein1,Irak1bp1)的表达情况。方法体外培养的小鼠Raw264.7细胞随机分为2组:A组为正常对照组,B组为LPS刺激组。LPS刺激小鼠Raw264.7细胞6h后收集细胞及上清液。采用实时荧光定量PCR法检测IL-6及Irak1bp1mRNA水平;采用ELISA分析培养上清液中IL-6含量;采用Western blot方法检测Irak1bp1蛋白质水平。结果LPS刺激组炎症因子IL-6mRNA及蛋白质水平较对照组明显增高(P<0.01),Irak1bp1mRNA及总蛋白质水平高于对照组(P<0.05);胞质内Irak1bp1蛋白质水平与对照组相比无明显变化,而胞核内Irak1bp1蛋白质水平较正常对照组增加(P<0.01)。结论LPS能够诱导Raw264.7细胞核内Irak1bp1表达,且该分子的表达上调可能与细胞的炎性因子释放相关。
- 谈志丽王迎迎何玉钟欢施青青杨雪徐国荣刘亮明
- 关键词：RAW264.7细胞小鼠
- UⅡ在炎症损伤性疾病中的作用被引量：4
- 2012年
- urotensinⅡ（UⅡ）是一个具有多种生物学活性的多肽类分子，除存在显著的血管活性作用外，近年还发现其与炎症损伤性疾病关系密切。研究显示，UⅡ通过增加血管通透性，促进炎症细胞浸润，刺激炎症细胞释放黏附分子、趋化因子及炎症细胞因子等环节在血管炎性损伤性疾病，心力衰竭，慢性肝炎、肝硬化，急性肝衰竭，慢性肾小球肾炎，肺癌等疾病的发生、发展中起作用。
- 于芳苹刘亮明
- 关键词：UROTENSIN炎症免疫
- Pim-3对暴发性肝功能衰竭大鼠的肝组织修复效应及机制分析被引量：1
- 2010年
- 目的 探讨Pim-3基因对暴发性肝功能衰竭（FHF）大鼠的肝组织修复效应.方法 将32只大鼠分为4组,健康对照组和3组处理组,每组8只.3组处理组分别以林格液、空载质粒（pEGFP-N2）和重组质粒（pEGFP-N2/Pim-3）溶液预处理大鼠,1 d后予脂多糖（LPS）/D-半乳糖胺（D-GalN）腹腔注射诱导FHF.8 h后或濒死期处死大鼠,采集血清和肝组织标本,检测血清转氨酶水平,RT-PCR和ELISA分别检测TNF-α和IL-1β基因表达及其血中浓度,原位末端凋亡（TUNEL）分析评估肝细胞凋亡水平,检测肝组织损伤程度.组间比较采用方差分析.结果 重组质粒注射能诱导目的 基因Pim-3和报告基因绿色荧光蛋白（GFP）在肝内高表达;与其他处理组相比,重组质粒组大鼠的生存率显著提高,血清转氨酶水平明显降低,且肝组织内出血坏死和炎性细胞浸润程度也明显减轻;重组质粒组肝凋亡指数为（10.2±6.9）%,显著低于林格液组的（83.1±12.6）%和空载质粒组的（79.9±13.4）%（P＜0.01）;外源Pim-3基因的应用显著降低了肝组织内TNF-α和IL-1β mRNA的表达,以及血清TNF-α和IL-1β蛋白的分泌水平.结论 Pim-3基因有助于保护大鼠免于LPS/D-GalN诱导暴发性FHF的发生,其机制可能是抑制肝内炎性细胞因子TNF-α和IL-1β的表达和分泌.
- 鄢明果张吉翔刘亮明高德勇徐国荣王迎迎
- 关键词：原癌基因肝再生白细胞介素1Β
- 微小RNA-3620在抗结核药物致肝损伤患者血浆中的表达及临床意义被引量：3
- 2017年
- 目的了解微小RNA（miRNA）-3620在抗结核药物诱导肝毒性（anti—tuberculosis druginduced hepatotoxicity，ATDH）患者血浆中的表达水平。方法ATDH和非ATDH患者各35例，实时荧光定量PCR检测两组患者血浆中miRNA-3620的相对表达量，两组间比较采用t检验；根据miRNA-3620水平绘制受试者工作特征曲线，评估血浆中miRNA-3620在ATDH诊断中的价值。结果ATDH患者和非ATDH患者血浆中miRNA-3620表达量分别为1．65±1．43和0．71±0．45，差异有统计学意义（t=3．703，P〈0．01）。miRNA-3620表达水平的最佳截点为1．15，曲线下面积为0．71（95％CI：0．43～1．45），miRNA-3620诊断ATDH的敏感度为60．0％、特异度为82.9％、阳性预测值为77．8％、阴性预测值为67．4％，正确诊断ATDH21例，非ATDH29例，准确度为71．4％。结论ATDH患者血浆中miRNA-3620表达水平明显升高。
- 谢平朱彤陈彩萍白茹赵晖朱伟星刘亮明
- 关键词：结核
